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儿童呼吸道感染支原体、衣原体和常见呼吸道病毒病原学分析

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HailIaII Med J,Dec.2013,Vo1.24,No.24 海南医学2013年12月第24卷第24期 doi:10.39694.issn.1003—6350.2013.24.1518 儿童呼吸道感染支原体、衣原体和常见呼吸道病毒病原学分析 关健强,陈春明 (东莞安医院儿科,广东 东莞523843) 【摘要】 目的分析本院儿童呼吸道感染支原体、衣原体和常见呼吸道病毒的感染特点,为临床诊治提供 参考。方法选取我院儿科收治的486例呼吸道感染患儿为观察对象,检测肺炎支原体、肺炎衣原体、呼吸道合 胞病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒l、2和3型的感染情况,分析不同年龄段患儿以上病 原菌的感染特点。结果486例呼吸道感染患儿中肺炎支原体感染125例,阳性率为25.72%;肺炎衣原体感染 114例,阳性率为23.46%;呼吸道合胞病毒感染120例,阳性率为24.69%;腺病毒感染10例,阳性率为2.o6%;甲型 流感病毒感染7例,阳性率为1.44%;乙型流感病毒感染2例,阳性率为0.41%;1型副流感病毒感染3例,I;日性率为 O.62%;2型副流感病毒感染l例,阳性率为0.21%;3型副流感病毒感染33例,阳性率为6.79%。肺炎支原体感染 阳性率随患儿年龄增加逐渐升高,比较差异有统计学意义(P<O.05)肺炎衣原体和呼吸道合胞病毒感染阳性率随 患儿年龄增加逐渐降低,比较差异有统计学意义(P<O.05);不同年龄组别患儿腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病 毒、1型副流感病毒和2型副流感病毒感染阳性率无明显差别,比较差异无统计学意义(均P>0.05)。不同年龄组 别患儿3型副流感病毒感染阳性率不同,比较差异有统计学意义(P.,0.05)。结论本院儿科呼吸道感染非细菌性 病原菌主要为肺炎支原体、衣原体以及呼吸道合胞病毒。肺炎支原体感染主要见于学龄儿童,肺炎衣原体和呼 吸道合胞病毒感染主要见于婴幼儿。 【关键词】儿童;呼吸道感染;肺炎支原体;肺炎衣原体;病毒 【中图分类号】R56 【文献标识码】A 【文章编号】 1003---6350(2013)24—3659—O3 Characteristicsofmycoplasma,chlamydiaand common respiratorytractvirusin respiratorytractinfection.GUAN Jian-qiang,CHENChun-ming.DepartmentofPediatrics,Chang"anHospitalofDongguan523843, ̄uangdong,CHINA 【Abstract】 Objective To analyze the infective charsacteristics of hte mycoplasma,chlamydia nad common respiratory tract virus,and to provide reference for clinical diagnosis and treatment.Methods A total of 486 pediat- rie patients wi也the respiratory tract infection were selected as observation group.then hte infection of hte mycoplas- ma pneumonia(MP),chlamydia pneumonia(Cpn),respiratory syncytial vims(RSV),adenovirus(ADV),influenza vi— rus typeA and type B OVA nad VIB),parainfluenza virus type l,2,3(PIV。_l,PIV。-2,PⅣ。_3)were detected,and hte characteristics of the children with different ages was analyzed.Results In the 486 chilrden with respiratory tract in- fections,the MP infection were was found in 125 cases,with the posiitve rate of25.72%;the Cpn nifection was found in 114 cases,、Ⅳim the positive rate of 23.46%;the RSV infection was found in 120 cases,、jIrim the posiitve rate of 24.69%;the ADV infection was found in 10 cases,with the posiitve rate of2.06%;the IVA infection was found in 7 cases,withpositive rate of1.44%;theIVBinfectionwasfoundin2 caSes.withthepositive rate of0.41%:thePIV-lin. fection was found in 3 eases,、)l,ith the positive rate ofO.62%;the PI 2 infection was found in 1 case, tll the posi- tive rate ofO.21%;the PIV。_3 infection was found in 33 cases,and the positive rate of6.79%.The positive rate ofthe MP in the 7-14 years old group were higher than that of 3 ̄7 years old group.1 ̄3 years old group and<1 year old group;111e positive rate ofthe Cpn and RSV nithe<1 year old group and 1-3 years old group were higherthan that of 3 ̄7 years oldgroup and 7-14 years oldgroup(allP<0.05).Theposiitve rate OftheADV,IVA,IVB,PIV-1 andPⅣ。-2 among the diferent age group had no differ ̄ces.The posiitve rate ofthe PIV 3 ofthe 3-7 years old group were higher htan htat of7-14 year old rgoup。1-3 years old rgoup and<1 year old rgoup(all P<0.05).Condusion The main non bacterial pathogens for pelage respiratory tract infection are pneumonia mycoplasma,chlamydia,and respiratory syn— cytial virus.Mycoplasma pneumoniae infection is main in school—age chilrden,and hte pneumonia ch1an】ydia and respirato— ry syncy ̄alvirusinfectionpredominatesinfectionismainininfantsandyoung children. 【Key words] Chilrden;Respiratory rtact infection;Mycoplasma pnemuoniae;Chlamydia pneumonia;Virus 呼吸道感染是儿科常见病,包括鼻咽炎、扁桃体 物侵入密切相关的免疫系统尚未发育成熟,抵抗力相 炎、支气管炎、毛细支气管炎及肺炎等呼吸道多个部 对较差有密切关系。有文献报道,小儿呼吸道感染的 位的感染。dxJL呼吸道感染的发生与抗御病原微生 主要致病菌90%为非细菌性[1】,但目前非细菌性病原 通讯作者:关健强。E-mail:guangjianqiangd@163.co/// ・3659・ 海南医学2013年l2月第24卷第24期 Hainan Med J’Dee2013,Vo1.24,No.24 .微生物不易分离,给临床确认小儿呼吸道感染带来困 试剂盒,购自北京迅必达基因技术有限责任公司。 难,也影响其诊治效果。为此,笔者对本院2012年1 PCR仪为iCycleriQ实时荧光定量PCR仪,购自美国 月至2013年1月收治的486例非细菌性呼吸道感染 BIO-RAD公司。 患儿进行病原菌学研究,检测肺炎支原体(Mycoplas. 1.2-3病毒检测采用直接免疫荧光法检测呼吸 ma pneumoniae,Me)、肺炎衣原体(Chlamydiapneu. 道合胞病毒、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、副流感病毒 moniae,CrIn1、呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial 1、2和3型等7种病毒。取5 Il1l标本在漩涡混匀器上轻 virus,RSV)、腺病毒(Adenovirus,ADV)、甲型和乙型 微混匀,离心10 min,留约100 ̄150 l上清液,形成混 流感病毒(Influenza virus type A and type B,IVA和 浊细胞悬浮液,在玻璃片上点样,每个点加l5 l细胞悬 ira)、副流感病毒1、2和3型(Parainfluenzavirustype 液,电吹风冷风『下风干10 ̄15 min至干燥,冷丙酮溶液固 l、2、3,PI l、2、3)等病原菌的感染情况和临床特点, 定10 min,取出玻片,风干。设置对照组。在每个细胞点 以期为临床诊治提供参考,现报道如下: 1资料与方法 1.1一般资料选取我院2012年1月至2013年 1月收治的486例呼吸道感染患儿为研究对象,其中 男性328例,女性158例,年龄4 d ̄14岁,平均(7.2士 1.8)岁,其中<1岁患儿96例,1~3岁患儿83例,3~7岁 128例,7~14岁179例。发病季节:春季128例,夏季 130例,秋季109例,冬季119例。参照《诸福棠实用 儿科学》中提到的标准脚:①年长儿可有流涕、鼻塞、 喷嚏、低热、咽部干痛不适等,婴幼儿呼吸道症状可不 明显,常突然发热、呕吐、腹泻,甚至高热惊厥。新生 儿可因鼻塞而拒奶或呼吸急促。②咽部充血和咽后 壁淋巴滤泡增多。③发热、咽炎、滤泡性结合膜炎同 时存在,颈或耳后淋巴结肿大称咽结合膜热。④病毒 感染时白细胞总数偏低或正常,细菌感染时则白细胞 总数和中性粒细胞增多。⑤流行性感冒有明显的流 行病学史,全身症状重而呼吸道局部症状轻,常有发 热、头痛、肌痛等。所有患儿入院前均进行抗感染治 疗,不合并自身免疫性疾病等基础疾病。 1.2检测方法 1.2.1标本采集将导管插入鼻腔中,应用抽吸 泵,旋转式移动,慢慢地退出导管,抽吸3-5 ml消毒 生理盐水冲洗导管,收集可回收的鼻腔标本,在2 ̄C~ 8 ̄C转运,立即进行检测,1份用于肺炎支原体和肺炎 衣原体检测,1份用于病毒检测。 1.2.2肺炎支原体和肺炎衣原体检测采用荧光 定量PCR法进行检测。取标本5 ml ̄I4倍体积的生理 盐水,4 ̄C过夜,吸取1~1.5 II1l离心管中,离心5 min。弃 上清取沉淀加入50山核酸提取液,离心10 S,IO0 ̄C水浴 或干浴10 arin,离心10 min,上清供PCR扩增用。设 置阴性对照、阳性对照备用。从试剂盒中取出肺炎支 原体和肺炎衣原体反应混合液,在室温下融化并振荡混 匀后,离心10 S。计算上使用量,加入反应管进行 PCR扩增。扩增条件:95℃,3 min进行1个循环; 94 ̄C,15 S进行4O个循环;60oC,30 S进行40个循环。 检测样本ct值≤38.0者判为阳性。PCR反应试剂为 迅必达TM肺炎支原体和肺炎衣原体核酸双重检测 .3 0・ 加上l滴相应的荧光抗体(约25 lx1)。37 ̄(2湿盒孵育1 5~ 30 arin,磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗,每个细胞点加上1滴 封闭液。最后覆上盖玻片。在荧光显微镜下观察结果。 显示苹果绿荧光的细胞,为阳性细胞。当放大倍数为 200倍时,在视野中找到≥2个阳性细胞,判为标本阳 性。病毒检测试剂盒为七项呼吸道病毒检测试剂盒,生 产厂家为美国DiagnosticHybrids Inc公司。荧光显微镜 为日本NIKON ECLIPSE 50i荧光显微镜。 1.3统计学方法采用统计学软件SPSS17.0进 行数据处理,计数资料以百分率表示,不同样本率间比 较采用 检验,以P<O.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1肺炎支原体、衣原体及常见呼吸道病毒 检测结果肺炎支原体、肺炎衣原体和呼吸道合 胞病毒的比例较高,分别占25.72%、23.46%和 24.69%,见表1。 表1肺炎支原体、衣原体及常见呼吸道病毒检测结果 2.2各年龄组肺炎支原体、衣原体和病毒阳性 率比较肺炎支原体感染阳性率随患儿年龄增加逐 渐升高,比较差异有统计学意义(P<O.05)。肺炎衣原 体和呼吸道合胞病毒感染阳性率随患儿年龄增加逐 渐降低,比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄 组别患儿腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、l型 副流感病毒和2型副流感病毒感染阳性率无明显差 别,比较差异无统计学意义(均P>0.05)。不同年龄组 别患儿3型副流感病毒感染阳性率不同,比较差异有 统计学意义(尸<O.05),见表2。 肺炎支原体 肺炎衣原体 例数 阳性率(%) 例数 阳性率(%) 呼吸道合胞病毒 腺病毒 甲型流感病毒 例数 阳性率 ) 例数 5 7 9 8 4 刚钾螂2撇 o o。 o o: 4 8 例数 阳性率(%) 例数 阳性率 ) 例数 阳性率(%) 乙型流感病毒 l型副流感病毒 B ∞ 2 ● . O 。 O o o。 O 堪 阳性率(%) 例数 阳性率(%) 例数 阳性率(%) 2型副流感病毒 3型副流感病毒 ¨" 3 , 4 4 .们2 8 6 0 o 8 示肺炎支原体感染主要见于学龄儿童,肺炎衣原体和 !吲。其余病毒 :bJL呼吸道感染是儿童的常见病、多发病,一年四 呼吸道合胞病毒感染主要见于婴幼JLE临床诊治应参 季均可发病。不同年龄:bJL呼吸道感染的临床特点不 感染阳性率与年龄无明显关系。因此, 同【3】:3个月以下婴儿主要表现为发热轻微或无发热, 考不同年龄段患儿不同病原菌感染特点进行。¨堪 3 2¨o o o o o o. 综上所述,本院儿科呼吸道感染非细菌性病原菌 因鼻塞及鼻塞所致的症状较突出,如哭闹不安、张口呼 3讨论 22 8 2 6 衣原体以及呼吸道合胞病毒。肺 吸、吸吮困难、拒奶等。婴幼患儿表现主要为全身毒症 主要为肺炎支原体、肺炎衣原体和呼吸 状较重,一般有鼻塞、流涕、咳嗽或咽痛等症状较重。 炎支原体感染主要见于学龄儿童, 而3岁以上患儿多不发热或低热,个别亦有高热,伴畏 道合胞病毒感染主要见于婴幼儿。参考文献 寒、头痛、全身酸困、食欲减退等症状 】。肺炎支原体、 [1】刘春艳,谢正德,Gonzalez R,等.儿童急性下呼吸道感染病毒病 衣原体或病毒等非细菌性病原菌感染占呼吸道感染的 " 原学研究[J】.中国实用儿科杂志,2009,24(4):270-273. 90%左右。不同年龄:bJL的病原菌感染特点是否不 【2】胡亚美,江载芳.诸福棠实用儿科学[M】.7版.北京:人民卫生出 同,以及不同年龄段呼吸道感染患儿的不同临床表现 版社,2003:1030—103 1. 3】吴JL病毒性急性下呼吸道感染临床 是否与病原菌感染相关,目前尚缺乏统一认识。如 如 如 加 加 加  加 加 [如 茜,倪林仙,樊茂,等.d,l l 4 O O 2 3 4 3 9 2 2 O 9 O 5 O 5 O 5 O 5 O 5 O 5 O 5 O 5 O 5 及病原流行情况分析[J].当代医学,2010,16(12):57—58. 笔者对我院486例呼吸道感染患者进行肺炎支 [4】饶敏,刘洋.d,JL肺炎支原体感染临床特点分析[J].实用心脑 原体、衣原体以及呼吸道常见病毒的感染情况进行研 究,结果发现,486例患儿中肺炎支原体、衣原体以及 呼吸道合胞病毒感染阳性率较高,分别为25.72%、 23.46%和24.69%。而其他呼吸道病毒感染阳性率较 低。提示肺炎支原体、衣原体以及呼吸道合胞病毒是 /],JL呼吸道感染的重要病原菌,感染阳性率均在20% 以上,与文献报道一致 7】。 而且,肺炎支原体感染阳性率随患儿年龄增加逐 渐升高,7~14岁组患儿肺炎支原体感染阳性率分别 高于3~7岁组、1~3岁组和<l岁组。肺炎衣原体和呼 吸道合胞病毒感染阳性率随患儿年龄增加逐渐降 低,<l岁组和1~3岁组患儿肺炎衣原体和呼吸道合胞 病毒感染阳性率分别高于3~7岁组和7~l4岁组。提 肺血管病杂志,201 1,19(3):407-408. (21):95-96. 【5】丁红芳.儿童重症MP肺炎2l例临床分析【J】.山东医药,2009,49 【6】杜文胜,陈莉,何应中,等.住院儿童肺炎支原体感染情况分析 [J】.遵义医学院学报,2012,35(1):64—65. [7】HallCB,WeinbergGA,1waneM et a1.The burden of respiratory syncytial virus infection in young childrea[J】.N Engl J Med,2009, 360(6):588—598. [8】张冰,陈志敏.2000—2006年杭州市三岁以上儿童肺炎支原体肺 炎临床特征变化趋势[J】.中华儿科杂志,2010,48(7):531.534. [9】Sung RY,Chan PK,Tsen et a1.Identiifcation ofviral and atypical bacterial pathogens in children hospitalized wim acute respiatrory infections in Hong Kong by multiplex PCR assays[J].J Mcd V' ̄rol, 2009,81(1):153一l59. (收稿日期:2013—06-26) ・3661・ 

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