第２８卷２０ｌ４．Ｏ３ 第１期 沈阳化工大学学报 Ｖｏ１．２８ Ｎｏ．１ Ｍａｒ．２０１４ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＨＥＮＹＡＮＧ Ｉ Ｉ、，ＥＲＳⅡＹ ＯＦ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＴＥＣＨＮＯＬｏＧＹ 文章编号：２０９５—２１９８（２０１４）０１—０００１—０４ 一种双核钴配合物的结构及其生物活性研究 李健君 ， 李梅瑜 ， 高恩军 ， 沈光海 （１．延边大学药学院，吉林延吉１３３０００；２．沈阳化工大学应用化学学院，辽宁沈阳１１０１４２； ３．沈阳市无机分子基材料化学（国际）重点实验室，辽宁沈阳１１０１４２） 摘要： 水热法制备配合物［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］（Ｈｔｄａ＝１－氢一１，２，３－三氮唑４，５－二羧 酸），运用ｘ－射线单晶衍射技术研究配合物［Ｃｏ：（Ｈｔｄａ）２（Ｈ ０）６・５Ｈ２Ｏ］的晶体结构．使用荧光光 谱法研究该配合物与小牛胸腺ＤＮＡ（ＣＴ—ＤＮＡ）的结合方式，凝胶电泳及其光密度扫描结果证明了 该配合物对ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ（ＨＣ－ＤＮＡ）的切割活性． 关键词：钴（Ｉ１）；Ｘ．射线单晶衍射；荧光猝灭；凝胶电泳；光密度 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５—２１９８．２０１４．０１．００１ 中图分类号：Ｒ９１４．３ 文献标识码：Ａ 钴是一种重要的生命元素，具有很多重要的 生理活性．近年来，钴配合物的生物活性引起广 具有潜在药用价值． 大生物化学家、配位化学家、药物化学家的关注， 并在这一领域进行了很多研究工作 －４］．ＤＮＡ 快速且没有节制地复制是造成细胞癌变的起因， 作为抑制肿瘤药物的各种分子，无论它在体内的 代谢路径和作用机理是怎样的，最终都是以 ＤＮＡ分子作为重要靶向，所以研究药物分子与 ＤＮＡ之间的相互作用、探讨其作用机理是研究 开发各种新型抗癌药物的重中之重 一 ］．而金属 配位化合物，尤其是过渡金属配位化合物多以 ＤＮＡ为靶向，因此研究过渡金属配位化合物与 １ 实验部分 １．１试剂和仪器 六水合硝酸钴：分析纯，国药试剂；ｌ一氢一 １，２，３一三氮唑４，５一二羧酸（Ｈｔｄａ）：分析纯，济南 恒化；ＣＴ—ＤＮＡ：国药试剂；ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ、上样缓 冲液、ＴＡＥ缓冲溶液和Ｍａｒｋｅｒ：生化试剂，大连 ＴＡＫＡＲＡ． 电子分析天平：Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＢＳ２２４Ｓ；精密数显 酸度计：上海雷磁ＰＨＳ－２５；ｐＨ复合电极：Ｅ－２０１一 ＤＮＡ的作用机理是目前人们关注的热点．本文 采用水热法以１．氢一１，２，３一三氮唑４，５一二羧酸 （Ｈｔｄａ）为配体，合成［Ｃｏ：（ｎｔｄａ） （Ｈ２ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］ 双核钴配合物，并使用ｘ一射线单晶衍射法结合 绘图软件对其结构进行研究．使用荧光光谱法， 初步研究钴配合物与ＤＮＡ的作用机理．运用琼 Ｃ；磁力搅拌器：金坛大地ＣＪＪ－６；电热鼓风干燥 箱：北京科伟１０１－２；Ｘ・射线单晶衍射仪：Ｂｒｕｋｅｒ Ｓｍａｒｔ ＣＣＤ；晶体结构分析：ＳＨＥＬＸ－９７软件包； 荧光分光光度计：Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＬＳ５５；电泳仪：上 海培青ＪＳ－２５０；自动凝胶图像分析仪：ＪＳ一３８０Ａ． １．２配合物的合成 脂糖凝胶电泳研究配合物对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ切割 作用，证实配合物［ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ） ・５Ｈ２Ｏ］ 收稿日期：２０１３—０３—２２ 使用电子分析天平称取０．０２９ ｇ（０．１ 基金项目：国家自然科学基金项目（２０９７１０９０，２１１７１１１８）；辽宁省特聘教授资助计划和沈阳市重点实验室资助项目（Ｆ１０－２１５—１—００） 作者简介： 李健君（１９８３一），女，吉林榆树人，硕士研究生在读，主要从事药物化学方面的研究． 通讯联系人：高恩军（１９６２一），男，辽宁沈阳人，教授，博士，主要从事无机药物化学方面的研究． ２ 沈阳化工大学学报 ｍｍｏＬ）六水合硝酸钴、０．０１６ ｇ（０．１ ｍｍｏＬ） １一氢－１，２，３－三氮唑＿４，５一二羧酸（Ｈｔｄａ）混合放于 反应釜中，加１０ ｍＬ水溶解，搅拌下，用０．１ ｍｏＶＬ的ＫＯＨ溶液调ｐＨ值至６．６．置于１２０℃ 烘箱中恒温反应３ ｄ后，每１ ｈ降温１Ｏ℃反应至 室温．取出，发现粉红色透明晶体，产率为５５％． 使用ｘ一射线单晶衍射仪测定所得配合物的晶体 结构为［ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］．运用晶体 结构分析软件确定为目标产物． ２配合物的晶体结构 配合物［ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］的简要 分子结构如图１所示（省略氢原子和结晶水分 子）．中心原子Ｃｏ和配体的配位形式是六配位、 扭曲八面体构型．中心原子Ｃｏ１分别与０５、 Ｏ１２、Ｏ１３、Ｏ１４、Ｎ２和Ｎ４以配位键连接．其中 Ｃｏｌ与０５、Ｎ４的连接形式为螯合．中心原子 Ｃｏ２分别与０４、０９、Ｏ１０、Ｏ１１、Ｎ３和Ｎ５以配位 键连接，其中Ｃｏ２与０４、Ｎ３的连接形式为螯合． 配合物［Ｃｏ （Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］的三维结构 如图２所示（图中虚线表示氢键）．由图２可以 看出，配合物的三维结构由配体、配位水、结晶水 之间的氢键构成． ０ Ｃ ＼／ ｌＯ Ｎ６ ｂ ０４ ＇＇、ｌＣ０２ Ｎ５ Ｃ８ １ ７ Ｏ７ ∞ｃ ０ ，… Ｉｌ 。 ∞ Ｏ５ ●Ｃｏ Ｃ ● ’ ●Ｈ ●Ｎ Ｏ２ 图１配合物［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ Ｏ］ 的分子结构简图 Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２ （Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］ 图２配合物［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２０）６・５Ｈ２Ｏ］ 三维结构示意图 Ｆｉｇ．２ ３Ｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｘ ３配合物与ＤＮＡ的作用 ３．１荧光光谱分析 应用荧光光谱法研究配合物与小牛胸腺 ＤＮＡ（ＣＴ—ＤＮＡ）的作用形式．溴化乙锭（ＥＢ）是 一种分子荧光探针，被广泛应用于配合物与 ＤＮＡ作用的研究领域 Ｊ．ＥＢ作为一种共轭的芳 香平面分子，本身的荧光强度很低，但当ＥＢ插 入ＤＮＡ双螺旋结构的碱基对之间，并形成ＥＢ 和ＤＮＡ的复合物（ＥＢ—ＤＮＡ复合物）以后，ＥＢ． ＤＮＡ复合物的荧光强度较ＥＢ本身的荧光强度 会增强几十倍甚至几百倍．配合物加入到体系中 后，会与ＥＢ竞争插入ＤＮＡ，ＥＢ就会被配合物 从ＤＮＡ碱基对之间挤出来，此时体系的荧光强 度就会比配合物加人之前弱．根据已报道过的荧 光筛选法标准：如果配合物使ＥＢ—ＤＮＡ体系荧 光强度减弱程度超过５０％，且配合物与ＤＮＡ 的摩尔比不超过１００，即可认为配合物对ＤＮＡ 发生了显著作用 ．由斯特恩・沃尔默（Ｓｔｅｒｎ Ｖｏｌｍｅｒ）方程 ：Ｉｏ／Ｉ＝１＋ ・ｒ（Ｉｏ／Ｉ：存在和 不存在配合物时复合物荧光强度之比；，．：配合物 与所加人的ＤＮＡ的浓度比；Ｋｓ。：配合物的荧光 猝灭常数），可说明配合物对ＤＮＡ插人作用的 强弱． 。值越大，配合物对ＤＮＡ插入作用则越 强．配合物对ＣＴ—ＤＮＡ作用的荧光光谱法谱图 见图３，配合物对ＣＴ—ＤＮＡ插入作用荧光猝灭常 数见图４．从图３可以看出：随着配合物浓度的 增加，ＥＢ—ＤＮＡ复合物体系的荧光强度会相应减 弱．配合物对ＣＴ—ＤＮＡ作用的荧光光谱法结果 第１期 李健君，等：一种双核钴配合物的结构及其生物活性研究 ３ 中可以看到猝灭现象，从图４中可以看出配合物 的猝灭常数Ｋ＝０．０４３ ６，对ｃＴ—ＤＮＡ具有一定 的插入能力． １ ｃ：０ ２ ｃ：２．５×１Ｏ一 ｍｏｌ／Ｌ ３ Ｃ＝５．０×１０一 ｍｏｌ／Ｌ ４ Ｃ：７．５×１０一 ｍｏｌ／Ｌ ５ Ｃ＝１．０×１０一 ｍｏｌ／Ｌ ｃ（ＤＮＡ）： １×１０一 ｍｏｌ／Ｌ ｃ（ＥＢ）＝２×１０一 ｍｏｌ／Ｌ 图３不同浓度的配合物与ＤＮＡ作用的荧光光谱 Ｆｉｇ．３ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘｃ 图４配合物对ＥＢ—ＤＮＡ复合物体系的荧光猝灭常数 Ｆｉｇ．４ Ｔｈｅ ｑｕｅｃｈｉｎｇ ｃｏｎｓｔａｎｔ ｏｆ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＥＢ・ＤＮＡ ｓｙｓｔｅｍ ３．２凝胶电泳分析 电泳，即在外电场作用下，带电小颗粒会向 与其电荷相反电极移动的现象．在一定ｐＨ值条 件下，ＤＮＡ也会带有负电荷，电泳测定时会向电 泳槽的正极移动．电泳现象是分离、鉴定和纯化 ＤＮＡ片段的主要方法¨ ． 在ＤＮＡ电泳实验中，主要作用力有２种： 即对ＤＮＡ产生引力的电场力和ＤＮＡ与电泳基 质（本文使用琼脂糖凝胶）间的摩擦力．而ＤＮＡ 通过电泳基质速率的主要影响因素有：ＤＮＡ分 子大小及其构型，电泳基质浓度，电泳槽两端的 电压等．本文以琼脂糖凝胶电泳实验，并对实验 结果进行光密度扫描来定性的研究配合物对 ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的切割作用． 琼脂糖凝胶电泳实验方法如下：购买的 ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ保存在零下２Ｏ。Ｃ环境中．将 ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ和一定浓度的配合物混合后，在室 温有氧条件下避光静置２ ｈ，加人上样缓冲液．使 用微量进样器，把经过上述步骤处理后的样品和 空白对照，缓慢注入到事前准备好的琼脂糖凝胶 （琼脂糖含量８ Ｌ）的孔洞中，加入ＴＡＥ缓冲 溶液，放入ＪＳ一２５０电泳仪中，使用１２０ Ｖ的直流 电，电泳时间１ ｈ，取出，放人ＪＳ一３８０Ａ自动凝胶 图像分析仪中，拍照保存．结果见图５和图６． Ｏ １ ２ ＦｏｒｍⅡ Ｆｏｒｍ Ｉ 图５配合物对质粒ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ切割的 电泳实验结果 Ｆｉｇ．５ Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘ ｔｏ ｐｌａｓｍｉｄ ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ 三一 ～一一一 图６配合物对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的切割 电泳光密度扫描图 Ｆｉｇ．６ ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ－ｃｌｅａｖａｇｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘ ｂｙ ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｙｔ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ 图５是配合物对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ切割的实验 结果．Ｌａｎｅ ０是纯的ＤＮＡ，Ｌａｎｅ １～３为配合物 与ＤＮＡ在空气中反应２ ｈ之后的样品（Ｌａｎｅ １～３中配合物浓度分别为１３．２、６．６、３．３ ｉｘｍｏＬ／ Ｌ）．从图５可以看出，随着配合物浓度的增大， 配合物使ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的共价闭环带（Ｆｏｒｍ Ｉ）逐渐减少，明显的开环双链环状带（Ｆｏｒｍ Ⅱ）出现．通过对配合物进行琼脂糖凝胶电泳实 验可知：配合物对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ细胞具有一定 ４ 沈阳化工大学学报 ２０１４焦 的切割能力，并且随着配合物浓度的增加，切割 活性也相应增强．图６是由图５经过光密度扫描 所得，由图６可以更明显地看出配合物浓度不 同，对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的切割程度不同，配合物浓 度逐渐增加时，条带的峰值依次降低，表明配合 物浓度越大时ＤＮＡ碱基对所剩越少，因此配合 物浓度越大对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的切割越好． ４结束语 采用水热合成法制备了１个钴（ＩＩ）配合 物，分子式为［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ ６・５Ｈ２Ｏ］．用 ｘ一射线单晶衍射技术测定上述配合物的晶体结 构，并对其分子间弱作用力进行了讨论．配合物 对ＣＴ—ＤＮＡ作用的荧光光谱法结果表明：不同 浓度的配合物加入到ＥＢ—ＤＮＡ复合物之中后均 可见荧光猝灭现象，说明配合物在各个浓度下均 能以插入的方式与ＤＮＡ结合．配合物的凝胶电 泳实验结果及其光密度扫描结果表明：配合物在 各个浓度下对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ均有一定的切割能 力，且配合物浓度越大对ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ的切割 越好．以上荧光光谱实验和凝胶电泳实验结果表 明配合物［ｃｏ （Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ Ｏ］在分子水 平对ＤＮＡ具有一定的生物活性，具有潜在的药 用价值，其细胞水平的生物活性尚有待研究． 参考文献： ［１］Ｚｈｅｎｇ Ｆ Ｋ，Ｗｕ Ａ Ｑ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｐｐｅｒ（ＩＩ）， Ｎｉｃｌｅｌ（ＩＩ）ａｎｄ Ｃｏｂａｌｔ（ＩＩ）Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｏｆ ４－ｃｙａｎｏ－ ｂｅｎｚｏｎｉｃ Ａｃｉｄ：Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ，Ｃｒｙｓｔａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ．Ｍｏ１．Ｓｔｒｕｃｔ．，２００５，７４０ （１／３）：１４７—１５７． ［２］Ｌｉ Ｑ Ｙ，Ｔａｎｇ Ｘ Ｙ，Ｚｈａｎｇ Ｗ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ Ｓｅｔ ｏｆ Ｎｏｖｅｌ Ｈｙｄｒｏｇｅｎ—ｂｏｎｄｅｄ Ｓｕｐｒａｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｆｒｏｍ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｂａｌｔ（Ｉ１）Ｓａｌｔ ｗｉｈｔ Ｂｉｓ（３，５－ ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｏｌｙ１）ｍｅｔｈａｎｅ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｃａｒｂｏｘｙｌ— ｉｃ Ａｃｉｄｓ［Ｊ］．Ｊ．Ｍｏ１．Ｓｔｍｃｔ．，２００８，８７９（１／３）： ｌｌ９—１２９． ［３］Ｇｅｒｒａｒｄ Ｌｅｅ Ａ，Ｗｏｏｄ Ｐａｕｌ Ｔ．Ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｕｓｉｎｇ Ｈａｒｄ ａｎｄ Ｓｏｆｔ Ａｃｉｄｓ ａｎｄ Ｂａｓｅｓ： Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｘ・ｒａｙ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｅｔａｌ Ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ－ｂａｓｅｄ Ｐｈａｓｅｓ Ｍ３Ｍ ２（ＯＨ）２［ＮＣ５Ｈ３ （ＣＯ２）２－２，４ ４（Ｈ２Ｏ）４（Ｍ＝Ｃｏ，Ｎｉ，Ｚｎ；Ｍ ＝ Ｐｄ，Ｐｔ）［Ｊ］．Ｊ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ，２０００ （２１）：２１０７—２１０８． ［４］ 宋玉民，康敬万，高锦章，等，钴（Ⅲ）配合物与 ＤＮＡ作用研究［Ｊ］．无机化学学报，２０００，１６（１）： ５４—５７． ［５］ 唐宏武，沈吴宇．吖啶橙－细胞ＤＮＡ荧光抑制法初 步筛选抗癌药物的研究［Ｊ］．武汉大学学报：自然 科学版，１９９７，４３（６）：７１１—７１６． ［６］Ｇａｏ Ｅｎｊｕｎ，Ｚｈｕ Ｍｉｎｇｃｈａｎｇ，Ｙｉｎ Ｈｏｎｇｘｉ，ｅｔ １ａ．Ｓｙｎｔｈｅ－ ｓｉｓ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｍ ＤＮＡ ａｎｄ Ｃｙｔｏ－ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ ｏｆ Ｄｉｎｕｃｌｅａｒ Ｐｄ（１Ｉ）ａｎｄ Ｐｔ（ＩＩ）Ｃｏｒｎ－ ｐｌｅｘｅｓ Ｄｉｂｒｉｄｇｅｄ ｂｙ ２，２＇－Ａｚａｎｅｄｉｙｌｄｉｂｅｎｚｏｉｃ Ａｃｉｄ ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＩｎｏｒｇａｎｉｃ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２Ｏ０８，１０２（１０）： １９５８一ｌ９６４． ［７］ 王蕾，吴琼，朱明昌，等．配合物［ （ＰＤＢ），・４ Ｏ］ 的合成、表征及其与ＤＮＡ作用研究［Ｊ］．沈阳化工学 院学报，２Ｏ０９，２３（３）：１９８－２０２． ［８］ 郭茂林，杨频，杨斌盛，等．以溴化乙锭为荧光探针 研究二氯二茂铁与ＤＮＡ作用方式［Ｊ］．科学通报， １９９５，４０（１３）：１１８７—１１９０． ［９］李志良，毕琼斯，李俊忠，等．荧光法用于新型抗癌 配合物［Ｐｄ（ｔｄｅ）（ＮＯ ）：］初步筛选及作用机制研 究［Ｊ］．化学通报，１９９７，６０（６）：５２—５５． ［１Ｏ］林辉祥，毕琼斯，彭华，等．钯铂抗癌配合物初步筛 选的荧光法研究［Ｊ］．高等学校化学学报，１９９２，１３ （４）：４４３—４４６． ［１１］Ｊｏｓ６ Ｒ，Ｊｕｌｉａ Ｌ，Ｌａｕｒａ Ｓ Ｃ，ｅｔ １ａ．Ｐａｌｌａｄｉｕｍ（ＩＩ）ａｎｄ Ｐｌａｔｉｎｕｍ（ＩＩ）Ｏｒｇａｎｏｍｅｔｌａｌｉｃ Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｍｏｄｅｌ Ｎｕｃｌｅｏｂａｓｅ Ａｎｉｏｎｓ ｏｆ Ｔｈｙｍｉｎｅ，Ｕｒａｃｉｌ，ａｎｄ Ｃｙｔｏｓｉｎｅ：Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ＤＮＡ ｏｆｔｈｅＰｌａｉｔｎｕｍＣｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＩｎ・ ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，４５（１６）：６３４７—６３６０． ［１２］ＧａｏＥ Ｊ，ＧａｏＸＮ，ＯｌａｎＦ，ｅｔ ａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄＣｒｙｓｔａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｔｗｏ Ｎｅｗ Ｄｉｎｕｃｌｅａｒ Ｃｏｂａｌｔ（ＩＩ）Ｃｏｍｐｌｅ— ｘｅｓ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｈｔ ＨｅＬａ Ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，２０１１，４６（１）：１６０—１６７． （下转第６４页） 沈阳化工大学学报 ２０１４焦 应用［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００７：６４—７１． ［９］ 齐新，翟红，杨丹，等．硼酚醛树脂在涂料中的应用 ［Ｊ］．现代涂料与涂装，２００４（３）：６—８． 社，２００５：９． ［１１］金日光，华幼倾．高分子物理［Ｍ］．北京：化学工业 出版社，２０１０：７５． ［１０］胡玉民，吴良义．固化剂［Ｍ］．北京：化学工业出版 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｗｅａｒ Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｈｅａｖｙ－－ｄｕｔｙ Ｂｏｒｏｎ Ｐｈｅｎｏｌｉｃ－－ｅｐｏｘｙ Ｒｅｓｉｎ Ｃｏａｔｉｎｇ ＬＩＵ Ｘｕｅ—ｂｉｎ，ＢＩ Ｗｅｎ－ｊｕｎ，ＪＩＡＮＧ Ｈｏｎｇ—ｍｉｎ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉａ—ｌｉａｎｇ，ＷＡＮＧ Ｚｈｏｎｇ （Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １ １０１４２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴＩｌｅ ｐｕｒｐｏｓｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｐｒｏｊｅｃｔ ｉｓ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ａ ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｕｓｉｎｇ ｅｐｏｘｙ ｒｅｓｉｎ ａｎｄ ｂｏ— ｒｏｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｒｅｓｉｎ ａｓ ｔｈｅ ｂａｓｅ ｍａｔｅｒｉａ１．Ｗｅ ｕｓｅｄ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｂｏｒｏｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｒｅｓｉｎ ａｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，ｇｏｏｄ ｍｅｅｋ ａｎｄ ｈｅａｖｙ—ｄｕｔｙ ｔｏ ｍａｋｅ ｕｐ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｈｏｒｔｃｏｍｉｎｇ ｏｆ ｅｐｏｘｙ ｒｅｓｉｎ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｉｔ ｗａｓ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ａ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ａｎｄ ｗｅａｒ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｈｅａｖｙ—ｄｕｔｙ ｃｏａｔｉｎｇ，ｂｕｔ ａｌｓｏ ｃｏｕｌｄ ｅｘｉｓｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｏｉｌ ｆｏｒ ａ ｌｏｎｇ ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｗａｓ ｂｕｉｌｔ ｕｐ ｂｙ １ ５ ｇ ｏｆ ｅｐｏｘｙ ｒｅｓｉｎ，６ ｇ ｏｆ ｂｏｒｏｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｒｅｓｉｎ，７ ｇ ｏｆ ｎｉｔｒｉｌｅ ｒｕｂｂｅｒ，１ ｇ ｏｆ ｔｉｔａｎｉｕｍ ｎａｎｏ—ｓｌｕｒｒｙ，６ ｇ ｏｆ ｔｉｔａｎｉｕｍ ｄｉｏｘｉｄｅ，７ ｇ ｏｆ ｂａｒｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ，１ ｇ ｏｆ ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ，０．５ ｏｆ ｓｉｌｉｃａ，６ ｇ ｏｆ ｔａｌｃ，４ ｇ ｏｆ ｓｉｌｉｃｏｎ ｃａｒｂｉｄｅ，３ ｇ ｏｆ ｇｒａｐｈｉｔｅ，ａｎｄ ｄｉｃｙａｎｄｉａｍｉｄｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｃｕｒｉｎｇ ａｇｅｎｔ，ｔｈｅ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｃｏａｔｉｎｇ ｗａｓ ｂｅｓｔ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｏ— ｓｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃｏａｔｉｎｇ ｗａｓ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｗｅａｒ ｒｅｓｉｓｔｎｔ；ａｒｅｓｉｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ｈｅａｖｙ—ｄｕｔｙ； ｅｐｏｘｙ ｒｅｓｉｎ； ｂｏｒｏｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃ （上接第４页） Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａ Ｂｉｎｕｃｌｅａｒ Ｃｏ（１１） Ｃｏｍｐｌｅｘ［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２ Ｏ）６・５ Ｈ２ Ｏ］ ＬＩ Ｊｉａｎ－ｊｕｎ ＇ ，ＬＩ Ｍｅｉ．ｙｕ ，ＧＡＯ Ｅｎ－ｊｕｎ。 ，ＳＨＥＮ Ｇｕａｎｇ—ｈａｉ （１．Ｙａｎｂｉｎ Ｕｎｉａｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｊｉ １３３０００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １ １０１４２，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ—Ｂａｓｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０１４２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｘ［Ｃｏ２（Ｈｔｄａ）２（Ｈ２Ｏ）６・５Ｈ２Ｏ］（Ｈｔｄａ＝１Ｈ一１，２，３－ｔｒｉａｚｏｌｅ－４，５－ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）ｗａｓ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｂｙ ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ Ｘ—ｒａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｈｅ ｔｔｉ— ｔｌｅ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｈ ｃａｌｔｆ ｔｈｙｍｕｓ ＤＮＡ（ＣＴ—ＤＮＡ）ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒａ．Ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ａｓｓａｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｃｌｅａｖｅ ｔｈｅ ｐＢＲ３２２ ＤＮＡ ｏｆ ｈｅ ｃｏｍｐｌｅｘ．ｔ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｏ（ＩＩ）；Ｘ－ｒａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ； ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ； ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ； ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ