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γ谷氨酰转肽酶参考方法在提高临床检测正确度方面的应用

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三餐,少饮酒、少食含脂量高的食物,注意补充维生素A,忌暴饮暴食,及时补育,提高机动车驾驶员健康保护意识。参考文献:【1】孙立梅,州丹成人肥胖的流行病学分析度与高IIIL压、糖尿痛关系的研究Ⅱ】华南预防医学.2003.29(2):22—24【2】张秀芬,胡光荣驾驶职业卫生与健康【M】呼和涪特:内蒙古科学技术出版社.1999121:充水分。(科檗持充足的休息,充足的睡眠是保证驾驶员工作效率和行车安全的前提。④定期健康体检,对有心血管疾病家族史及曾有血压增高者定期随访,以便及早发现,及早治疗。⑤创造舒畅而轻松的工作环境,如改善道路的状况。这些预防措施对减少高血压的发生有重要意义。因此,在经济发展的同时对机动车驾驶员进行定期体检,通过体检等机会对机动车驾驶进行健康教编辑,张燕Y一谷氨酰转肽酶参考方法在提高临床检测正确度方面的应用邱剑蕴(上海市芷江西路社区卫生服务中心检验科,上海200070)1一谷氨酰转肽酶(1一GT)广泛分布于人体组织中,肾内最多,其次为胰和肝,胚胎期则以肝内最多,在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中,正常人血清中1一GT主要来自肝脏。正常值为3-50U/L(1一谷氨酰对硝基苯胺法),它作为肝脏功能异常和酗酒的标志已广泛的被临床接受【I。不仅如此,近年来发现1一谷氨酰转肽酶检测值与心血管疾病、肾病、代谢综合征等有关系,因此这项指标越来越被人们所重视口I。指标越关键,对其检测的正确度要求就越来越高。目前临床检测这一指标的方法本文吸取了其他单位的若干经验13-51,建立和完善本试验室的参考方法体系。以下是基本过程。其次按照根据IFCC发布的370C酶活性参考检测方法第六章的内容,准备实验所用试剂和原料,并根据要求配制反应样和检测被测量。最后根据检测的结果计算标准误差:取平均值与参考物质的差异作为系统误差,然后根据以下公式合成不确定度。公式1:u2I。部乙+s2Rw/n+b2公式2:b=X—x㈣£公式3:U。=—!!兰Vn式4:u一塑斗Z1资料与方法1.1一般资料N一甘氨酰甘氨酸(N-Glycylglycine)、NaOH、NaCI购自Sigma;L--谷酰基一3一羧基4一硝基苯胺(L—Glutamyl一3一carboxy-4一nitmanilide)购自Roche实验用水为美国Millipore纯水机生产的超纯水(导电率<21xS/em、pH值6.421)一级参考物质为:IRMM/IFCC452IFCC标定值:114.1±2.4U/L。诊断试剂:DENUOGGTLot:SEPL016定标品:RandoxCal235lLot:515UE靶值:153U/L质控品:RandoxHEl532Lot:503UE和HNl530Lot:722UN血清样本:10例,范围50~300U/L1.2仪器仪器紫外分光光度计岛津UV2A.50;Fluke点式温度计、Eppendorf移液器、梅特勒pH计、梅特勒十万分之一电子天平、控恒温水浴箱(国产)等。2结果2.1参考方法的建立与验证按照试验要求配制好相应的反应液,重复配制10次,每次检测3遍样本,见表1。表1对参考物质和定标品使用参考方法检测值从参考物质检测结果,可以计算出本试验室参考方法的测量不确定度为测量值与参考值的偏依为:b=112.685—114.I=1.415(根据公式2)测量值与参考值相对偏差为:l一号;i}=1.26%测量参考物质产生的不确定度:uc“2俪0.94=1.297(根据公式3)●收稿日期:2013—05—20万方数据参考物质赋值的不确定度:u。d:!塑;过=1.2(根据公式4)不确定度为:u。=、/瓦河西T西T耵亏7=1.88(根据公式1)合成不确定度为:u=2×u。。=3.76总不确定度占比:UPX。=3.76/114.1=3.3%2.2使用参考方法与DENUO试剂同时检测10例样本,见表2。表2使用参考方法与生化试剂检测值对比3讨论3.1表1结果表明使用本试验室建立的参考方法检测结果与参考物质赋值有负1.26%的偏差。使用参考方法检测Randox定标品,结果为151.78,与原赋值有0.8%的负偏差。说明本试验室建立的参考方法正确度高,重现性好。32表2表明检测血清样本时,对于不同的样本,参考方法与体外诊断试剂检测结果之间存在一定的偏差,10个样本最大的偏差是5.7%,最小偏差为o.5%。这一现象的原因可能是,使用参考方法配制的试剂中没有含有表面活性剂或者降低干扰性的物质,而生化诊断试剂中往往会添加这些物质。这一原因有待于试验进一步分析。3.3以上计算方法参考陈宝荣在第八届临床生化检验参考系统年会作的《医学实验室如何评定测量不确定度自上而下方法》。本文认为既然存在不确定度,那么意味着参考物质的实际值可能是这一区间内的任何值,也可能大于赋值,也可能小于赋值。结合本文,如果当参考物质赋值小于实际值时,那么本文计算的不确定度会偏大;反之,则计算的不确定度会偏小。后一种情况对于用户是不利的,因为掩盖了误差。所以我们认为在计算不确定度时,应该考虑最差的情况,而给出最大可能的不确定度。本文建议将计算不确定度方法的公式修改为:公式5:u2‰=s2Rw/n+b2公式6:b=lX—X㈣…u(XⅡ曲I公式7:Ucaw-击根据本文提供的公式5—7重新计算不确定度:首先在标准误差计算时,使用方差与相除,而不是与相除,在本文条件下,误差大约减少5%,对整个不确定度的影响是O.14%。其次,计算出的b=lX—xo一+lu(Xc。dl=1.415+1.2=2.615;uh=、/s2R。,n+b2=X/1.8816+2.6152=2.95。与原计算结果相比较,测量不确定度提高了57%。4结论本文发现参考物质的不确定度对测量结果不确定度的影响最大,所以临床上应该最大限度的选择误差不确定度小的定标品。临床单位应该建立适合的参考体系,作为商品定标品的验收标准,这样便可以有效保证临床结果的可靠性,降低医疗事故的风险。参考文献:11]Whittleld,j.B.,GammaGlutamylTranfferase.CriticalReviewsinClinicalLaboratorySciences,2001,38(4):263-355【2】庄兴1谷氨硫转肤酶的病理生理基础和新的壮床应用田.现代检验医学杂志,2010.25(2):【3】陈宝荣,孙慧额,郡燕.IFCC参考方法时两种剜量系统GGT结果正确性的验证Ⅱ】.标记免疫分析与临床.2011.18(5):336—341.【4】虞啸炷.欧元祝,屠蒲.1一各氧酰基转移酶参考方法的建立与性能评估田检验医学,2010,25(9)【5】李淑葵,何振坤,徐国宾,等.血清1谷氨酰转移醇洲定参考方法的建立及在酶校准品定值中的临床应用【『l中华检测医学杂志.2007,30(6)编辑,申磊

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