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嵌合受体及其方法和用途[发明专利]

来源：筏尚旅游网

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 109641008 A(43)申请公布日 2019.04.16

(21)申请号 201780022074.7(22)申请日 2017.03.31(30)优先权数据

62/317,068 2016.04.01 US(85)PCT国际申请进入国家阶段日

2018.09.30(86)PCT国际申请的申请数据

PCT/US2017/025573 2017.03.31(87)PCT国际申请的公布数据

WO2017/173384 EN 2017.10.05(71)申请人凯德药业股份有限公司

地址美国加利福尼亚州申请人安进股份有限公司(72)发明人 J.维尔特齐乌斯　

R.阿尔瓦雷兹罗德里格兹　(54)发明名称

嵌合受体及其方法和用途(57)摘要

公开了根据本发明的抗原结合分子、嵌合受体和工程化免疫细胞。本发明还涉及载体、组合物和使用抗原结合分子和工程化免疫细胞的治疗和/或检测方法。

T.阿尔韦德森　A.巴克　L.吴　

(74)专利代理机构北京市柳沈律师事务所

11105

代理人凃滔　张文辉(51)Int.Cl.

A61K 31/7068(2006.01)A61K 35/17(2006.01)A61K 38/17(2006.01)A61K 39/00(2006.01)A61K 39/395(2006.01)A61K 45/06(2006.01)

权利要求书7页说明书78页序列表123页附图12页

CN 109641008 ACN 109641008 A

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1.嵌合抗原受体，其包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含下列至少一种：

a)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR1：SEQ ID NO:17、51、73、和95，b)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR2：SEQ ID NO 18、52、74、和96，c)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR3：SEQ ID NO 19、53、75、和97，d)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR1：SEQ ID NO:22、56、78、和100，e)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR2：SEQ ID NO.23、57、79、和101，f)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR3：SEQ ID NO.24、58、80、和102。2.根据权利要求1的嵌合抗原受体，其具有不超过8个氨基酸取代。3.根据权利要求1的嵌合抗原受体，其进一步包含至少一个共刺激域。4.根据权利要求1的嵌合抗原受体，其进一步包含至少一个活化域。5.根据权利要求3的嵌合抗原受体，其中所述共刺激域是以下各项的信号传导区(或其它合适的部分)：CD28、OX-40、4-1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18)、CD3 gamma、CD3 delta、CD3 epsilon、CD247、CD276(B7-H3)、LIGHT、(TNFSF14)、NKG2C、Ig alpha(CD79a)、DAP-10、Fc gamma受体、MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1、B7-H3、CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8alpha、CD8beta、IL-2R beta、IL-2R gamma、IL-7R alpha、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CDlld、ITGAE、CD103、ITGAL、CDl la、LFA-1、ITGAM、CDllb、ITGAX、CDllc、ITGBl、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB-A、Lyl08)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a、特异性结合CD83的配体，或其任何组合。

6.根据权利要求5的嵌合抗原受体，其中所述共刺激域包含CD28。7.根据权利要求6的嵌合抗原受体，其中所述CD28共刺激域包含选自下组的序列：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、和SEQ ID NO.8。

8.根据权利要求5的嵌合抗原受体，其中所述CD8共刺激域包含SEQ ID NO.14。9.根据权利要求4的嵌合抗原受体，其中所述活化域包含CD3。10.根据权利要求9的嵌合抗原受体，其中所述CD3包含CD3zeta。11.根据权利要求10的嵌合抗原受体，其中所述CD3zeta包含SEQ ID NO.10。12.根据权利要求1的嵌合抗原受体，其进一步包含SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.10。13.分离的多核苷酸，其编码权利要求1的嵌合抗原受体。14.载体，其包含权利要求13的多核苷酸。15.根据权利要求14的载体，其是逆转录病毒载体、DNA载体、质粒、RNA载体、腺病毒载体、腺病毒相关载体、慢病毒载体或其任何组合。

16.免疫细胞，其包含权利要求14的载体。

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17.根据权利要求16的免疫细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、NK细胞、TCR表达细胞、树突细胞或NK-T细胞。

18.根据权利要求17的免疫细胞，其中所述细胞是自体T细胞。19.根据权利要求17的免疫细胞，其中所述细胞是同种异体T细胞。20.嵌合抗原受体，其与权利要求1的抗原结合分子的序列具有至少90％同一性。21.嵌合抗原受体，其与权利要求1的抗原结合分子的序列具有至少95％同一性。22.药物组合物，其包含权利要求17、18、或19的T细胞。23.嵌合抗原受体，其包含下列至少一种：(a)包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列的VL区；

(b)包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区；

(c)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的VL区；

(d)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:99的氨基酸序列的VL区；

其中所述VH和VL区是通过至少一个接头连接的。24.根据权利要求23的嵌合抗原受体，其具有不超过8个氨基酸取代。25.根据权利要求23的嵌合抗原受体，其中所述接头包含SEQ ID NO.130和SEQ ID NO.132中的至少一个。

26.根据权利要求23的嵌合抗原受体，其进一步包含至少一个共刺激域。27.根据权利要求23的嵌合抗原受体，其进一步包含至少一个活化域。28.根据权利要求26的嵌合抗原受体，其中所述共刺激域是下列各项的信号传导区：CD28、OX-40、4-1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18)、CD3 gamma、CD3 delta、CD3 epsilon、CD247、CD276(B7-H3)、LIGHT、(TNFSF14)、NKG2C、Ig alpha(CD79a)、DAP-10、Fc gamma受体、MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1、B7-H3、CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8alpha、CD8beta、IL-2R beta、IL-2R gamma、IL-7R alpha、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CDlld、ITGAE、CD103、ITGAL、CDl la、LFA-1、ITGAM、CDllb、ITGAX、CDllc、ITGBl、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB-A、Lyl08)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a、特异性结合CD83的配体，或其任何组合。

29.免疫细胞，其包含权利要求23的嵌合抗原受体。30.根据权利要求29的免疫细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、NK细胞、TCR表达细胞、树突细胞或NK-T细胞。

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31.权利要求30的T细胞，其是自体T细胞。32.权利要求30的T细胞，其是同种异体T细胞。33.药物组合物，其包含权要求29的免疫细胞。34.分离的多核苷酸，其包含以下至少一种：SEQ ID NO.27；SEQ ID NO.31；SEQ ID NO.35；SEQ ID NO.39；SEQ ID NO.43；SEQ ID NO.47；SEQ ID NO.61；SEQ ID NO.65；SEQ ID NO.69；SEQ ID NO.83；SEQ ID NO.87；SEQ ID NO.91；SEQ ID NO.105；SEQ ID NO.109；SEQ ID NO.113；SEQ ID NO.117；SEQ ID NO.121；和SEQ ID NO.125。

35.载体，其包含根据权利要求34的多核苷酸。36.免疫细胞，其包含权利要求33的载体。37.根据权利要求36的免疫细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、NK细胞、TCR表达细胞、树突细胞或NK-T细胞。

38.权利要求37的T细胞，其是自体T细胞。39.权利要求37的T细胞，其是同种异体T细胞。40.分离的多肽，其包含以下至少一种中列出的氨基酸序列：SEQ ID NO.28；SEQ ID NO.32；SEQ ID NO.36；SEQ ID NO.40；SEQ ID NO.44；SEQ ID NO.48；SEQ ID NO.62；SEQ ID NO.66；SEQ ID NO.70；SEQ ID NO.84；SEQ ID NO.88；SEQ ID NO.92；SEQ ID NO.106；SEQ ID NO.110；SEQ ID NO.114；SEQ ID NO.118；SEQ ID NO.122；和SEQ ID NO.126。

41.根据权利要求40的分离的多肽，其具有不超过8个氨基酸取代。42.载体，其编码权利要求40的多肽。43.免疫细胞，其包含权利要求42的载体。44.根据权利要求43的免疫细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、NK细胞、TCR表达细胞、树突细胞或NK-T细胞。

45.权利要求44的T细胞，其是自体T细胞或同种异体T细胞。46.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子的嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其中所述抗原结合分子包含可变重链CDR3，所述可变重链CDR3包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:19、53、75、和97。

47.根据权利要求46的多核苷酸，其进一步包含活化域。48.根据权利要求47的多核苷酸，其中所述活化域是CD3。49.根据权利要求48的多核苷酸，其中所述CD3是CD3zeta。50.根据权利要求49的多核苷酸，其中所述CD3zeta包含SEQ ID NO.9中列出的氨基酸序列。

51.根据权利要求46的多核苷酸，其进一步包含共刺激域。52.根据权利要求51的多核苷酸，其中所述共刺激域是下列各项的信号传导区：CD28、OX-40、4-1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18)、CD3 gamma、CD3 delta、CD3 epsilon、CD247、CD276(B7-H3)、LIGHT、(TNFSF14)、NKG2C、Ig alpha(CD79a)、DAP-10、Fc gamma受体、MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号

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传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1、B7-H3、CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8alpha、CD8beta、IL-2R beta、IL-2R gamma、IL-7R alpha、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CDlld、ITGAE、CD103、ITGAL、CDl la、LFA-1、ITGAM、CDllb、ITGAX、CDllc、ITGBl、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB-A、Lyl08)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a、特异性结合CD83的配体，或其任何组合。

53.根据权利要求52的多核苷酸，其中所述CD28共刺激域编码SEQ ID NO 2中列出的氨基酸序列。

54.载体，其包含权利要求46的多核苷酸。55.免疫细胞，其包含权利要求54的载体。56.权利要求50的免疫细胞，其中所述免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、NK细胞、TCR表达细胞、树突细胞或NK-T细胞。

57.权利要求51的T细胞，其是自体T细胞或同种异体T细胞。

58.编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分离的多核苷酸，所述CAR或TCR包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含可变轻链CDR3，所述可变轻链CDR3包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:24、58、80、和102。

59.根据权利要求58的多核苷酸，其进一步包含活化域。60.根据权利要求59的多核苷酸，其中所述活化域是CD3。61.根据权利要求60的多核苷酸，其中所述CD3是CD3zeta。62.根据权利要求61的多核苷酸，其中所述CD3zeta包含SEQ ID NO.9中列出的氨基酸序列。

63.根据权利要求58的多核苷酸，其进一步包含共刺激域。64.根据权利要求63的多核苷酸，其中所述共刺激域是下列各项的信号传导区：CD28、OX-40、4-1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18)、CD3 gamma、CD3 delta、CD3 epsilon、CD247、CD276(B7-H3)、LIGHT、(TNFSF14)、NKG2C、Ig alpha(CD79a)、DAP-10、Fc gamma受体、MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1、B7-H3、CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8alpha、CD8beta、IL-2R beta、IL-2R gamma、IL-7R alpha、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CDlld、ITGAE、CD103、ITGAL、CDl la、LFA-1、ITGAM、CDllb、ITGAX、CDllc、ITGBl、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB-A、Lyl08)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a、特异性结合CD83的配体，或其任何组合。

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65.根据权利要求64的多核苷酸，其中所述CD28共刺激域包含SEQ ID NO 3或SEQ ID NO 1中列出的核苷酸序列。

66.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.17)、CDR2(SEQ ID NO.18)、和CDR3(SEQ ID NO.19)，并且所述抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.22)、CDR2(SEQ ID NO.23)、和CDR3(SEQ ID NO.24)。

67.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子的嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其中所述抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.51)、CDR2(SEQ ID NO.52)、和CDR3(SEQ ID NO.53)，并且所述抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.56)、CDR2(SEQ ID NO.57)、和CDR3(SEQ ID NO.58)。

68.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子的嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其中所述抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.73)、CDR2(SEQ ID NO.74)、和CDR3(SEQ ID NO.75)，并且所述抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.78)、CDR2(SEQ ID NO.79)、和CDR3(SEQ ID NO.80)。

69.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子的嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其中所述抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.95)、CDR2(SEQ ID NO.96)、和CDR3(SEQ ID NO.97)，并且所述抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.100)、CDR2(SEQ ID NO.101)、和CDR3(SEQ ID NO.102)。

70.分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子的嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其中所述抗原结合分子包含：

(a)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1，其包含氨基酸序列GX2X3X4X5X6X7X8X9(SEQ ID NO:134)，其中：

X2是G、F或Y；X3是S或T；X4是I、F或L；X5是S或T；

X6不存在或是S；X7不存在或是G；X8不存在或是E或G；且X9是F、L或Y；

(b)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)2其包含氨基酸序列X1X2X3X4X5X6(SEQ ID NO:135)，其中：

X1是D、H、S或Y；X2是H、P或Y；X3是D、E或S；X4是D或G；X5是G或S；且

X6不存在或是D或E；

(c)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)3,其包含氨基酸序列

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X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12DY(SEQ ID NO:136)，其中：

X1是E或L；X2是R、S或V；X3是R或Y；X4是C、G或S；

X5不存在或是G或I；X6不存在或是G；X7不存在或是D；X8不存在或是C；X9不存在或是W或Y；X10不存在或是P或S；X11不存在或是G或Y；且X12是F或R；

(d)轻链可变区(VL)CDR1，其包含氨基酸序列X1ASQX5X6X7X8X9LX11(SEQ ID NO:137)，其中

X1是Q或R；X5是D或S；X6是I或V；X7是N或S；X8是N或S；X9是F、L或Y；且X11是N或T；

(e)轻链可变区(VL)CDR2其包含氨基酸序列X1ASX4X5X6X7(SEQ ID NO:138)，其中X1是D或G；X4是N、S或T；X5是L或R；X6是A、E或K；且X7是S或T；和/或

(f)轻链可变区(VL)CDR3其包含氨基酸序列QQX3X4X5X6PX8T(SEQ ID NO:139)，其中X3是S或Y；X4是D、G或Y；X5是N、S或T；X6是L、T或Y；且X8是F或I。

71.治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，其包括对所述受试者施用权利要求46、58、66、67、68、69或70中任一项的多核苷酸。

72.治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，其包括对所述受试者施用根据40的多肽。

73.治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，其包括对所述受试者施用根据权

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利要求1、20、21和23中任一项的嵌合抗原受体。

74.治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，其包括对受试者施用权利要求16、29、36、43和55中任一项的细胞。

75.治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，其包括对受试者施用根据权利要求22和33的组合物。

76.根据权利要求71-75中任一项的方法，其中所述疾病或病症是癌症。77.根据权利要求76的方法，其中所述癌症是白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。78.根据权利要求71-75中任一项的方法，其中所述疾病或病症是以下至少一种：急性髓样白血病(acute myeloid leukemia，AML)、慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)、慢性粒单核细胞白血病(chronic myelomonocytic leukemia，CMML)、幼年型髓单核细胞白血病(juvenile myelomonocytic leukemia)、非典型慢性髓样白血病(atypical chronic myeloid leukemia)、急性前髓细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)、急性单核母细胞性白血病(acute monoblastic leukemia)、急性红细胞白血病(acute erythroid leukemia)、急性巨核母细胞性白血病(acute megakaryoblastic leukemia)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)、骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorder)、髓样新生物(myeloid neoplasm)、髓样肉瘤(myeloid sarcoma)、急性浆细胞样树状突细胞新生物(BlasticPlasmacytoid Dendritic Cell Neoplasm，BPDCN)和炎性/自身免疫性疾病。

79.根据权利要求78的方法，其中所述炎性/自身免疫性疾病是以下至少一种：类风湿性关节炎、银屑病、变态反应、哮喘、克罗恩病、IBD、IBS、纤维肌痛(fibromyalga)、肥大细胞增多症和乳糜泻。

80.根据权利要求15的慢病毒载体，其包含pGAR或其衍生物。

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对相关申请的交叉引用

[0002]本申请要求2016年4月1日提交的美国临时专利申请No.62/317,068的权益，其通过引用完整并入本文。[0003]序列表

[0004]本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且其通过引用完整并入本文。2017年3月31日创建的所述ASCII拷贝命名为K-1029_02_SL.txt，大小为265,830字节。

[0005]发明背景

[0006]C型凝集素样-1(CLL-1，也称为CLEC-1、CLEC12A、MICL、树突细胞相关凝集素-1(DCAL-1)和DCAL-2)是糖蛋白受体和参与调节细胞增殖和免疫调节的C型凝集素样受体家族的成员。CLL-1在造血细胞中表达，主要在先天免疫细胞中表达，包括单核细胞、粒细胞、树突细胞以及髓样祖细胞。Van Rhenenet al.,Blood 2007:110(7)。CLL-1涉及髓样细胞增殖和分化的调节(Bakkeret al.,Cancer Res.64:8443-8450(2004)；Marshallet al.,J.Biol.Chem.279:14792-14802(2004))，并且存在于急性性样(骨髓性)白血病(AML)细胞以及白血病干细胞上(Zhaoet al.,Haematologica 2010,95(1):71-78)。[0007]因此，CLL-1涉及多种疾病，包括但不限于急性髓样(骨髓性)白血病(acute myeloid leukemia，AML)、慢性髓样(骨髓性)白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)、慢性粒单核细胞白血病(chronic myelomonocytic leukemia，CMML)、幼年型髓单核细胞白血病(juvenile myelomonocytic leukemia)、非典型慢性髓样白血病(atypical chronic myeloid leukemia)、急性前髓细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)、急性单核母细胞性白血病(acute monoblastic leukemia)、急性红细胞白血病(acute erythroid leukemia)、急性巨核母细胞性白血病(acute megakaryoblastic leukemia)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome、MDS)、骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorder)、髓样新生物(myeloid neoplasm)、髓样肉瘤(myeloid sarcoma)、急性浆细胞样树状突细胞新生物(BlasticPlasmacytoid Dendritic Cell Neoplasm、BPDCN)或其组合。[0008]另外，CLL-1可以在炎性或自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、银屑病、变态反应、哮喘、克罗恩病、IBD、IBS、纤维肌痛(fibromyalga)、肥大细胞增多症和乳糜泻中发挥作用。

[0009]人CLL-1蛋白包含具有以下氨基酸序列的多肽：

[0010]MSEEVTYADLQFQNSSEMEKIPEIGKFGEKAPPAPSHVWRPAALFLTLLCLLLLIGLGVLASMFHVTLKIEMKKMNKLQNISEELQRNISLQLMSNMNISNKIRNLSTTLQTIATKLCRELYSKEQEHKCKPCPRRWIWHKDSCYFLSDDVQTWQESKMACAAQNASLLKINNKNALEFIKSQSRSYDYWLGLSPEEDSTRGMRVDNIINSSAWVIRNAPDLNNMYCGYINRLYVQYYHCTYKKRMICEKMANPVQLGSTYFREA(SEQ ID NO.140)。

[0011]其他序列信息包含在于http://www.uniprot.org/uniprot/Q5QGZ9的CLL-1Uniprot列表，以及NCBI参考序列NP_612210.4(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/

[0001]

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NP_612210.4)中。

[0012]当提及CLL-1时，应当理解对其的提及涵盖其片段以及相关多肽，其包括但不限于等位变体、剪接变体、衍生变体、取代变体、缺失变体、和/或插入变体，包括添加N端甲硫氨酸、融合多肽和种间同源物。在某些实施方案中，CLL-1多肽包括末端残基，例如但不限于前导序列残基、靶向残基、氨基末端甲硫氨酸残基、赖氨酸残基、标签残基和/或融合蛋白残基。

[0013]CLL-1的某些抗体描述于美国专利No.8,536,310和美国专利No.9,163,090中。[0014]已经显示了工程化免疫细胞在治疗性治疗中具有期望的质量，特别是在肿瘤学中。两种主要类型的工程化免疫细胞是含有嵌合抗原受体(称为“CAR”或“CAR-T”)和T细胞受体(“TCR”)的那些。工程化改造这些工程化细胞以赋予它们以抗原特异性，同时保留或增强它们识别和杀死靶细胞的能力。嵌合抗原受体可以包括例如(i)抗原特异性组分(“抗原结合分子”)、(ii)胞外域，(iii)一个或多个共刺激域，和(iv)一个或多个活化域。每个域可以是异质的，即，由源自(或对应于)不同蛋白质链的序列构成。表达嵌合抗原受体的免疫细胞(例如T细胞)可以用于各种疗法，包括癌症疗法。应当理解，可以使用共刺激域增强针对靶抗原的CAR表达细胞的活化，并因此增加过继免疫疗法的效力。

[0015]已经在例如美国专利申请20160051651(PCTUS2015/041337)中描述了针对CLL-1的某些CAR。

[0016]可以将T细胞工程化改造为拥有对一种或多种期望靶标的特异性。例如，可以用编码与一个或多个信号传导分子和/或一个或多个活化域例如CD3zeta一起的抗原结合分子，例如抗体的一个或多个单链可变片段(“scFv”)的DNA或其他遗传物质转导T细胞。[0017]除了CAR-T细胞识别和破坏靶定细胞的能力外，成功的T细胞治疗受益于CAR-T细胞持续以及维持响应抗原而增殖的能力的能力。

[0018]T细胞受体(TCR)是在T细胞表面发现的分子，它们负责识别作为与主要组织相容性复合物(MHC)分子结合的肽的抗原片段。TCR由两种不同的蛋白质链组成–在约95％的人TCR中，TCR由alpha(α)和beta(β)链组成。在约5％的人T细胞中，TCR由gamma和delta(γ/δ)链组成。每条链由两个胞外域构成：可变(V)区和恒定(C)区，两者都属于免疫球蛋白超家族。如在其他免疫球蛋白中，TCRα链和β链(或gamma和delta(γ/δ)链)的可变域各自具有三个高变或互补决定区(CDR)。当TCR与抗原肽和MHC(肽/MHC)结合时，T细胞被活化，使其能够攻击并破坏靶细胞。[0019]然而，目前的疗法已显示出不同水平的有效性和不希望的副作用。因此，需要鉴定用于治疗CLL-1相关疾病和病症的新型和改善的疗法。[0020]发明概述

[0021]本发明涉及对CLL-1具有特异性的工程化免疫细胞(例如CAR或TCR)、抗原结合分子(包括但不限于抗体、scFv、重链和/或轻链、以及这些抗原结合分子的CDR)。

[0022]本发明进一步涉及可用作这些细胞中的共刺激域的新型CD28胞外(铰链)序列。[0023]本发明的嵌合抗原受体通常包含：(i)CLL-1特异性抗原结合分子、(ii)胞外(其可以包含铰链)域、(iii)一个或多个共刺激域、和(iv)一个或多个活化域。应当理解，每个域可以是异质的，因此包含源自(或对应于)不同蛋白质链的序列。[0024]在一些实施方案中，本发明涉及嵌合抗原受体，其包含特异性结合CLL-1的抗原结

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合分子，其中所述抗原结合分子包含以下至少一种：a)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR1：SEQ ID NOs:17,51,73,和95，b)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR2：SEQ ID NOs 18,52,74,和96，c)包含选自下组的氨基酸序列的可变重链CDR3：SEQ ID NOs 19,53,75,和97，d)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR1：SEQ ID NOs:22,56,78,和100，e)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR2：SEQ ID NOs.23,57,79,和101，和f)包含选自下组的氨基酸序列的可变轻链CDR3：SEQ ID NOs.24,58,80,和102。嵌合抗原受体可以进一步包含至少一个共刺激域。根据权利要求1所述的嵌合抗原受体进一步包含至少一个活化域。

[0025]在某些实施方案中，本发明涉及嵌合抗原受体，其与本文列出的嵌合抗原受体是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。[0026]本发明还涵盖嵌合抗原受体，其具有对其的不超过8个氨基酸取代。[0027]在某些实施方案中，共刺激域包含下列各项的信号传导域(或其他合适的部分)：CD28、OX-40、4-1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1、CDl-la/CD18)、CD3gamma、CD3delta、CD3epsilon、CD247、CD276(B7-H3)、LIGHT、(TNFSF14)、NKG2C、Ig alpha(CD79a)、DAP-10、Fc gamma receptor、MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1、B7-H3、CDS、ICAM-1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8alpha、CD8beta、IL-2R beta、IL-2R gamma、IL-7R alpha、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA-6、CD49f、ITGAD、CDlld、ITGAE、CD103、ITGAL、CDl la、LFA-1、ITGAM、CDllb、ITGAX、CDllc、ITGBl、CD29、ITGB2、CD18、LFA-1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB-A、Lyl08)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO-3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP-76、PAG/Cbp、CD19a、特异性结合CD83的配体，或其任何组合。[0028]在一些实施方案中，共刺激域可以包含整个或部分的SEQ ID NO.141中列出的4-1BB核酸序列和如SEQ ID NO.142中列出的相应氨基酸序列。在其他实施方案中，共刺激域可以包含整个或部分的如SEQ ID NO.143中列出的OX40核酸序列。参见Oncoimmunology.2012Jul.1；1(4):458–466。在其他实施方案中，共刺激域可以包含整个或部分ICOS分子，如记载于Guedanet al.,August 14,2014；Blood:124(7)和Shenet al.,Journal of Hematology&Oncology(2013)6:33。在其他实施方案中，共刺激域可以包含整个或部分CD27，如记载于Songet al.,Oncoimmunology.2012Jul.1；1(4):547–549。[0029]优选的实施方案包括将一个或多个下列序列掺入本发明的CAR中：SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.4,SEQ ID NO.6,和SEQ ID NO.8。另外的优选实施方案包括将SEQ ID NO.14中列出的序列掺入本发明的CAR中。[0030]在进一步的实施方案中，活化域包含CD3，优选CD3zeta，更优选具有SEQ ID NO.10中列出的序列的CD3zeta。[0031]在其他实施方案中，本发明涉及包含抗原结合分子的嵌合抗原受体，所述抗原结

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合分子进一步包含SEQ ID NO.2并且进一步包含SEQ ID NO.10。

[0032]本发明进一步涉及编码嵌合抗原受体的分离的多核苷酸和包含该多核苷酸的载体。本领域已知的任何载体都适用于本发明。在一些实施方案中，载体是病毒载体。在一些实施方案中，载体是逆转录病毒载体(例如pMSVG1)、DNA载体、鼠白血病病毒载体、SFG载体、质粒、RNA载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、埃巴病毒载体、乳多空病毒载体、痘苗病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒相关载体(AAV)、慢病毒载体(如pGAR)或其任何组合。pGAR序列如下：

[0033]CTGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGCTTACAATTTGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCCAGCTGGCGAAAGGGGGATGTGCTGCAAGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGGCCAGTGAATTGTAATACGACTCACTATAGGGCGACCCGGGGATGGCGCGCCAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGCTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCTGGGAGCTCTCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTGCTTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAGACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGTGGCGCCCGAACAGGGACTTGAAAGCGAAAGGGAAACCAGAGGAGCTCTCTCGACGCAGGACTCGGCTTGCTGAAGCGCGCACGGCAAGAGGCGAGGGGCGGCGACTGGTGAGTACGCCAAAAATTTTGACTAGCGGAGGCTAGAAGGAGAGAGATGGGTGCGAGAGCGTCAGTATTAAGCGGGGGAGAATTAGATCGCGATGGGAAAAAATTCGGTTAAGGCCAGGGGGAAAGAAAAAATATAAATTAAAACATATAGTATGGGCAAGCAGGGAGCTAGAACGATTCGCAGTTAATCCTGGCCTGTTAGAAACATCAGAAGGCTGTAGACAAATACTGGGACAGCTACAACCATCCCTTCAGACAGGATCAGAAGAACTTAGATCATTATATAATACAGTAGCAACCCTCTATTGTGTGCATCAAAGGATAGAGATAAAAGACACCAAGGAAGCTTTAGACAAGATAGAGGAAGAGCAAAACAAAAGTAAGACCACCGCACAGCAAGCCGCCGCTGATCTTCAGACCTGGAGGAGGAGATATGAGGGACAATTGGAGAAGTGAATTATATAAATATAAAGTAGTAAAAATTGAACCATTAGGAGTAGCACCCACCAAGGCAAAGAGAAGAGTGGTGCAGAGAGAAAAAAGAGCAGTGGGAATAGGAGCTTTGTTCCTTGGGTTCTTGGGAGCAGCAGGAAGCACTATGGGCGCAGCGTCAATGACGCTGACGGTACAGGCCAGACAATTATTGTCTGGTATAGTGCAGCAGCAGAACAATTTGCTGAGGGCTATTGAGGCGCAACAGCATCTGTTGCAACTCACAGTCTGGGGCATCAAGCAGCTCCAGGCAAGAATCCTGGCTGTGGAAAGATACCTAAAGGATCAACAGCTCCTGGGGATTTGGGGTTGCTCTGGAAAACTCATTTGCACCACTGCTGTGCCTTGGAATGCTAGTTGGAGTAATAAATCTCTGGAACAGATTTGGAATCACACGACCTGGATGGAGTGGGACAGAGAAATTAACAATTACACAAGCT

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TAATACACTCCTTAATTGAAGAATCGCAAAACCAGCAAGAAAAGAATGAACAAGAATTATTGGAATTAGATAAATGGGCAAGTTTGTGGAATTGGTTTAACATAACAAATTGGCTGTGGTATATAAAATTATTCATAATGATAGTAGGAGGCTTGGTAGGTTTAAGAATAGTTTTTGCTGTACTTTCTATAGTGAATAGAGTTAGGCAGGGATATTCACCATTATCGTTTCAGACCCACCTCCCAACCCCGAGGGGACCCGACAGGCCCGAAGGAATAGAAGAAGAAGGTGGAGAGAGAGACAGAGACAGATCCATTCGATTAGTGAACGGATCTCGACGGTATCGGTTAACTTTTAAAAGAAAAGGGGGGATTGGGGGGTACAGTGCAGGGGAAAGAATAGTAGACATAATAGCAACAGACATACAAACTAAAGAATTACAAAAACAAATTACAAAATTCAAAATTTTATCGCGATCGCGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTTAGGAACAGAGAGACAGCAGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCCGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGCGCGCCAGTCCTTCGAAGTAGATCTTTGTCGATCCTACCATCCACTCGACACACCCGCCAGCGGCCGCTGCCAAGCTTCCGAGCTCTCGAATTAATTCACGGTACCCACCATGGCCTAGGGAGACTAGTCGAATCGATATCAACCTCTGGATTACAAAATTTGTGAAAGATTGACTGGTATTCTTAACTATGTTGCTCCTTTTACGCTATGTGGATACGCTGCTTTAATGCCTTTGTATCATGCTATTGCTTCCCGTATGGCTTTCATTTTCTCCTCCTTGTATAAATCCTGGTTGCTGTCTCTTTATGAGGAGTTGTGGCCCGTTGTCAGGCAACGTGGCGTGGTGTGCACTGTGTTTGCTGACGCAACCCCCACTGGTTGGGGCATTGCCACCACCTGTCAGCTCCTTTCCGGGACTTTCGCTTTCCCCCTCCCTATTGCCACGGCGGAACTCATCGCCGCCTGCCTTGCCCGCTGCTGGACAGGGGCTCGGCTGTTGGGCACTGACAATTCCGTGGTGTTGTCGGGGAAGCTGACGTCCTTTTCATGGCTGCTCGCCTGTGTTGCCACCTGGATTCTGCGCGGGACGTCCTTCTGCTACGTCCCTTCGGCCCTCAATCCAGCGGACCTTCCTTCCCGCGGCCTGCTGCCGGCTCTGCGGCCTCTTCCGCGTCTTCGCCTTCGCCCTCAGACGAGTCGGATCTCCCTTTGGGCCGCCTCCCCGCCTGGTTAATTAAAGTACCTTTAAGACCAATGACTTACAAGGCAGCTGTAGATCTTAGCCACTTTTTAAAAGAAAAGGGGGGACTGGAAGGGCGAATTCACTCCCAACGAAGACAAGATCTGCTTTTTGCTTGTACTGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCTGGGAGCTCTCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTGCTTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAGACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGGCATGCCAGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTTTTGGCGCGCCATCGTCGAGGTTCCCTTTAGTGAGGGTTAATTGCGAGCTTGGCGTAATCATGGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAATTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCGCTCTCCTGTTCCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGGCGCTTTCTCATAGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACACGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACAGAGTTCTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGAACA

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GTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTTGGTAGCTCTTGATCCGGCAAACAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTACGCGCAGAAAAAAAGGATCTCAAGAAGATCCTTTGATCTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGAGCGGATACATATTTGAATGTATTTAGAAAAATAAACAAATAGGGGTTCCGCGCACATTTCCCCGAAAAGTGCCAC[0034]pGAR载体图如下所示：

[0035]

合适的另外的示例性载体包括例如pBABE-puro,pBABE-neo largeTcDNA,pBABE-hygro-hTERT,pMKO.1GFP,MSCV-IRES-GFP,pMSCV PIG(Puro IRES GFP空质粒),pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE,MSCV IRES萤光素酶,pMIG,MDH1-PGK-GFP_2.0,

TtRMPVIR,pMSCV-IRES-mCherry FP,pRetroX GFP T2A Cre,pRXTN,pLncEXP,和pLXIN-Luc。[0037]示例性免疫细胞包括但不限于T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、NK细胞、表达TCR

[0036]

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的细胞、树突细胞或NK-T细胞。T细胞可以是自体的、同种异体的或异源的。在其他实施方案中，本发明涉及包含本文所述免疫细胞的药物组合物。[0038]在某些实施方案中，本发明涉及包含以下至少一种的抗原结合分子(和包含这些分子的嵌合抗原受体)：[0039](a)包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列的VL区；[0040](b)包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区；[0041](c)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的VL区；[0042](d)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:99的氨基酸序列的VL区；

[0043]且其中所述VH和VL区是通过至少一个接头连接的。本发明还涵盖嵌合抗原受体和/或抗原结合分子，其具有对其的不超过8个氨基酸取代。[0044]接头可以是例如poly-Gly接头，例如GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.130)or GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.145)。[0045]在其他实施方案中，本发明涉及抗原结合分子(和包含这些分子的嵌合抗原受体)，其中所述接头包含SEQ ID NO.130和SEQ ID NO.132中的至少一个。[0046]在某些实施方案中，本发明涉及抗原结合分子和/或嵌合抗原受体，其与本文列出的抗原结合分子和/或嵌合抗原受体是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。[0047]在其他实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其包含以下至少一种：SEQ ID NO.27；SEQ ID NO.31；SEQ ID NO.35；SEQ ID NO.39；SEQ ID NO.43；SEQ ID NO.47；SEQ ID NO.61；SEQ ID NO.65；SEQ ID NO.69；SEQ ID NO.83；SEQ ID NO.87；SEQ ID NO.91；SEQ ID NO.105；SEQ ID NO.109；SEQ ID NO.113；SEQ ID NO.117；SEQ ID NO.121；和SEQ ID NO.125。

[0048]在某些实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其与本文列出的多核苷酸是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。

[0049]本发明进一步涉及包含这些多核苷酸的载体，以及使用这些载体转导的细胞。[0050]在进一步的实施方案中，本发明涉及分离的多肽，其包含以下至少一个中所示的氨基酸序列：SEQ ID NO.28；SEQ ID NO.32；SEQ ID NO.36；SEQ ID NO.40；SEQ ID NO.44；SEQ ID NO.48；SEQ ID NO.62；SEQ ID NO.66；SEQ ID NO.70；SEQ ID NO.84；SEQ ID NO.88；SEQ ID NO.92；SEQ ID NO.106；SEQ ID NO.110；SEQ ID NO.114；SEQ ID NO.118；SEQ ID NO.122；和SEQ ID NO.126。在其他实施方案中，本发明涉及编码这些多肽的载体，包含这些多肽的免疫细胞。优选的免疫细胞包括T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、NK细胞、表达TCR的细胞、树突细胞或NK-T细胞。T细胞可以是自体的、同种异体的或异源的。本发明还涵盖嵌合抗原受体，其具有对其的不超过8个氨基酸取代。[0051]在其他实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分

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离的多核苷酸，所述嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含可变重链(VH)链CDR3，其包含选自SEQ ID NOs:19,53,75和97的氨基酸序列。本发明还涵盖嵌合抗原受体，其具有对其的不超过8个氨基酸取代。多核苷酸可以进一步包含活化域。在优选的实施方案中，活化域是CD3，更优选CD3zeta，更优选SEQ ID NO.9中列出的氨基酸序列。[0052]在其它实施方案中，本发明包含共刺激域，其包含下列各项的信号传导域(或其它合适的部分)：CD28,CD28T,OX40,4-1BB/CD137,CD2,CD3(alpha,beta,delta,epsilon,gamma,zeta),CD4,CD5,CD7,CD9,CD16,CD22,CD27,CD30,CD 33,CD37,CD40,CD 45,CD64,CD80,CD86,CD134,CD137,CD154,PD-1,ICOS,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18),CD247,CD276(B7-H3),LIGHT(肿瘤坏死因子超家族成员14；TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子,TNF,TNFr,整合蛋白,信号传导淋巴细胞活化分子,BTLA,Toll配体受体,ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL-2R beta,IL-2R gamma,IL-7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDl-ld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl-la,LFA-1,ITGAM,CDl-lb,ITGAX,CDl-lc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,CD83配体或其片段或组合。下文叙述了优选的共刺激域。[0053]在进一步的实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分离的多核苷酸，其中所述CAR或TCR包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，并且其中抗原结合分子包含可变轻链(VL)CDR3，其包含选自SEQ ID NO:24,58,80和102的氨基酸序列。多核苷酸可以进一步包含活化域。多核苷酸可以进一步包含共刺激域。[0054]在其他实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分离的多核苷酸，所述嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.17),CDR2(SEQ ID NO.18),和CDR3(SEQ ID NO.19)和抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.22),CDR2(SEQ ID NO.23),和CDR3(SEQ ID NO.24)。[0055]在某些实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其与上述序列是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。[0056]在其他实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.51),CDR2(SEQ ID NO.52),和CDR3(SEQ ID NO.53)和抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.56),CDR2(SEQ ID NO.57),和CDR3(SEQ ID NO.58)。[0057]在某些实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其与上述序列是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。

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在其他实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分

离的多核苷酸，所述嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中抗原结合分子重链包含CDR1。CDR1(SEQ ID NO.73),CDR2(SEQ ID NO.74),和CDR3(SEQ ID NO.75)和抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.78),CDR2(SEQ ID NO.79),和CDR3(SEQ ID NO.80)。[0059]在某些实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其与上述序列是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。[0060]在其他实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分离的多核苷酸，所述嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.95),CDR2(SEQ ID NO.96),和CDR3(SEQ ID NO.97)和抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.100),CDR2(SEQ ID NO.101),和CDR3(SEQ ID NO.102)。[0061]在某些实施方案中，本发明涉及分离的多核苷酸，其与上述序列是至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的。

[0062]在进一步的实施方案中，本发明涉及编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的分离的多核苷酸，所述嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)包含特异性结合CLL-1的抗原结合分子，并且其中所述抗原结合分子包含：[0063](a)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1，其包含氨基酸序列GX2X3X4X5X6X7X8X9(SEQ ID NO:134)，其中X2是G、F,或Y；X3是S或T；X4是I、F或L；X5是S或T；X6不存在或是S；X7不存在或是G；X8不存在或是E或G；并且X9是F、L或Y；[0064](b)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)2，其包含氨基酸序列X1X2X3X4X5X6(SEQ ID NO:135)，其中X1是D、H、S或Y；X2是H、P或Y；X3是D、E或S；X4是D或G；X5是G或S；并且X6不存在或是D或E；[0065](c)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)3，其包含氨基酸序列X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12DY(SEQ ID NO:136)，其中X1是E或L；X2是R、S或V；X3是R或Y；X4是C、G或S；X5不存在或是G或I；X6不存在或是G；X7不存在或是D；X8不存在或是C；X9不存在或是W或Y；X10不存在或是P或S；X11不存在或是G或Y；并且X12是F或R；[0066](d)轻链可变区(VL)CDR1，其包含氨基酸序列X1ASQX5X6X7X8X9LX11(SEQ ID NO:137)，其中X1是Q或R；X5是D或S；X6是I或V；X7是N或S；X8是N或S；X9是F、L或Y；并且X11是N或T；[0067](e)轻链可变区(VL)CDR2，其包含氨基酸序列X1ASX4X5X6X7(SEQ ID NO:138)，其中X1是D或G；X4是N、S或T；X5是L或R；X6是A、E或K；并且X7是S或T；和/或[0068](f)轻链可变区(VL)CDR3，其包含氨基酸序列QQX3X4X5X6PX8T(SEQ ID NO:139)，其中X3是S或Y；X4是D、G,或Y；X5是N、S或T；X6是L、T,或Y；并且X8是F或I。[0069]本发明进一步涉及针对CLL-1的抗原结合分子，其包含至少一种如本文列出的可变重链CDR3或可变轻链CDR3序列。本发明进一步涉及针对CLL-1的抗原结合分子，其包含至少一种如本文所述的可变重链CDR1、CDR2和CDR3序列。本发明进一步涉及针对CLL-1的抗原结合分子，其包含至少一种如本文所述的可变轻链CDR1、CDR2和CDR3序列。本发明进一步涉

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及针对CLL-1的抗原结合分子，其包含如本文所述的可变重链CDR1、CDR2、CDR3和可变轻链CDR1、CDR2和CDR3序列两者。

[0070]本发明进一步涉及治疗有此需要的受试者中的疾病或病症的方法，包括对受试者施用根据本发明的抗原结合分子、CAR、TCR、多核苷酸、载体、细胞或组合物。适合于治疗的疾病包括但不限于急性髓样白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、慢性粒单核细胞白血病(cCMML)、幼年型髓单核细胞白血病、非典型慢性髓样白血病、急性前髓细胞性白血病(APL)、急性单核母细胞性白血病、急性红细胞白血病、急性巨核母细胞性白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增生性疾病、髓样新生物、髓样肉瘤、急胞性浆细胞样树状突细胞新生物(BPDCN)或其组合。其他疾病包括炎性和/或自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎、银屑病、变态反应、哮喘、克罗恩病、IBD、IBS、纤维肌痛、肥大细胞增多症和乳糜泻。[0071]附图简述

[0072]图1显示了不同癌细胞系中的CLL-1表达。

[0073]图2显示在mRNA电穿孔后6小时通过蛋白L测定的CLL-1CAR表达。

[0074]图3显示了mRNA电穿孔后24小时不同CLL-1CAR-T细胞构建体的细胞因子释放测定的结果。

[0075]图4显示mRNA电穿孔后24小时不同CLL-1CAR-T细胞构建体的细胞溶解活性。[0076]图5显示mRNA电穿孔后24小时不同CLL-1CAR-T细胞构建体的细胞溶解活性。[0077]图6显示在转导后第12天通过蛋白L测定的CLL-1CAR表达。

[0078]图7显示了在与不同靶细胞系共培养后16小时CLL-1CAR-T细胞的细胞因子释放测定。

[0079]图8显示在与不同靶细胞系共培养后16小时和40小时CLL-1CAR-T细胞的溶细胞活性。

[0080]图9A-9D列出了本发明的CLL-1抗原结合分子的序列比对。CDR用框表示。[0081]图10列出了用根据本发明的CAR处理的NSG小鼠的生物发光结果。[0082]发明详述[0083]应当理解，嵌合抗原受体(CAR或CAR-T)和T细胞受体(TCR)是遗传工程化受体。根据本领域已知的技术可以容易地将这些工程化受体插入免疫细胞中并由免疫细胞表达，所述免疫细胞包括T细胞。凭借CAR，可以对单一受体进行编程以识别特定抗原，并且当与该抗原结合时活化免疫细胞以攻击并破坏携带该抗原的细胞。当这些抗原存在于肿瘤细胞上时，表达CAR的免疫细胞可以靶向并杀死肿瘤细胞。

[0084]可以通过掺入与靶定抗原相互作用的抗原结合分子将CAR过程化改造成结合抗原(例如细胞表面抗原)。优选地，抗原结合分子是其抗体片段，更优选一个或多个单链抗体片段(“scFv”)。scFv是单链抗体片段，其具有连接在一起的抗体重链和轻链的可变区。参见美国专利Nos.7,741,465和6,319,494以及Eshharet al.,Cancer Immunol Immunotherapy(1997)45:131-136。scFv保留亲本抗体与靶抗原特异性相互作用的能力。scFv优选用于嵌合抗原受体，因为它们可以工程化改造成与其他CAR组分一起以单链的一部分表达。同上。还参见Krauseet al.,J.Exp.Med.,Volume 188,No.4,1998(619–626)；Finneyet al.,Journal of Immunology,1998,161:2791–2797。应当理解，抗原结合分子通常包含在CAR的胞外部分内，使得其能够识别和结合感兴趣的抗原。涵盖的是双特异性和多特异性CAR在本

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发明的范围内，对超过一种感兴趣的靶标具有特异性。[0085]共刺激域

[0086]嵌合抗原受体可以掺入共刺激(信号传导)域以增加其效力。参见美国专利Nos.7,741,465和6,319,494以及Krause等人和Finney等人(同上),Songet al.,Blood 119:696-706(2012)；Kaloset al.,Sci Transl.Med.3:95(2011)；Porteret al.,N.Engl.J.Med.365:725-33(2011),和Grosset al.,Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.56:59–83(2016)。例如，CD28是天然存在于T细胞上的共刺激蛋白。本文列出了多种共刺激分子，但应当理解，另外的共刺激分子也包括在本发明的范围内。

[0087]CD28的完整天然氨基酸序列描述于NCBI参考序列：NP_006130.1中。完整的天然CD28核酸序列描述于NCBI参考序列：NM_006139.1中。[0088]某些CD28域已经用于嵌合抗原受体。根据本发明，现在已发现，当用于CAR构建体时，新的CD28胞外(铰链)构建体(称为“CD28T”)出乎意料地提供某些益处。尽管从胞外CD28序列截短(除去)多个氨基酸，但是此构建体证明保留(并且有时超过)含有CD28的CAR的性质的能力。这些益处包括等同或优越的细胞因子产生、等同或优越的细胞溶解活性、和/或等同或优越的CAR表达水平。[0089]SEQ ID NO.1中列出了CD28T分子的核苷酸序列，包括胞外域，以及CD28跨膜和胞内域：

[0090]CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC[0091]SEQ ID NO.2中列出的相应的氨基酸序列：

[0092]LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSK RSRLLHSDYM NMTPRRPGPT RKHYQPYAPP RDFAAYRS[0093]SEQ ID NO.3中列出了CD28T的胞外部分的核苷酸序列：

[0094]CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCA[0095]SEQ ID NO.4中列出了CD28T胞外域的相应氨基酸序列：LDNEKSNGTI IHVKGKHLCP SPLFPGPSKP[0096]SEQ ID NO.5中列出了CD28跨膜域的核苷酸序列：

[0097]TTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT[0098]SEQ ID NO.6中列出了CD28跨膜域的氨基酸序列：FWVLVVVGGV LACYSLLVTV AFIIFWV[0099]SEQ ID NO.7中列出了CD28胞内信号传导域的核苷酸序列：

[0100]AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC[0101]SEQ ID NO.8中列出了CD28胞内信号传导域的氨基酸序列：[0102]RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS

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适合于用于本发明的另外的CD28序列包括SEQ ID NO.11中列出的CD28核苷酸序

列：

ATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAA

GGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCC[0105]SEQ ID NO.12中列出了相应的氨基酸序列：[0106]IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP[0107]应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其包含至少一个SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3的分离的核酸序列。还应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其中胞外部分由至少一个SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3的分离的核酸序列组成。另外，应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其中胞外部分基本上由至少一个SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3的分离的核酸序列组成。[0108]应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其包含至少一个SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4的分离的核酸序列。还应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其中胞外部分由至少一个SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4的分离的核酸序列组成。另外，应当理解，本发明涉及抗原结合分子、CAR，TCR等，其中胞外部分基本上由至少一个SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4的分离的核酸序列组成。

[0109]胞外和/或跨膜域的另一种合适来源可以源自(或对应于)CD8中的一些或全部。SEQ ID NO.13中列出了合适的CD8细胞外和跨膜域的核苷酸序列：

[0110]GCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAAC[0111]SEQ ID NO.14中列出了相应的氨基酸序列：

[0112]AAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN[0113]应当理解，在本发明范围内的合适的共刺激域可以源自(或对应于)例如CD28,CD28T,OX40,4-1BB/CD137,CD2,CD3(alpha,beta,delta,epsilon,gamma,zeta),CD4,CD5,CD7,CD9,CD16,CD22,CD27,CD30,CD 33,CD37,CD40,CD 45,CD64,CD80,CD86,CD134,CD137,CD154,PD-1,ICOS,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDlla/CD18),CD247,CD276(B7-H3),LIGHT(肿瘤坏死因子超家族成员14；TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子,TNF,TNFr,整合蛋白,信号传导淋巴细胞活化分子,BTLA,Toll配体受体,ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL-2R beta,IL-2R gamma,IL-7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDl-ld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl-la,LFA-1,ITGAM,CDl-lb,ITGAX,CDl-lc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,CD83配体或其片段或组合。应当理解，上

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文未列出的另外的共刺激分子或其片段在本发明的范围内。[0114]活化域

[0115]CD3是天然T细胞上的T细胞受体的元件，并且已经显示是CAR中重要的胞内活化元件。在优选的实施方案中，CD3是CD3zeta，其核苷酸序列列出SEQ ID NO.9：

[0116]AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG[0117]SEQ ID NO.10中列出了胞内CD3zeta的相应的氨基酸：

[0118]RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR[0119]相对于细胞的域取向[0120]在结构上，应当理解，本文描述的域对应于相对于免疫或其他细胞的位置。因此，这些域可以是(i)“铰链”或胞外(EC)域，(ii)跨膜(TM)域和/或(iii)胞内/胞质域(IC)的一部分。胞内组分通常部分包含活化域，例如CD3家族成员的一部分，优选CD3zeta。该域能够在抗原结合分子与其靶标结合后活化T细胞。应当理解，胞内域通常进一步包含一种或多种如本文所述的共刺激分子。[0121]如本文所用，“活化”或“刺激”是指通过活化分子与其关联配体的结合诱导的初级应答，其中所述结合介导信号转导事件。[0122]“活化分子”或“刺激分子”是指与存在于抗原呈递细胞上的关联刺激配体特异性结合的T细胞上的分子，例如TCR/CD3复合物。本文描述了合适的活化分子。[0123]如本文所用，“共刺激分子”是指提供介导T细胞应答的信号的分子，所述T细胞应答包括但不限于增殖、活化、分化等。除了由如本文所述的活化分子提供的初级信号外，共刺激分子可以提供信号。

[0124]合适的共刺激分子包括但不限于整个或部分的CD28,CD28T,OX40,4-1BB/CD137,CD2,CD3(alpha,beta,delta,epsilon,gamma,zeta),CD4,CD5,CD7,CD9,CD16,CD22,CD27,CD30,CD 33,CD37,CD40,CD 45,CD64,CD80,CD86,CD134,CD137,CD154,PD-1,ICOS,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1(CDl la/CD18),CD247,CD276(B7-H3),LIGHT(肿瘤坏死因子超家族成员14；TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子,TNF,TNFr,整合蛋白,信号传导淋巴细胞活化分子,BTLA,Toll配体受体,ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL2R beta,IL2R gamma,IL7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDl-ld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl-la,LFA-1,ITGAM,CDl-lb,ITGAX,CDl-lc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,CD83配体或其片段或组合。应当理解，交联区可以含有一些或整个免疫球

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蛋白家族成员，诸如IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgA,IgD,IgE,IgM或其片段。[0125]在一些实施方案中，胞外域位于抗原结合分子和跨膜域之间。[0126]表1中列出了根据本发明的示例性CAR构建体。[0127]表1

[0128]

[0129]

如所述，本发明的工程化T细胞包含抗原结合分子(例如scFv)、胞外域(其可以包

含“铰链”域)、跨膜域和胞内域。胞内域可以至少部分地包含活化域，优选包含CD3家族成员，例如CD3zeta,CD3epsilon,CD3gamma或其部分。[0131]还应当理解，抗原结合分子(例如，一种或多种scFv)工程化改造为使得其位于分子/构建体的胞外部分中，使得其能够识别并结合其靶标。[0132]胞外域。在本发明中特别使用的胞外域可以源自(即包含)整个或部分的CD28,OX-40,4-1BB/CD137,CD2,CD7,CD27,CD30,CD40,程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1,CDl-la/CD18),CD3gamma,CD3delta,CD3epsilon,CD247,CD276(B7-H3),LIGHT,(TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL-2R beta,IL-2R gamma,IL-7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDlld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl la,LFA-1,ITGAM,CDllb,ITGAX,CDllc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,特异性结合CD83的配体，或其任何组合。胞外域可以源自天然来源或合成来源。

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胞外域通常包含铰链部分，有时称为“间隔物”区。根据本发明可以使用多种铰链，

包括本文所述分子的部分或衍生物。[0134]在某些实施方案中，铰链区包含与本文列出的胞外域氨基酸序列至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约90％96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的氨基酸序列。[0135]在某些实施方案中，铰链区包含与本文所述的胞外核苷酸氨基酸序列至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约90％。96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的氨基酸序列。[0136]跨膜域

[0137]可以设计CAR具有与CAR的胞外域融合的跨膜域。它可以类似地与CAR的胞内域融合。在一些情况下，可以通过氨基酸取代来选择或修饰跨膜域，以避免此类域与相同或不同表面膜蛋白的跨膜域结合，从而最小化与受体复合物的其他成员的相互作用。跨膜域可以源自天然来源或来自合成来源。在来源是天然的情况下，域可以源自任何膜结合或跨膜蛋白。在本发明中特别使用的跨膜区可以源自(包含或对应于)CD28,CD28T,OX-40,4-1BB/CD137,CD2,CD7,CD27,CD30,CD40,程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1,CDl-la/CD18),CD3gamma,CD3delta,CD3epsilon,CD247,CD276(B7-H3),LIGHT,(TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL-2R beta,IL-2R gamma,IL-7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDlld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl la,LFA-1,ITGAM,CDllb,ITGAX,CDllc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,特异性结合CD83的配体，或其任何组合。[0138]任选地，短接头可以在CAR的胞外、跨膜和胞内域中的任一项或一些之间形成连接。

[0139]在其他实施方案中，本发明的CAR中的跨膜域是CD8跨膜域。在一个实施方案中，CD8跨膜域包含SEQ ID NO:13的核酸序列的跨膜部分。在另一个实施方案中，CD8跨膜域包含编码SEQ ID NO:14中包含的跨膜氨基酸序列的核酸序列。[0140]在某些实施方案中，本发明的CAR中的跨膜域是CD28跨膜域。在一个实施方案中，CD28跨膜域包含SEQ ID NO:5的核酸序列。在一个实施方案中，CD28跨膜域包含编码SEQ ID NO:6的氨基酸序列的核酸序列。在另一个实施方案中，CD28跨膜域包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

[0141]胞内(胞质)域。本发明的工程化T细胞的胞内(胞质)域可以提供免疫细胞的至少一种正常效应器功能的活化。例如，T细胞的效应器功能可以指细胞溶解活性或辅助活性，包括细胞因子的分泌。

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应当理解，合适的细胞内分子包括(即包含)但不限于源自(或对应于)下列各项的

信号传导域：CD28,CD28T,OX-40,4-1BB/CD137,CD2,CD7,CD27,CD30,CD40,程序性死亡-1(PD-1)、诱导型T细胞共刺激物(ICOS)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1,CDl-la/CD18),CD3gamma,CD3delta,CD3epsilon,CD247,CD276(B7-H3),LIGHT,(TNFSF14),NKG2C,Ig alpha(CD79a),DAP-10,Fc gamma受体,MHC I类分子、TNF受体蛋白、免疫球蛋白蛋白质、细胞因子受体、整联蛋白、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM蛋白)、活化性NK细胞受体、BTLA、Toll配体受体、ICAM-1,B7-H3,CDS,ICAM-1,GITR,BAFFR,LIGHT,HVEM(LIGHTR),KIRDS2,SLAMF7,NKp80(KLRF1),NKp44,NKp30,NKp46,CD19,CD4,CD8alpha,CD8beta,IL-2R beta,IL-2R gamma,IL-7R alpha,ITGA4,VLA1,CD49a,ITGA4,IA4,CD49D,ITGA6,VLA-6,CD49f,ITGAD,CDlld,ITGAE,CD103,ITGAL,CDl la,LFA-1,ITGAM,CDllb,ITGAX,CDllc,ITGBl,CD29,ITGB2,CD18,LFA-1,ITGB7,NKG2D,TNFR2,TRANCE/RANKL,DNAM1(CD226),SLAMF4(CD244,2B4),CD84,CD96(Tactile),CEACAM1,CRT AM,Ly9(CD229),CD160(BY55),PSGL1,CD100(SEMA4D),CD69,SLAMF6(NTB-A,Lyl08),SLAM(SLAMF1,CD150,IPO-3),BLAME(SLAMF8),SELPLG(CD162),LTBR,LAT,GADS,SLP-76,PAG/Cbp,CD19a,特异性结合CD83的配体或其任何组合。

[0143]在一个优选的实施方案中，CAR的胞内/胞质域可以设计成自身包含CD3zeta域或与在本发明的CAR中有用的任何其它期望的胞内域组合。例如，CAR的胞内域可以包含CD3zeta链部分和共刺激信号分子的一部分。本发明的CAR的胞内信号传导部分内的胞内信号传导序列可以随机或规定的次序彼此连接。[0144]在另一个优选的实施方案中，将胞内域设计为包含CD3zeta的活化域和CD28的信号传导域。在另一个实施方案中，将胞内域设计为包含CD3zeta的活化域和4-1BB的信号传导域。在另一个实施方案中，将CAR中的胞内域设计为包含CD28和CD3zeta的一部分，其中胞内CD28包含SEQ ID NO:7中列出的核酸序列和SEQ ID NO:8中列出的氨基酸序列。SEQ ID NO:9中列出了CD3zeta核酸序列，并且SEQ ID NO:8中列出了氨基酸序列。[0145]应当理解，根据本发明的CAR的一种优选取向包括与胞外和/或铰链域、共刺激域和活化域串联的抗原结合分子(例如scFv)。还应当理解，可以串联使用多个域。[0146]在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其包含与编码抗原结合分子、至少一种共刺激分子和活化域的第一多核苷酸可操作地连接的启动子。在一些实施方案中，核酸构建体包含在病毒载体内。在一些实施方案中，病毒载体选自逆转录病毒载体，鼠白血病病毒载体，SFG载体，腺病毒载体，慢病毒载体，腺伴随病毒(AAV)载体，疱疹病毒载体和痘苗病毒载体。在一些实施方案中，核酸包含在质粒内。[0147]在一些实施方案中，工程化免疫细胞是T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、NK细胞、表达TCR的细胞、树突细胞或NK-T细胞。在一些实施方案中，自外周血获得或制备细胞。在一些实施方案中，从外周血单个核细胞(PBMC)获得或制备细胞。在一些实施方案中，从骨髓获得或制备细胞。在一些实施方案中，从脐带血获得或制备细胞。在一些实施方案中，细胞是人细胞。在一些实施方案中，使用选自电穿孔、声孔效应、生物射弹(例如基因枪)、脂质转染、聚合物转染、纳米颗粒或复合物的方法，通过核酸载体转染或转导细胞。[0148]在一些实施方案中，在包含本申请的核酸的工程化免疫细胞中表达嵌合抗原受体。在一些实施方案中，本申请的这些嵌合抗原受体可以包含(i)抗原结合分子(例如

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scFv)，(ii)跨膜区，和(iii)T细胞活化分子或区域。[0149]应当进一步理解，在本文中用语言“包括”描述的任何方面，还提供了以“由......组成”和/或“基本上由......组成”描述的其他类似方面。[0150]另外，术语“约”或“基本上由......组成”是指如本领域普通技术人员测定的特定值或组成的可接受误差范围内的值或组成，其将部分取决于如何测量或测定值或组成，即测量系统的局限性。例如，“约”或“基本上由......组成”可以表示按本领域实践的1个内或超过1个标准偏差。或者，“约”或“基本上由......组成”可以表示高达10％的范围(即±10％)。例如，约3mg可以包括2.7mg至3.3mg之间的任何数字(10％)。此外，特别是关于生物系统或过程，该术语可以表示高达一个数目级或高达5倍的值。当在本申请和权利要求书中提供特定值或组成时，除非另有说明，否则应当假定“约”或“基本上由……组成”的含义在该特定值或组成的可接受的误差范围内。[0151]抗原结合分子

[0152]抗原结合分子在本发明的范围内。如本文所用，“抗原结合分子”是指结合规定靶抗原的任何蛋白质。在本申请中，规定的靶抗原是CLL-1蛋白或其片段。抗原结合分子包括但不限于抗体及其结合部分，例如免疫功能片段。肽抗体(peptibodies)(即，包含肽结合域的Fc融合分子)是合适的抗原结合分子的另一个实例。[0153]在某些实施方案中，本发明涉及抗原结合分子，其包含：[0154](a)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)1，其包含氨基酸序列GX2X3X4X5X6X7X8X9(SEQ ID NO:134)，其中X2是G、F、或Y；X3是S或T；X4是I、F、或L；X5是S或T；X6不存在或是S；X7不存在或是G；X8不存在或是E或G；和X9是F、L、或Y；[0155](b)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)2，其包含氨基酸序列X1X2X3X4X5X6(SEQ ID NO:135)，其中X1是D、H、S、或Y；X2是H、P、或Y；X3是D、E、或S；X4是D或G；X5是G或S；和X6是不存在或是D或E；[0156](c)重链可变区(VH)互补决定区(CDR)3，其包含氨基酸序列X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12DY(SEQ ID NO:136)，其中X1是E或L；X2是R、S、或V；X3是R或Y；X4是C、G、或S；X5不存在或是G或I；X6不存在或是G；X7不存在或是D；X8不存在或是C；X9不存在或是W或Y；X10不存在或是P或S；X11不存在或是G或Y；和X12是F或R；[0157](d)轻链可变区(VL)CDR1，其包含氨基酸序列X1ASQX5X6X7X8X9LX11(SEQ ID NO:137)，其中X1是Q或R；X5是D或S；X6是I或V；X7是N或S；X8是N或S；X9是F、L、或Y；和X11是N或T；[0158](e)轻链可变区(VL)CDR2，其包含氨基酸序列X1ASX4X5X6X7(SEQ ID NO:138)，其中X1是D或G；X4是N、S、或T；X5是L或R；X6是A、E、或K；和X7是S或T；和/或[0159](f)轻链可变区(VL)CDR3，其包含氨基酸序列QQX3X4X5X6PX8T(SEQ ID NO:139)，其中X3是S或Y；X4是D、G、或Y；X5是N、S、或T；X6是L、T、或Y；和X8是F或I。[0160]在一些实施方案中，本发明涉及包含以下至少一种的抗原结合分子：(a)包含选自SEQ ID NOs:17,51,73,95,5,和97的氨基酸序列的可变重链CDR1；(b)包含选自18,52,74,96的氨基酸序列的可变重链CDR2；(c)包含选自SEQ ID NO SEQ ID NO:19,53,75,和97的氨基酸序列的可变重链CDR3；(d)包含选自SEQ ID NOs:22,56,78和100的氨基酸序列的可变轻链CDR1；(e)包含选自SEQ ID NOs.23,57,79,和101的氨基酸序列的可变轻链CDR2；(f)包含选自SEQ ID NOs.24,58,80,和102的氨基酸序列的可变轻链CDR3。

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在其他实施方案中，本发明涉及包含以下至少一种的抗原结合分子(和包含这些

分子的嵌合抗原受体)：(a)包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列VL区；(b)包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区；(c)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的VL区；(d)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的VH区和包含SEQ ID NO:99的氨基酸序列的VL区；且其中VH和VL区通过至少一个接头连接。在其他实施方案中，本发明涉及抗原结合分子(和包含这些分子的嵌合抗原受体)，其中所述接头包含SEQ ID NO.130和SEQ ID NO.132中的至少一个。

[0162]在进一步的实施方案中，本发明涉及包含可变轻(VL)链CDR3的抗原结合分子，所述CDR3包含选自SEQ ID NO:24,58,80和102的氨基酸序列。[0163]在其他实施方案中，本发明涉及编码特异性结合CLL-1的抗原结合分子的分离的多核苷酸，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.17),CDR2(SEQ ID NO.18),和CDR3(SEQ ID NO.19)和CDR3(SEQ ID NO.19)并且抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.22),CDR2(SEQ ID NO.23),和CDR3(SEQ ID NO.24)。[0164]在其他实施方案中，本发明涉及特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.51),CDR2(SEQ ID NO.52),和CDR3(SEQ ID NO.53)，并且抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.56),CDR2(SEQ ID NO.57),和CDR3(SEQ ID NO.58)。[0165]在其他实施方案中，本发明涉及特异性结合CLL-1的抗原结合分子，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.73),CDR2(SEQ ID NO.74),和CDR3(SEQ ID NO.75)并且抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.78),CDR2(SEQ ID NO.79),和CDR3(SEQ ID NO.80)。[0166]在其他实施方案中，本发明涉及编码特异性结合CLL-1的抗原结合分子的分离的多核苷酸，其中抗原结合分子重链包含CDR1(SEQ ID NO.95),CDR2(SEQ ID NO.96),和CDR3(SEQ ID NO.97)，并且抗原结合分子轻链包含CDR1(SEQ ID NO.100),CDR2(SEQ ID NO.101),和CDR3(SEQ ID NO.102)。[0167]在某些实施方案中，本发明涉及编码与本文所述的一种或多种抗体交叉竞争的抗CLL-1抗原结合分子的分离的多核苷酸或由多核苷酸编码的其抗原结合分子。在一个实施方案中，本发明涉及编码抗CLL-1抗原结合分子的分离的多核苷酸，其与本文所述的一种或多种抗原结合分子结合相同的表位。[0168]在一些实施方案中，抗原结合分子结合肿瘤细胞上的抗原。在一些实施方案中，抗原结合分子结合参与过度增殖性疾病的细胞上的抗原或病毒或细菌抗原。在进一步的实施方案中，抗原结合分子是抗体或其片段，包括其一个或多个互补决定区(CDR)。在进一步的实施方案中，抗原结合分子是单链可变片段(scFv)。[0169]抗原结合分子的术语“免疫功能片段”(或“片段”)是一种抗原结合分子，其包含缺少全长链中存在的至少一些氨基酸，但仍能够特异性结合抗原。此类片段具有生物学活性，因为它们与靶抗原结合并可以与其他抗原结合分子(包括完整抗体)竞争结合给定表位。在一些实施方案中，片段是中和片段。在一些实施方案中，片段可以阻断或降低CLL-1的活性。在一个方面，此类片段将保留存在于全长轻链或重链中的至少一个CDR，并且在一些实施方案中，将包含单一重链和/或轻链或其部分。这些片段可以通过重组DNA技术产生，或者可以通过抗原结合分子(包括完整抗体)的酶促或化学切割产生。

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免疫功能性免疫球蛋白片段包括但不限于scFv片段、Fab片段(Fab'，F(ab')2等)、

一个或多个CDR、双抗体(与轻链可变域在相同的多肽上的重链可变域，经由短肽接头连接，所述短肽接头太短而不允许在同一链上的两个域之间配对)、域抗体和单链抗体。这些片段可以源自任何哺乳动物来源，包括但不限于人、小鼠、大鼠、骆驼科动物或兔。如本领域技术人员所理解，抗原结合分子可以包括非蛋白质组分。[0171]抗原结合分子的变体也在本发明的范围内，例如，可变轻链和/或可变重链，它们与本文所述序列的氨基酸序列各自具有至少70-80％,80-85％,85-90％,90-95％,95-97％,97-99％或99％以上的同一性。在一些情况下，此类分子包含至少一条重链和一条轻链，而在其他情况下，变体形式含有两条相同的轻链和两条相同的重链(或其子部分)。熟练技术人员将能够使用公知的技术确定如本文中列出的抗原结合分子的合适变体。在某些实施方案中，本领域技术人员可以通过靶向认为对活性不重要的区域来鉴定可以改变而不破坏活性的分子的合适区域。[0172]在某些实施方案中，抗原结合分子的多肽结构基于抗体，包括但不限于单克隆抗体、双特异性抗体、微型抗体、域抗体、合成抗体(本文有时称为“抗体模拟物”)、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体、抗体融合物(本文有时称为“抗体缀合物”)及其片段。在一些实施方案中，抗原结合分子包含avimer或由avimer组成。[0173]在一些实施方案中，针对CLL-1的抗原结合分子作为CAR、TCR或其他免疫细胞的一部分施用。在此类免疫细胞中，针对CLL-1的抗原结合分子可以在相同的启动子区域或分开的启动子的控制下。在某些实施方案中，编码蛋白质试剂和/或针对CLL-1的抗原结合分子的基因可以在分开的载体中。

[0174]本发明进一步提供药物组合物，其包含针对CLL-1的抗原结合分子以及药学上可接受的稀释剂、载体、增溶剂、乳化剂、防腐剂和/或佐剂。在某些实施方案中，药物组合物将包括超过一种针对CLL-1的不同抗原结合分子。在某些实施方案中，药物组合物将包括超过一种针对CLL-1的抗原结合分子，其中针对CLL-1的抗原结合分子结合超过一种表位。在一些实施方案中，各种抗原结合分子不会彼此竞争对CLL-1的结合。[0175]在其他实施方案中，药物组合物可以选择用于胃肠外递送，用于吸入，或用于通过消化道递送，例如口服。此类药学上可接受的组合物的制备在本领域技术人员的能力范围内。在某些实施方案中，使用缓冲液将组合物维持在生理pH或略低的pH下，通常在约5至约8的pH范围内。在某些实施方案中，当考虑胃肠外施用时，治疗组合物可以为无热原、胃肠外可接受的水溶液的形式，其在药学上可接受的媒介物中包含针对CLL-1的期望抗原结合分子，有或没有另外的治疗剂。在某些实施方案中，用于胃肠外注射的媒介物是无菌蒸馏水，其中将具有或没有至少一种另外的治疗剂的针对CLL-1的抗原结合分子配制为适当保存的无菌等张溶液。在某些实施方案中，制剂可以涉及用聚合化合物(例如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠或脂质体配制期望的分子，所述聚合化合物(例如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠或脂质体可以提供产物的受控或持续释放，然后可以通过贮库注射递送。在某些实施方案中，可以使用可植入药物递送装置导入期望的分子。[0176]在一些实施方案中，抗原结合分子用作诊断或验证工具。抗原结合分子可以用于测定样品和/或受试者中存在的CLL-1的量。在一些实施方案中，诊断性抗原结合分子不是中和性的。在一些实施方案中，在用于检测哺乳动物组织或细胞中的CLL-1的测定试剂盒

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和/或方法中使用或提供本文公开的抗原结合分子，以筛选/诊断与CLL-1水平变化相关的疾病或病症。试剂盒可以包含结合CLL-1的抗原结合分子，以及指示抗原结合分子与CLL-1(如果存在)的结合和任选地CLL-1蛋白水平的手段。[0177]鉴于下面的定义和描述，将进一步理解抗原结合分子。[0178]“Fc”区包含两个重链片段，其包含抗体的CH1和CH2域。两个重链片段通过两个或更多个二硫键和通过CH3域的疏水相互作用保持在一起。[0179]“Fab片段”包含一条轻链和一条重链的CH1和可变区。Fab分子的重链不能与另一个重链分子形成二硫键。“Fab’片段”包含一条轻链和一条重链中含有VH域和CH1域以及CH1和CH2域之间的区域的一部分，使得可以在两个Fab'片段的两个重链之间形成链间二硫键以形成F(ab’)2分子。“F(ab’)2片段”含有两条轻链和含有CH1和CH2域之间的一部分恒定区的两条重链，使得在两条重链之间形成链间二硫键。因此，F(ab’)2片段由两个Fab'片段组成，所述Fab'片段通过两条重链之间的二硫键保持在一起。[0180]“Fv区”包括来自重链和轻链两者的可变区，但缺少恒定区。[0181]“单链可变片段”(“scFv”，也称为“单链抗体”)是指其中重链和轻链可变区通过柔性接头连接以形成单一多肽链的Fv分子，所述单一多肽链形成抗原结合区。参见PCT申请WO88/01649和美国专利No.4,946,778和5,260,203，其公开内容通过引用整体并入。[0182]“二价抗原结合分子”包含两个抗原结合位点。在一些情况下，两个结合位点具有相同的抗原特异性。二价抗原结合分子可以是双特异性的。“多特异性抗原结合分子”是靶向超过一种抗原或表位的分子。“双特异性”、“双重特异性”或“双功能”抗原结合分子分别是具有两个不同抗原结合位点的杂合抗原结合分子或抗体。双特异性抗原结合分子的两个结合位点将结合两个不同的表位，其可以位于相同或不同的蛋白质靶标上。[0183]当解离常数(Kd)为约1×10-7M时，抗原结合分子被称为“特异性结合”其靶抗原。当Kd是1-5x10-9时，抗原结合分子以“高亲和力”特异性结合抗原，并且当Kd为l-5x10-10时以“非常高的亲和力”结合。在一个实施方案中，抗原结合分子的Kd为10-9M。在一个实施方案中，解离速率<1x10-5。在其他实施方案中，抗原结合分子将以10-7M-10-13M的Kd结合人CLL-1结合，并且在另一个实施方案中，抗原结合分子以Kd l.0-5x10-10结合。[0184]在一些实施方案中，本发明的抗体或抗原结合分子特异性结合CLL-1(例如，hCLL-1)。在某些实施方案中，本发明的抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-6M、小于1x 10-7

M、小于1x 10-8M、或小于1x 10-9M的KD结合人CLL-1。在一个具体的实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x10-7M的KD结合人CLL-1。在另一个实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-8M的KD结合人CLL-1。在一些实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以约1x 10-7M,约2x 10-7M,约3x 10-7M,约4x 10-7M,约5x10-7M,约6x 10-7M,约7x 10-7

M,约8x 10-7M,约9x 10-7M,约1x 10-8M,约2x 10-8M,约3x 10-8M,约4x 10-8M,约5x 10-8M,约6x 10-8M,约7x10-8M,约8x 10-8M,约9x 10-8M,约1x 10-9M,约2x 10-9M,约3x 10-9M,约4x 10-9

M,约5x 10-9M,约6x 10-9M,约7x 10-9M,约8x 10-9M,约9x10-9M,约1x 10-10M,或约5x 10-10M的KD结合人CLL-1。在某些实施方案中，KD以koff/kon的商计算，并且使用单价抗体(例如Fab片段)测定kon和koff，如通过例如

表面等离子体共振技术测量的。

表面等离振子共振技术测量。在其他实施方案

中，KD以koff/kon的商，并且使用二价抗体(例如Fab片段)测定kon和koff，如通过例如

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在其他实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-9M、小于3x 10-9M、

小于5x 10-9M、小于1x 10-10M、小于3x 10-10M、或小于5x 10-10M的KD结合人CLL-1-Fc。在其他实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-5M、小于1x 10-6M、小于1x 10-7M、小于1x 10-8M、小于1x 10-9M、或小于1x 10-10M的KD结合cyno CLL-1-Fc。[0186]在一些实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-4M-1s-1,小于2x 10-4M-1s-1,小于3x 10-4M-1s-1,小于4x 10-4M-1s-1,小于5x 10-4M-1s-1,小于6x 10-4M-1s-1,小于7x 10-4M-1s-1,小于8x 10-4M-1s-1,小于9x 10-4M-1s-1,小于1x 10-5M-1s-1,小于2x 10-5M-1s-1,小于3x 10-5M-1s-1,小于4x10-5M-1s-1,小于5x 10-5M-1s-1,小于6x 10-5M-1s-1,小于7x 10-5M-1s-1

,小于8x 10-5M-1s-1,小于9x 10-5M-1s-1,小于1x 10-6M-1s-1,小于2x 10-6M-1s-1,小于3x 10-6-1-1

Ms,小于4x 10-6M-1s-1,小于5x 10-6M-1s-1,小于6x 10-6M-1s-1,小于7x 10-6M-1s-1,小于8x 10-6M-1s-1,小于9x 10-6M-1s-1,or小于1x10-7M-1s-1的结合速率(kon)结合人CLL-1。在某些实施方案中，使用单价抗体(例如Fab片段)测定kon，如通过例如术测量的。在其他实施方案中，使用二价抗体测定kon，如通过例如

表面等离子体共振技

表面等离子体

共振技术测量的。

[0187]在一些实施方案中，抗CLL-1抗体或抗原结合分子以小于1x 10-2s-1,小于2x 10-2-1

s,小于3x 10-2s-1,小于4x 10-2s-1,小于5x 10-2s-1,小于6x 10-2s-1,小于7x 10-2s-1,小于8x 10-2s-1,小于9x 10-2s-1,小于1x 10-3s-1,小于2x10-3s-1,小于3x 10-3s-1,小于4x 10-3s-1,小于5x 10-3s-1,小于6x 10-3s-1,小于7x 10-3s-1,小于8x 10-3s-1,小于9x 10-3s-1,小于1x 10-4s-1,小于2x 10-4s-1,小于3x 10-4s-1,小于4x 10-4s-1,小于5x 10-4s-1,小于6x 10-4s-1,小于7x10-4s-1,小于8x 10-4s-1,小于9x 10-4s-1,小于1x 10-4s-1,或小于5x 10-4s-1的解离速率(koff)结合人CLL-1。在某些实施方案中，使用单价抗体(例如Fab片段)测定koff，如通过例如

表面等离子体共振技术测量的。在其他实方案中，使用二价抗体测定kon，如通过

例如

[0188]

表面等离子体共振技术测量的。

当抗原结合分子比它结合第二靶标更紧密结合一种靶标时，其称为是“选择性

的”。

术语“抗体”是指可以与完整抗体竞争对靶抗原的特异性结合的任何同种型的完整免疫球蛋白或其片段，并且包括例如嵌合的、人源化的、完全人的、和双特异性抗体。“抗体”是如本文所定义的抗原结合分子的种类。完整抗体通常包含至少两条全长重链和两条全长轻链，但在一些情况下可以包括更少的链，例如天然存在于骆驼科动物中的抗体，其可以仅包含重链。抗体可以仅源自单一来源，或者可以是嵌合的，即，抗体的不同部分可以源自两种不同的抗体，如下文进一步描述的。抗原结合分子、抗体或结合片段可以在杂交瘤中，通过重组DNA技术，或通过完整抗体的酶促或化学切割产生。除非另有指示，否则术语“抗体”除了包含两条全长重链和两条全长轻链的抗体外还包括其衍生物、变体、片段和突变蛋白，其实例如下所述。此外，除非明确排除，否则抗体包括单克隆抗体、双特异性抗体、微型抗体、域抗体、合成抗体(本文有时称为“抗体模拟物”)、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体、抗体融合物(本文有时称为“抗体缀合物”)及其片段。[0190]可变区通常表现出由3个高变区(即“CDR”)连接的相对保守的框架区(FR)的相同的一般结构。来自每对的两条链的CDR通常通过框架区对齐，这可以使得能够结合特定的表

[0189]

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位。从N末端到C末端，轻链和重链可变区两者通常包含域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。按照惯例，重链中的CDR区通常称为HC CDR1、CDR2和CDR3。轻链中的CDR区通常称为LC CDR1、CDR2和CDR3。对每个域的氨基酸分配通常符合Kabat、Chothia或AbM定义的限定。[0191]术语“Kabat编号”和类似术语在本领域中是公认的，并且是指在抗体的重链和轻链可变区或其抗原结合部分中氨基酸残基的编号系统。在某些方面，抗体的CDR可以根据Kabat编号系统确定(参见例如Kabat EA &Wu TT(1971)Ann NY AcadSci 190:382-391和Kabat EAet al.,(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest,Fifth Edition,U.S.Department of Health and Human Services,NIH Publication No.91-3242)。使用Kabat编号系统，抗体重链分子内的CDR通常存在于氨基酸位置31至35，其任选地可以包含一个或两个额外的氨基酸，在35之后(在Kabat编号方案中称为35A和35B)(CDR1)，氨基酸位置50至65(CDR2)和氨基酸位置95至102(CDR3)。使用Kabat编号系统，抗体轻链分子内的CDR通常存在于氨基酸位置24至34(CDR1)，氨基酸位置50至56(CDR2)和氨基酸位置89至97(CDR3)。在一个具体实施方案中，本文所述抗体的CDR已根据Kabat编号方案确定。

[0192]在某些方面，抗体的CDR可以根据Chothia编号方案确定，该方案是指免疫球蛋白结构环的位置(参见例如Chothia C&Lesk AM,(1987),J MolBiol 196:901-917；Al-Lazikani Bet al.,(1997)J MolBiol 273:927-948；Chothia Cet al.,(1992)J MolBiol 227:799-817；Tramontano Aet al.,(1990)J MolBiol 215(1):175-82；和美国专利No.7,709,226)。通常，当使用Kabat编号惯例时，Chothia CDR-H1环存在于重链氨基酸26至32、33或34处，Chothia CDR-H2环存在于重链氨基酸52至56，并且Chothia CDR-H3环存在于重链氨基酸95至102，而Chothia CDR-L1环存在于轻链氨基酸24至34，Chothia CDR-L2环存在于轻链氨基酸50至56并且Chothia CDR-L3环存在于轻链氨基酸89至97。当使用Kabat编号惯例编号时，Chothia CDR-HI环的末端在H32和H34之间变化，取决于环的长度(这是因为Kabat编号方案将插入放置在H35A和H35B；若35A和35B都不存在，则环结束于32；如果仅存在35A，则环结束于33；若35A和35B两者都存在，则环结束于34)。[0193]在一个具体实施方案中，本文所述抗体的CDR已根据Chothia编号方案确定。[0194]通常使用的CDR的许多定义是：Kabat编号，Chothia编号，AbM编号或接触编号(contact numbering)。AbM定义是Oxford Molecular的AbM抗体建模软件使用的两者之间的折衷。接触定义基于对可用复杂晶体结构的分析。[0195]表2：CDR编号

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如本文所用，术语“重链”在用于提及抗体时基于恒定域的氨基酸序列可以指任何

不同类型，例如alpha(α),delta(δ),epsilon(ε),gamma(γ)和mu(μ)，其分别产生IgA，IgD，IgE，IgG和IgM类抗体，包括IgG的亚类，例如IgG1,IgG2,IgG3和IgG4。[0198]如本文所用，术语“轻链”当用于提及抗体时基于恒定域的氨基酸序列可以指任何不同类型，例如kappa(κ)或lambda(λ)。轻链氨基酸序列是本领域公知的。在具体的实施方案中，轻链是人轻链。[0199]术语“可变区”或“可变域”是指抗体的轻链和/或重链的一部分，通常大致包括重链中氨基端约120至130个氨基酸和轻链中的约100至100个氨基端氨基酸。抗体的可变区通常确定特定抗体对其靶标的特异性。

[0200]变异性不均匀地分布在抗体或抗原结合分子的可变域中；它集中在重链和轻链可变区中每个的亚域中。这些子域称为“高变区”或“互补决定区”(CDR)，如本文进一步描述的。可变域的更保守(即，非高变)部分称为“框架”区域(FRM或FR)，并为三维空间中的六个CDR提供支架以形成抗原结合表面。天然存在的重链和轻链的可变域各自包含由三个高变区连接的主要采用β-片层构型的四个FRM区域(FR1，FR2，FR3和FR4)，所述高变区形成环连接，并且在一些情况下形成β-片层结构的一部分。每条链中的高变区通过FRM紧密地保持在一起，并且与来自另一条链的高变区一起有助于抗原结合位点的形成(参见Kabatet等，本文进一步描述。[0201]通常，CDR形成环结构，其可以分类为规范结构。术语“规范结构”是指抗原结合(CDR)环所采用的主链构象。从比较结构研究中，已发现六个抗原结合环中的五个仅具有有限的可用构象全集。每个规范结构可以通过多肽骨架的扭转角来表征。因此，抗体之间的对应环可具有非常相似的三维结构，尽管在环的大部分区域中具有高氨基酸序列可变性(Chothia and Lesk,J.MoI.Biol.,1987,196:901；Chothiaet al.,Nature,1989,342:877；Martin and Thornton,J.MoI.Biol,1996,263:800)。此外，采用的环结构与其周围的氨基酸序列之间存在关系。特定规范类的构象由环的长度和位于环内以及保守框架内(即环的外部)关键位置的氨基酸残基决定。因此，可以基于这些关键氨基酸残基的存在来进行对特定规范类的分配。[0202]术语“规范结构”还可以包括关于抗体的线性序列的考虑因素，例如，如Kabat

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(Kabatet等人，本文)所编目的。Kabat编号方案(系统)是用于以一致的方式对抗体可变域的氨基酸残基编号的广泛采用的标准，并且是本发明中应用的优选方案，如本文其他地方所提及。另外的结构考虑因素也可以用于确定抗体的规范结构。例如，可以通过Chothia等人的编号系统描述和/或通过其他技术，例如晶体学和二维或三维计算建模揭示Kabat编号未完全反映的那些差异。因此，可以将给定的抗体序列置于规范类中，其允许特别鉴定适当的基础(chassis)序列(例如，基于在文库中包括多种规范结构的期望)。在文献中描述了如Chothiaet等(本文)描述的抗体氨基酸序列的Kabat编号和结构考虑因素及其对构建抗体结构的规范方面的牵涉。不同类别的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是本领域公知的。关于抗体结构的综述，参见Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory,eds.Harlowet al.,1988。[0203]轻链的CDR3，和特别是重链的CDR3可以构成轻链和重链可变区内抗原结合中最重要的决定簇。在一些抗体构建体中，重链CDR3似乎构成抗原和抗体之间的主要接触区域。仅CDR3变化的体外选择方案可以用于改变抗体的结合特性或确定哪些残基有助于抗原的结合。因此，CDR3通常是抗体结合位点内分子多样性的最大来源。例如，H3可以短至两个氨基酸残基或大于26个氨基酸。[0204]如本文所用，术语“恒定区”和“恒定域”是可互换的并且具有本领域常见的含义。恒定区是抗体部分，例如轻链和/或重链的羧基末端部分，其不直接参与抗体与抗原的结合，但可以表现出各种效应器功能，例如与Fc受体的相互作用。免疫球蛋白分子的恒定区通常相对于免疫球蛋白可变域具有更保守的氨基酸序列。[0205]“结合亲和力”通常是指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另有指示，如本文所用，“结合亲和力”是指内在结合亲和力，其反映结合对的成员(例如，抗体和抗原)之间的1:1相互作用。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可由解离常数(KD)表示。亲和力可以以本领域已知的多种方式测量和/或表达，包括但不限于平衡解离常数(KD)和平衡结合常数(KA)。KD由koff/kon的商计算，而KA由kon/koff的商计算。kon是指例如抗体与抗原的结合速率常数，而koff是指例如抗体与抗原的解离。kon和koff可以通过本领域普通技术人员已知的技术例如定，。

术语“中和”分别指结合配体并防止或降低该配体的生物学效应的抗原结合分子、scFv或抗体。这可以通过例如直接阻断配体上的结合位点或通过结合配体并改变配体通过间接手段(例如配体中的结构或能量改变)结合的能力来完成。在一些实施方案中，该术语还可以表示阻止与其结合的蛋白质发挥生物学功能的抗原结合分子。[0207]术语“靶标”或“抗原”是指能够被抗原结合分子结合的分子或分子的一部分。在某些实施方案中，靶标可以具有一个或多个表位。

[0208]当在竞争相同表位的抗原结合分子的背景中使用时，术语“竞争”意指抗原结合分子之间的竞争，如通过测试的抗原结合分子(例如，抗体或其免疫功能片段)阻止或抑制(例如，减少)参考抗原结合分子与抗原的特异性结合的测定法测定。许多类型的竞争性结合测定法可以用于测定一种抗原结合分子是否与另一种抗原结合，例如：固相直接或间接放射免疫测定法(RIA)、固相直接或间接酶免疫测定法(EIA)、夹心式竞争测定法(Stahliet al.,1983,Methods in Enzymology 9:242-253)；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA

[0206]

或KinExA确

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(Kirklandet al.,1986,J.Immunol.137:3614-3619)，固相直接标记测定法，固相直接标记夹心式测定法(Harlow and Lane,1988,Antibodies,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Press)；使用1-125标记物的固相直接标记RIA(Morelet al.,1988,Molec.Immunol.25:7-15)；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA (Cheung,et al.,1990,Virology 176:546-552)；和直接标记的RIA(Moldenhaueret al.,1990,Scand.J.Immunol.32:77-82)。[0209]如本文所用，术语“表位”是指抗体可以特异性结合的抗原的局部区域。表位可以是例如多肽的连续氨基酸(线性或连续表位)或表位例如可以一起来自多肽的两个或更多个非连续区域(构象、非线性、不连续的或非连续的表位)。在某些实施方案中，可以通过例如NMR光谱法、X射线衍射晶体学研究、ELISA测定法、氢/氘交换与质谱法联用(例如，液相色谱电喷雾质谱法)、基于阵列的寡肽扫描测定法和/或诱变定位(例如，定点诱变定位)测定抗体结合的表位。对于X射线晶体学，可以使用本领域任何已知方法完成结晶(例如GiegéR.et al.,(1994)ActaCrystallogr D BiolCrystallogr 50(Pt 4):339-350；McPherson A (1990)Eur J Biochem 189:1-23；Chayen NE(1997)Structure 5:1269-1274；McPherson A (1976)J BiolChem 251:6300-6303)。抗体:抗原晶体可以使用公知的X射线衍射技术进行研究，并且可以使用计算机软件如X-PLOR(Yale University,1992,由Molecular Simulations,Inc.销售；参见例如Meth Enzymol(1985)第114&115卷,Wyckoff HWet al.编；U.S.2004/0014194)和BUSTER(Bricogne G(1993)ActaCrystallogr D BiolCrystallogr 49(Pt 1):37-60；Bricogne G(1997)Meth Enzymol 276A:361-423,Carter CW编；Roversi Pet al.,(2000)ActaCrystallogr D BiolCrystallogr 56(Pt 10):1316-1323)进行精制。可以使用本领域技术人员已知的任何方法完成诱变定位研究。关于诱变技术，包括丙氨酸扫描诱变技术的描述，参见例如Champe Met al.,(1995)J BiolChem 270:1388-1394和Cunningham BC&Wells JA(1989)Science 244:1081-1085。[0210]如本文所用，术语“标记物”或“标记的”是指掺入可检测标志物，例如通过掺入放射性标记的氨基酸或附着于生物素部分的多肽，其可以通过标记的抗生物素蛋白(例如，含有荧光标志物或酶活性的链霉抗生物素蛋白，所述荧光标志物或酶活性可以通过光学或比色法检测)检测。在某些实施方案中，标记物或标志物也可以是治疗性的。标记多肽和糖蛋白的各种方法是本领域已知的并且可以使用。[0211]治疗方法

[0212]使用过继性免疫疗法，可以(i)从患者中取出天然T细胞，(ii)进行遗传工程化改造以表达与至少一种肿瘤抗原结合的嵌合抗原受体(CAR)，(iii)离体扩增成较大的工程化T细胞群体，以及(iv)再导入患者中。参见例如美国专利No.7,741,465和6,319,494,Eshhar et al.,(Cancer Immunol,同上)；Krause et al.,(同上)；Finney et al.,(同上)。在将工程化的T细胞再导入患者中后，它们介导针对表达肿瘤抗原的细胞的免疫应答。参见例如Krauseet al.,J.Exp.Med.,Volume 188,No.4,1998(619–626)。该免疫应答包括T细胞分泌IL-2和其他细胞因子、识别肿瘤抗原的T细胞的克隆扩增和T细胞介导的靶阳性细胞的特异性杀伤。参见Hombachet al.,Journal of Immun.167:6123–6131(2001)。[0213]如本文所用，术语“淋巴细胞”包括天然杀伤(NK)细胞、T细胞或B细胞。NK细胞是一类细胞毒性(细胞毒性的)淋巴细胞，其代表固有免疫系统的主要成分。NK细胞排斥肿瘤和

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被病毒感染的细胞。它通过细胞凋亡或程序性细胞死亡的过程起作用。它们称为“天然杀手”，因为它们不需要活化以杀死细胞。T细胞在细胞介导的免疫中起主要作用(无抗体参与)。它的T细胞受体(TCR)将其自身与其他淋巴细胞类型区别开来。胸腺(免疫系统的特化器官)主要负责T细胞的成熟。有六类T细胞，即：辅助T细胞(例如，CD4+细胞)、细胞毒性T细胞(也称为TC，细胞毒性T淋巴细胞，CTL，T-杀伤细胞，细胞溶解性T细胞，CD8+T细胞或杀伤性T细胞)，记忆T细胞((i)干细胞记忆TSCM细胞，如幼稚细胞，是CD45RO-，CCR7+，CD45RA+，CD62L+(L-选择蛋白)，CD27+，CD28+和IL-7Rα+，但它们还表达大量的CD95，IL-2Rβ，CXCR3和LFA-1，并显示与记忆细胞不同的许多功能属性)；(ii)中枢记忆TCM细胞表达L-选择蛋白和CCR7，它们分泌IL-2，但不分泌IFNγ或IL-4，和(iii)然而，效应器记忆TEM细胞不表达L-选择蛋白或CCR7但产生效应器细胞因子如IFNγ和IL-4)，调节性T细胞(Tregs，抑制性T细胞或CD4+CD25+调节性T细胞)，自然杀伤T细胞(NKT)和Gamma Delta T细胞。另一方面，B细胞在体液免疫中起主要作用(具有抗体参与)。它产生抗体和抗原并发挥抗原呈递细胞(APC)的作用，并在通过抗原相互作用活化后转变为记忆B细胞。在哺乳动物中，未成熟的B细胞在骨髓中形成，其名称来源于骨髓。[0214]术语“遗传工程化”或“工程化”是指修饰细胞基因组的方法，包括但不限于删除编码区或非编码区或其部分或插入编码区或其一部分。在一些实施方案中，修饰的细胞是淋巴细胞，例如T细胞，其可以从患者或供体获得。可以修饰细胞以表达外源构建体，诸如例如嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)，其掺入细胞的基因组中。[0215]“免疫应答”是指免疫系统细胞(例如，T淋巴细胞，B淋巴细胞，自然杀伤(NK)细胞，巨噬细胞，嗜酸性粒细胞，肥大细胞，树突细胞和中性粒细胞)和由任何这些细胞或肝脏产生的可溶性大分子(包括抗体，细胞因子和补体)的作用，其导致选择性靶向，结合，损害，破坏和/或从脊椎动物体消除侵入的病原体、受病原体感染的细胞或组织、癌性或其他异常细胞，或在自身免疫或病理性炎症的情况下，正常人细胞或组织。[0216]术语“免疫疗法”是指通过包括诱导，增强，抑制或以其他方式改变免疫应答的方法治疗患有疾病、或有风险染上疾病或遭受疾病复发的受试者。免疫疗法的实例包括但不限于T细胞疗法。T细胞疗法可以包括过继性T细胞疗法，肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)免疫疗法，自体细胞疗法，工程化自体细胞疗法(eACT)和同种异体T细胞移植。然而，本领域技术人员将认识到，本文公开的调理方法将增强任何移植的T细胞疗法的有效性。T细胞疗法的实例描述于美国专利公开Nos.2014/0154228和2002/0006409,美国专利No.5,728,388,和国际公开No.WO 2008/081035。

[0217]免疫疗法的T细胞可以来自本领域已知的任何来源。例如，可以在体外从造血干细胞群体分化T细胞，或者可以从受试者获得T细胞。可以从例如外周血单个核细胞(PBMC)，骨髓，淋巴结组织，脐带血，胸腺组织，来自感染部位的组织，腹水，胸腔积液，脾组织和肿瘤中获得T细胞。另外，T细胞可以源自本领域可获得的一种或多种T细胞系。T细胞还可以使用本领域技术人员已知的多种技术，例如FICOLLTM分离和/或单采血液成分术(apheresis)从受试者采集的血液单位获得。分离T细胞以用于T细胞疗法的其他方法公开在美国专利公开No.2013/0287748中，其通过引用整体并入本文。[0218]术语“工程化自体细胞疗法”，可以缩写为“eACTTM”，也称为过继性细胞转移，是将患者自身的T细胞收集并随后进行遗传改变以识别和靶向一种或多种特定肿瘤细胞或恶性

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的细胞表面上表达的一种或多种抗原的过程。可以工程化改造T细胞以表达例如嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)。将CAR阳性(+)T细胞工程化改造以表达与包含至少一个共刺激域和至少一个活化域的胞内信号传导部分连接的对特定的肿瘤抗原具有特异性的胞外单链可变片段(scFv)。共刺激域可以源自(或对应于)例如CD28，并且活化域可以源自(或对应于)例如CD3-zeta。在某些实施方案中，将CAR设计为具有两个，三个，四个或更多个共刺激域。

[0219]术语“自体的”是指源自后来接受其再导入的同一个体的任何材料。例如，本文所述的工程化自体细胞疗法(eACTTM)方法涉及从患者收集淋巴细胞，然后将其工程化改造为表达例如CAR构建体，然后将其施用回到同一患者。[0220]术语“同种异体”是指源自一个个体的任何材料，然后将其导入相同物种的另一个体，例如同种异体T细胞移植。[0221]在一些方面，本发明因此包括治疗或预防患者中与不希望的和/或升高的CLL-1水平相关的状况的方法，包括对有此需要的患者施用有效量的至少一种分离的本文公开的抗原结合分子、CAR或TCR。

[0222]提供了用于治疗包括癌症在内的疾病或病症的方法。在一些实施方案中，本发明涉及在受试者中创建T细胞介导的免疫应答，包括对受试者施用有效量的本申请的工程化免疫细胞。在一些实施方案中，T细胞介导的免疫应答针对一种或多种靶细胞。在一些实施方案中，工程化免疫细胞包含嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)。在一些实施方案中，靶细胞是肿瘤细胞。在一些方面，本发明包括用于治疗或预防恶性的方法，所述方法包括对有此需要的受试者施用有效量的至少一种本文所述的分离的抗原结合分子。在一些方面，本发明包括治疗或预防恶性的方法，所述方法包括对有需要的受试者施用有效量的至少一种免疫细胞，其中所述免疫细胞包含如本文中描述的至少一种嵌合抗原受体、T细胞受体和/或分离的抗原结合分子。[0223]在一些方面，本发明包括药物组合物，其包含至少一种如本文所述的抗原结合分子和药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，药物组合物还包含另外的活性剂。[0224]本发明的抗原结合分子、CAR、TCR、免疫细胞等可以用于治疗骨髓疾病，包括但不限于急性髓样白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、慢性粒单核细胞白血病(cCMML)、幼年型髓单核细胞白血病、非典型慢性髓样白血病、急性前髓细胞性白血病(APL)、急性单核母细胞性白血病、急性红细胞白血病、急性巨核母细胞性白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增生性疾病、髓样新生物、髓样肉瘤、母细胞性浆细胞样树状突细胞新生物(BPDCN)或其组合。其他疾病包括炎性和/或自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎、银屑病、变态反应、哮喘、克罗恩病、IBD、IBS、纤维肌痛、肥大细胞增多症和乳糜泻。[0225]应当理解，CAR+/CAR-T+/TCR+细胞的靶剂量的范围可以为1x106-2x1010个细胞/kg，更优选2x106个细胞/kg。应当理解，高于和低于该范围的剂量可以适合于某些受试者，并且适当的剂量水平可以由健康护理提供者根据需要确定。另外，可以根据本发明提供多剂量的细胞。

[0226]还提供了用于减小受试者中肿瘤大小的方法，包括对受试者施用本发明的工程化细胞，其中细胞包含嵌合抗原受体、T细胞受体或基于T细胞受体的嵌合抗原受体，其包含结合肿瘤上的抗原的抗原结合分子。在一些实施方案中，受试者患有实体瘤或血液恶性，例如

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淋巴瘤或白血病。在一些实施方案中，将工程化细胞递送至肿瘤床。在一些实施方案中，癌症存在于受试者的骨髓中。在一些实施方案中，工程化细胞是自体T细胞。在一些实施方案中，工程化细胞是同种异体T细胞。在一些实施方案中，工程化细胞是异源T细胞。在一些实施方案中，在体内转染或转导本申请的工程化细胞。在其他实施方案中，离体转染或转导工程化细胞。如本文所用，术语“体外细胞”是指离体培养的任何细胞。特别地，体外细胞可以包括T细胞。

[0227]该方法可以进一步包括施用一种或多种化疗剂。在某些实施方案中，化疗剂是淋巴消减(预调理)化疗剂。有益的预调理治疗方案以及相关的有益生物标志物描述于美国临时专利申请62/262,143和62/167,750，其通过引用整体并入本文。这些描述了例如调理需要T细胞疗法的患者的方法，包括对患者施用规定的有益剂量的环磷酰胺(200mg/m2/天-2000mg/m2/天)和规定剂量的氟达拉滨(20mg/m2/天-900mg/m2/天)。优选的剂量方案涉及治疗患者，包括每天对患者施用约500mg/m2/天的环磷酰胺和约60mg/m2/天的氟达拉滨，持续3天，然后对患者施用治疗有效量的工程化T细胞。[0228]在其他实施方案中，抗原结合分子，转导的(或以其他方式工程化的)细胞(例如CAR或TCR)和化疗剂各自以有效治疗受试者的疾病或状况的量施用。[0229]在某些实施方案中，包含本文公开的表达CAR的免疫效应细胞的组合物可以与任何数目的化疗剂联合施用。化疗剂的实例包括烷化剂类(alkylating agents)，诸如塞替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclophosphamide)(CYTOXANTM)；磺酸烷基酯类(alkyl sulfonates)，诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类(aziridines)，诸如苯佐替派(benzodepa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedepa)和乌瑞替派(uredepa)；乙撑亚胺类(ethylenimines)和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙撑蜜胺(triethylenemelamine)、三乙撑磷酰胺(trietylenephosphoramide)、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphaoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylolomelamine resume)；氮芥类(nitrogen mustards)，诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝脲类(nitrosoureas)，诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)；抗生素类，诸如阿克拉霉素(aclacinomycin)、放线菌素(actinomycin)、氨茴霉素(anthramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、加利车霉素(calicheamicin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-二氮-5-氧-L-正亮氨酸、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素类(mitomycins)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素

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(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物类，诸如甲氨蝶呤、和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶酰三谷氨酸(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)、5-FU；雄激素类，诸如卡鲁睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、表硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺类，诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(folinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defosfamide)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼(ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；

雷佐生(razoxane)；西索菲兰

(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派(thiotepa)；类紫杉醇(taxoids)，例如帕利他塞(paclitaxel)(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb)和多西他塞(doxetaxel)(

Rhone-Poulenc

Rorer)；苯丁酸氮芥(chlorambucil)；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤(thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；铂类似物，诸如顺铂(cisplatin)和卡铂(carboplatin)；长春碱(vinblastine)；铂；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；丝裂霉素C；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱；长春瑞滨；诺维本(navelbine)；能灭瘤(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；xeloda；伊本膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；维A酸(retinoic acid)衍生物，如TargretinTM(贝沙罗汀(bexarotene))、PanretinTM、(alitretinoin)；ONTAKTM(denileukindiftitox)；esperamicins；卡培他滨(capecitabine)；和上述任何物质的药物可接受盐、酸或衍生物。此定义中还包括作用为调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，诸如抗雌激素，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、芳香酶抑制性4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、keoxifene、LY117018、奥那司酮(onapristone)和托瑞米芬

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(toremifene)(Fareston)；和抗雄激素诸如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)、和戈舍瑞林(goserelin)；和上述任何物质的药物可接受盐、酸或衍生物。在适当的情况下也施用化疗剂的组合，包括但不限于CHOP，即环磷酰胺松

[0230]

多柔比星(羟基多柔比星)、长春新碱和泼尼

在一些实施方案中，在施用工程化细胞、多肽或核酸同时或之后一周内施用化疗剂。在其他实施方案中，在施用工程化细胞、多肽或核酸后1至4周或1周至1个月，1周至2个月，1周至3个月，1周至6个月，1周至9个月或1周至12个月施用化疗剂。在其他实施方案中，化疗剂在施用细胞、多肽或核酸之前至少1个月施用。在一些实施方案中，该方法还包括施用两种或更多种化疗剂。

[0231]多种另外的治疗剂可以与本文所述的组合物联合使用。例如，潜在有用的另外的治疗剂包括PD-1抑制剂，例如纳武单抗(nivolumab)(pembrolizumab)

派姆单抗

派姆单抗、阿巴伏单抗(pidilizumab)和阿特珠单抗

(Atezolizumab)。

[0232]适合于与本发明组合使用的另外的治疗剂包括但不限于伊布替尼(ibrutinib)

奥法木单抗(ofatumumab)贝伐单抗(bevacizumab)trastuzumabemtansine西妥昔单抗(cetuximab)

利妥昔单抗(rituximab)曲妥珠单抗(trastuzumab)

伊马替尼(imatinib)帕尼单抗(panitumumab)

卡妥索单抗(Catumaxomab)、替伊莫单抗(ibritumomab)、奥法木单抗、托西

莫单抗(tositumomab)、本妥昔单抗(brentuximab)、阿仑单抗(alemtuzumab)、吉妥珠单抗

(gemtuzumab)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、凡德他尼(vandetanib)、阿法替尼afatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、来那替尼(neratinib)、阿昔替尼(axitinib)、马赛替尼(masitinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、toceranib、来他替尼(lestaurtinib)、阿昔替尼(axitinib)、西地尼布(cediranib)、乐伐替尼(lenvatinib)、尼达尼布(nintedanib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瑞格非尼(regorafenib)、司马沙尼(semaxanib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、tivozanib、toceranib、凡德他尼、恩曲替尼(entrectinib)、卡博替尼(cabozantinib)、伊马替尼(imatinib)、达沙替尼(dasatinib)、尼洛替尼(nilotinib)、帕纳替尼(ponatinib)、雷多替尼(radotinib)、博舒替尼(bosutinib)、来他替尼(lestaurtinib)、鲁索替尼(ruxolitinib)、pacritinib、考比替尼(cobimetinib)、司美替尼(selumetinib)、曲美替尼(trametinib)、binimetinib、阿雷替尼(alectinib)、色瑞替尼(ceritinib)、克唑替尼(crizotinib)、阿柏西普(aflibercept)、adipotide、地尼白介素(denileukindiftitox)、mTOR抑制剂诸如依维莫司(Everolimus)和西罗莫司(Temsirolimus)、hedgehog抑制剂诸如sonidegiband vismodegib、CDK抑制剂诸如CDK抑制剂(帕博西尼(palbociclib))。[0233]在另外的实施方案中，可以与消炎剂一起施用包含含有CAR的免疫细胞的组合物。

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消炎剂或药物包括但不限于类固醇和糖皮质激素(包括倍他米松(betamethasone)、布地奈德(budesonide)、地塞米松(dexamethasone)、乙酸氢化可的松、氢化可的松、氢化可的松、甲泼尼龙(methylprednisolone)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、曲安西龙(triamcinolone))、非类固醇类消炎药(NSAIDS)，包括阿司匹林(aspirin)、布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、甲氨蝶呤、柳氮磺胺吡啶、来氟米特(leflunomide)、抗TNF药物、环磷酰胺和麦考酚酯(mycophenolate)。示例性的NSAID包括布洛芬、萘普生、萘普生钠、Cox-2抑制剂和唾液酸化物(sialylate)。示例性镇痛剂包括扑热息痛(acetaminophen)、羟考酮(oxycodone)、曲马多或盐酸丙氧芬(tramadol of proporxyphene hydrochloride)。示例性糖皮质激素包括可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙或泼尼松。示例性生物反应调节剂包括针对细胞表面标志物(例如CD4，CD5等)的分子、细胞因子抑制剂如TNF拮抗剂，(例如依那西普(etanercept)

阿达木单抗(adalimumab)

和英夫利昔单抗(infliximab)

生物反应调节剂包括单克隆抗体以及重组形式的分子。示例性的DMARD

包括硫唑嘌呤(azathioprine)、环磷酰胺、环孢菌素、甲氨蝶呤、青霉胺、来氟米特、柳氮磺胺吡啶、羟氯喹、金(口服(金诺芬(auranofin))和肌内)和米诺环素(minocycline)。[0234]在某些实施方案中，与细胞因子联合施用本文所述的组合物。如本文所用，“细胞因子”意指由一种细胞群释放的、作为细胞间介质对另一种细胞起作用的蛋白质。细胞因子的实例是淋巴因子、单核因子和传统的多肽激素。细胞因子中包括生长激素，如人生长激素，N-甲硫氨酰人生长激素和牛生长激素；甲状旁腺激素；甲状腺素；胰岛素；胰岛素原；松弛素；松弛素原；糖蛋白激素，如促卵泡激素(FSH)、促甲状腺激素(TSH)和黄体生成素(LH)；肝生长因子(HGF)；成纤维细胞生长因子(FGF)；催乳素；胎盘催乳激素；缪勒管抑制物质(mullerian-inhibiting substance)；小鼠促性腺激素相关肽；抑制素；激活素；血管内皮生长因子；整合蛋白；血小板生成素(TPO)；神经生长因子(NGF)如NGF-beta；血小板生长因子；转化生长因子(TGF)如TGF-alpha和TGF-beta；胰岛素样生长因子-I和-II；促红细胞生成素(EPO)；骨诱导因子；干扰素如干扰素-α，β和-γ；集落刺激因子(CSFs)，如巨噬细胞-CSF(M-CSF)；粒细胞-巨噬细胞-CSF(GM-CSF)；和粒细胞-CSF(G-CSF)；白细胞介素(IL)，如IL-1,IL-1alpha,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-11,IL-12；IL-15，肿瘤坏死因子如TNF-alpha或TNF-beta；和其他多肽因子，包括LIF和kit配体(KL)。如本文所用，术语细胞因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质，以及天然序列细胞因子的生物活性等同物。[0235]在一些方面，本发明包括以小于100pM的Kd结合CLL-1的抗原结合分子。在一些实施方案中，抗原结合分子以小于10pM的Kd结合。在其他实施方案中，抗原结合分子以小于5pM的Kd结合。[0236]制备方法

[0237]可以使用多种已知技术来制备根据本发明的多核苷酸、多肽、载体、抗原结合分子、免疫细胞、组合物等。

[0238]在本文所述的免疫细胞的体外操作或遗传修饰之前，可以从受试者获得细胞。在一些实施方案中，免疫细胞包含T细胞。可以从许多来源获得T细胞，包括外周血单个核细胞(PBMC)、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾组

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织和肿瘤。在某些实施方案中，可以使用技术人员已知的许多技术，例如FICOLLTM分离从受试者收集的血液单位获得T细胞。优选地，可以通过单采血液成分术从个体的循环血液中获得细胞。单采血液成分产品通常含有淋巴细胞，包括T细胞、单核细胞、粒细胞、B细胞、其他有核白细胞、红细胞和血小板。在某些实施方案中，可以清洗通过单采血液成分术收集的细胞以除去血浆部分，并将其置于合适的缓冲液或培养基中用于后续处理。可以用PBS清洗细胞。如应理解，可以使用清洗步骤，例如通过使用半自动流过离心机-例如CobeTM 2991细胞处理器、Baxter CytoMateTM等。清洗后，可以将细胞重悬于多种生物相容性缓冲液或含有或不含缓冲液的其它盐水溶液中。在某些实施方案中，可以除去单采血液成分样品的不期望的组分。

[0239]在某些实施方案中，通过裂解红细胞并且例如通过经由PERCOLLTM梯度离心消减单核细胞从PBMC分离T细胞。可以通过本领域已知的阳性或阴性选择技术进一步分离特定的T细胞亚群，例如CD28+、CD4+、CD8+、CD45RA+、和CD45RO+T细胞。例如，通过阴性选择富集T细胞群体可以用针对阴性选择细胞独特的表面标志物的抗体组合来实现。本文使用的一种方法是通过阴性磁免疫粘附或流式细胞术进行细胞分选和/或选择，所述阴性磁免疫粘附或流式细胞术使用针对阴性选择的细胞上存在的细胞表面标志物的单克隆抗体混合物。例如，为了通过阴性选择富集CD4+细胞，单克隆抗体混合物通常包括针对CD14、CD20、CD11b、CD16、HLA-DR和CD8的抗体。流式细胞术和细胞分选也可以用于分离本发明中使用的感兴趣的细胞群体。

[0240]可以使用如本文所述的方法将PBMC直接用于用免疫细胞(例如CAR或TCR)的遗传修饰。在某些实施方案中，在分离PBMC后，可以进一步分离T淋巴细胞，并且可以在遗传修饰和/或扩增之前或之后将细胞毒性和辅助性T淋巴细胞两者分选成幼稚、记忆和效应T细胞亚群。

[0241]在一些实施方案中，通过鉴定与CD8+细胞的这些类型中的每种相关的细胞表面抗原将CD8+细胞进一步分选成幼稚、中枢记忆和效应细胞。在一些实施方案中，中枢记忆T细胞的表型标志物的表达包括CD45RO、CD62L、CCR7、CD28、CD3和CD127，并且对于颗粒酶B是阴性的。在一些实施方案中，中枢记忆T细胞是CD45RO+、CD62L+、CD8+T细胞。在一些实施方案中，效应T细胞对CD62L、CCR7、CD28和CD127是阴性的，并且对于颗粒酶B和穿孔蛋白是阳性的。在某些实施方案中，将CD4+T细胞进一步分选成亚群。例如，可以通过鉴定具有细胞表面抗原的细胞群将CD4+T辅助细胞分选成幼稚、中枢记忆和效应细胞。

[0242]可以在使用已知方法分离后对免疫细胞如T细胞进行遗传修饰，或者可以在进行遗传修饰之前在体外活化和扩增(或在祖细胞的情况下分化)免疫细胞。在另一个实施方案中，用本文所述的嵌合抗原受体遗传修饰(例如，用包含一种或多种编码CAR的核苷酸序列的病毒载体转导)免疫细胞如T细胞，然后体外活化和/或扩增。用于活化和扩增T细胞的方法是本领域已知的，并且描述于例如美国专利No.6,905,874；美国专利No.6,867,041；美国专利No.6,797,514；和PCT WO2012/079000，其内容通过引用整体并入本文。通常，此类方法包括在具有适当细胞因子如IL-2的培养基中使PBMC或分离的T细胞与通常附着于珠或其他表面的刺激分子和共刺激分子如抗CD3和抗CD28抗体接触。附着于相同珠的抗CD3和抗CD28抗体充当“替代”抗原呈递细胞(APC)。一个实例是

系统，一种用于人T细胞生

理活化的CD3/CD28活化剂/刺激剂系统。在其他实施方案中，可以使用方法，诸如美国专利

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No.6,040,177；美国专利No.5,827,642；和WO2012129514(其内容通过引用整体并入本文)中描述的那些方法活化并刺激T细胞以与饲养细胞和适当的抗体和细胞因子一起增殖。[0243]用于制备本发明的构建体和工程化免疫细胞的某些方法描述于PCT申请PCT/US15/14520，其内容通过引用整体并入本文。制备构建体和细胞的其他方法可以参见美国临时专利申请no.62/244036，其内容通过引用整体并入本文。[0244]应当理解，PBMC可以进一步包括其他细胞毒性淋巴细胞，如NK细胞或NKT细胞。可以将携带如本文公开的嵌合受体的编码序列的表达载体导入人供体T细胞、NK细胞或NKT细胞群体。在使用抗CD3抗体和IL-2或如本文中别处描述的本领域中已知的其它方法的细胞活化外，可以使用流式细胞术分选携带表达载体的成功转导的T细胞以分离CD3阳性T细胞，然后进一步繁殖以增加这些CAR表达T细胞的数目。标准方法用于冷冻保存表达CAR的T细胞，用于储存和/或制备以用于人受试者。在一个实施方案中，在不存在非人动物衍生产物如胎牛血清和胎牛血清的情况下进行T细胞的体外转导、培养和/或扩增。[0245]为了克隆多核苷酸，可以将载体导入宿主细胞(分离的宿主细胞)中以允许载体自身复制，从而扩增其中包含的多核苷酸的拷贝。克隆载体可以含有序列组分，通常包括但不限于复制起点、启动子序列、转录起始序列、增强子序列和选择标志物。这些元件可以由本领域普通技术人员适当选择。例如，可以选择复制起点以促进载体在宿主细胞中的自主复制。

[0246]在某些实施方案中，本公开提供了含有本文提供的载体的分离的宿主细胞。含有载体的宿主细胞可以用于表达或克隆载体中含有的多核苷酸。合适的宿主细胞可以包括但不限于原核细胞、真菌细胞、酵母细胞或高等真核细胞如哺乳动物细胞。用于此目的的合适的原核细胞包括但不限于真细菌，如革兰氏阴性或革兰氏阳性生物，例如肠杆菌科(Enterobactehaceae)，例如埃希氏菌属(Escherichia)，例如大肠杆菌(E.coli)，肠杆菌属(Enterobacter)，欧文氏菌属(Erwinia)，克雷伯氏菌属(Klebsiella)，变形杆菌属(Proteus)，沙门氏菌属(Salmonella)，例如鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)，沙雷氏菌属(Serratia)，例如粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescans)，和志贺氏菌属(Shigella)，以及芽孢杆菌属(Bacilli)诸如枯草芽孢杆菌(B.subtilis)和地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)，假单胞菌属(Pseudomonas)诸如铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)和链霉菌属(Streptomyces)。

[0247]可以使用本领域已知的任何合适的方法将载体导入宿主细胞中，包括但不限于DEAE-葡聚糖介导的递送、磷酸钙沉淀法、阳离子脂质介导的递送、脂质体介导的转染、电穿孔、微粒轰击、受体介导的基因递送、由聚赖氨酸、组蛋白、壳聚糖和肽介导的递送。用于转染和转化细胞以表达感兴趣的载体的标准方法是本领域公知的。在另一个实施方案中，不同表达载体的混合物可以用于遗传修饰免疫效应细胞的供体群体，其中每个载体编码如本文公开的不同CAR。得到的经转导的免疫效应细胞形成混合的工程化细胞群体，其中一定比例的工程化细胞表达超过一种不同的CAR。[0248]在一个实施方案中，本发明提供了贮存表达靶向CLL-1蛋白的CAR或TCR的遗传工程化细胞的方法。这涉及冷冻保存免疫细胞，使得细胞在解冻后保持存活力。可以通过本领域已知的方法冷冻保存表达CAR的免疫细胞的级份，以提供此类细胞的永久来源，用于将来治疗患有恶性的患者。在需要时，可以将冷冻保存的经转化免疫的细胞解冻，培养和扩增以

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获得更多此类细胞。[0249]如本文所用，“冷冻保存”是指通过冷却至零下温度例如(通常)77开尔文(Kelvin)或-196℃(液氮的沸点)来保存细胞。低温保护剂通常在零下温度下使用，以防止细胞因低温冷冻或升温至室温而受损。冷冻保护剂和最佳冷却速率可以防止细胞损伤。可以根据本发明使用的冷冻保护剂包括但不限于二甲亚砜(DMSO)(Lovelock&Bishop,Nature(1959)；183:1394-1395；Ashwood-Smith,Nature(1961)；190:1204-1205)、甘油、聚乙烯吡咯烷(Rinfret,Ann.N.Y.Acad.Sci.(1960)；85:576)和聚乙二醇(Sloviter&Ravdin,Nature(1962)；196:48)。优选的冷却速率为1°-3℃/分钟。[0250]术语“基本上纯的”用于指示给定组分以高水平存在。期望地，组分是组合物中存在的主要组分。优选地，它以超过30％、超过50％、超过75％、超过90％、或甚至超过95％的水平存在，所述水平相对于考虑的总组成基于干重/干重确定。在非常高的水平(例如，超过90％、超过95％或超过99％的水平)，组分可以视为“纯形式”。本发明的生物活性物质(CAR、TCR、分离的多肽、分离的核酸分子、抗原结合分子、部分)可以以基本上不含物质在其它情况下可以结合的一种或多种污染物的形式。当组合物基本上不含给定的污染物时，污染物将处于低水平(例如，基于上文阐述的干重/干重，小于10％、小于5％或小于1％的水平)。[0251]在一些实施方案中，如下配制细胞：通过首先从其培养基中收获它们，然后将细胞清洗并以治疗有效量浓缩在适于施用的介质和容器系统(“药学上可接受的”载体)中。合适的输注介质可以是任何等张介质制剂，通常是生理盐水、NormosolTM R(Abbott)或Plasma-LyteTM A(Baxter)，但也可以使用5％右旋糖水溶液或林格氏乳酸盐。输注介质可以补充有人血清白蛋白。

[0252]组合物中细胞的期望的处理量通常是至少2个细胞(例如，至少1个CD8+中央记忆T细胞和至少1个CD4+辅助T细胞亚组)或者更通常是大于102个细胞，并且高达106，高达并包括108或109个细胞，并且可以超过1010个细胞。细胞数目取决于组合物意图的期望用途，以及其中包含的细胞类型。期望细胞的密度通常大于106个细胞/ml，并且通常大于107个细胞/ml，通常为108个细胞/ml或更大。可以将临床相关数目的免疫细胞分配到累积等于或超过105、106、107、108、109、1010、1011或1012个细胞的多次输注。在本发明的一些方面，特别由于所有输注的细胞重定向到特定的靶抗原(CLL-1)，可以施用106/千克(每个患者106-1011)的较低数目的细胞。可以在这些范围内的剂量下多次施用CAR治疗。细胞可以与经历疗法的患者是自体的、同种异体的或异源的。

[0253]表达CAR的本发明的细胞群体可以单独施用，或作为药物组合物与稀释剂和/或与其他组分如IL-2或其他细胞因子或细胞群体组合施用。本发明的药物组合物可以包含与一种或多种药学上或生理学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合的如本文所述的表达CAR或TCR的细胞群体，如T细胞。此类组合物可以包含缓冲液，例如中性缓冲盐水、磷酸盐缓冲盐水等；碳水化合物，如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖、甘露醇；蛋白质；多肽或氨基酸如甘氨酸；抗氧化剂；螯合剂如EDTA或谷胱甘肽；佐剂(例如氢氧化铝)；和防腐剂。优选配制本发明的组合物用于静脉内施用。[0254]药物组合物(溶液，悬浮液等)可以包括以下一种或多种：无菌稀释剂，例如注射用水、盐水溶液，优选生理盐水、林格氏溶液、等张氯化钠、不挥发油如合成的甘油单酯或甘油二酯(其可以充当溶剂或悬浮介质)、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他溶剂；抗细菌剂如苯甲

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醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂如乙二胺四乙酸；缓冲剂如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐和用于调节张力的试剂如氯化钠或右旋糖。胃肠外制剂可以封装在由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。可注射药物组合物优选是无菌的。

[0255]应当理解，可以通过用自杀基因转导免疫细胞(含有一种或多种CAR或TCR)使不利事件最小化。还可以期望将诱导型“开启”或“加速器”开关掺入免疫细胞中。合适的技术包括在用本发明的CAR构建体转导细胞之前、之后或同时使用诱导型胱天蛋白酶-9(美国申请2011/0286980)或胸苷激酶。用于引入自杀基因和/或“开启”开关上的其他方法包括TALENS、锌指、RNAi、siRNA、shRNA、反义技术和本领域已知的其他技术。[0256]根据本发明，可以本文并入控制开关技术的另外的开启-关闭或其它类型。这些技术可以采用二聚化域和此类域二聚化的任选活化剂的使用。这些技术包括例如Wu et al.,Science 2014 350(6258)(其内容通过引用整体并入本文)描述的那些技术，其利用某些细胞中的FKBP/Rapalog二聚化系统。另外的二聚化技术描述于例如Fegan et al.Chem.Rev.2010,110,3315–3336以及美国专利No.5,830,462；5,834,266；5,869,337；和6,165,787，其内容也通过引用整体并入本文。另外的二聚化对可以包括环孢菌素-A/亲环蛋白、受体、雌激素/雌激素受体(任选使用他莫昔芬)、糖皮质激素/糖皮质激素受体、四环素/四环素受体、维生素D/维生素D受体。二聚化技术的其他实例可以参见例如WO 2014/127261,WO 2015/090229,US 2014/0286987,US2015/0266973,US2016/0046700,美国专利No.8,486,693,US 2014/0171649,和US2012/0130076，其内容通过引用整体并入本文。[0257]应当理解，本文的描述仅是示例性和说明性的，并不是对要求保护的本发明的限制。在本申请中，除非另外特别说明，否则单数的使用包括复数。[0258]本文使用的章节标题仅用于组织目的，不应解释为限制所描述的主题。本申请中引用的所有文件或文件的部分，包括但不限于专利，专利申请，文章，书籍和论文，出于任何目的通过引用明确地整体并入本文。如根据本公开所使用的，除非另有说明，否则以下术语应当理解为具有以下含义：[0259]在本申请中，除非另有说明，否则“或”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括”的使用以及其他形式不是限制性的。此外，除非另外明确说明，否则诸如“元件”或“组件”的术语涵盖包含一个单元的元件和组件和包含超过一个子单元的元件和组件。[0260]术语“CLL-1活性”包括CLL-1的任何生物学效应。在某些实施方案中，CLL-1活性包括CLL-1与底物或受体相互作用或结合的能力。[0261]术语“多核苷酸”、“核苷酸”或“核酸”包括单链和双链核苷酸聚合物两者。这优选包括如本文所定义的分离的多核苷酸、核苷酸或核酸。包含多核苷酸的核苷酸可以是核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸或任一类型核苷酸的修饰形式。所述修饰包括碱基修饰，例如溴尿苷和肌苷衍生物、核糖修饰如2',3'-二脱氧核糖和核苷酸间连接修饰，如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酯，苯胺硫代磷酸酯(phosphoroanilothioate)、苯胺磷酸酯(phosphoranilidate)、和氨基磷酸酯。[0262]术语“寡核苷酸”是指包含200个或更少核苷酸的多核苷酸。寡核苷酸可以是单链或双链的，例如用于构建突变体基因。寡核苷酸可以是有义或反义寡核苷酸。寡核苷酸可以包括标记物，包括放射性标记物、荧光标记物、半抗原或抗原标记物，用于检测测定法。寡核

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苷酸可以用作例如PCR引物、克隆引物或杂交探针。[0263]术语“控制序列”是指可以影响与其连接的编码序列的表达和加工的多核苷酸序列。此类控制序列的性质可以取决于宿主生物体。在具体的实施方案中，原核生物的控制序列可以包括启动子、核糖体结合位点和转录终止序列。例如，真核生物的控制序列可以包括启动子，其包含转录因子、转录增强子序列和转录终止序列的一个或多个识别位点。“控制序列”可以包含前导序列(信号肽)和/或融合伴侣序列。[0264]在一些实施方案中，本发明的多核苷酸编码CAR或TCR，还可以包含前导序列或肽(本文也称为“信号肽”)。在某些实施方案中，前导肽包含与氨基酸序列MALPVTALLLPLALLLHAARP(SEQ ID NO:144)至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，前导肽包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列。[0265]如本文所用，“可操作地连接”是指应用该术语的组分处于允许它们在合适条件下实施其固有功能的关系。[0266]术语“载体”意指用于将蛋白质编码信息转移到宿主细胞中的任何分子或实体(例如，核酸、质粒、噬菌体或病毒)。术语“表达载体”或“表达构建体”是指适合转化宿主细胞，并含有(与宿主细胞结合)指导和/或控制一种或多种与其可操作连接的异源编码区表达的核酸序列的载体。表达构建体可以包括但不限于影响或控制转录、翻译，并且(若存在内含子)影响与其可操作地连接的编码区的RNA剪接的序列。[0267]术语“宿主细胞”是指已经用核酸序列转化或能够用核酸序列转化并由此表达感兴趣的基因的细胞。该术语包括亲本细胞的后代，无论后代是否与原始亲本细胞在形态学上或遗传构成上相同，只要存在感兴趣的基因即可。[0268]术语“转化”是指细胞遗传特征的变化，并且当将细胞修饰为含有新的DNA或RNA时它已被转化。例如，通过转染、转导或其他技术导入新的遗传物质转化细胞，其中它从其天然状态被遗传修饰。在转染或转导后，转化DNA可以通过物理整合到细胞的染色体中而与细胞的DNA重组，或者可以作为附加型元件瞬时维持而不被复制，或者可以作为质粒独立地复制。当转化DNA随细胞分裂而复制时，认为细胞已经“稳定转化”。[0269]术语“转染”是指细胞摄取外来或外源DNA。许多转染技术是本领域公知的并在本文中公开。参见例如Grahamet al.,1973,Virology 52:456；Sambrooket al.,2001,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,同上；Daviset al.,1986,Basic Methods in Molecular Biology,Elsevier；Chuet al.,1981,Gene13:197。[0270]术语“转导”是指通过病毒载体将外来DNA导入细胞的过程。参见Jones et al.,(1998).Genetics:principles and analysis.Boston:Jones&Bartlett Publ。[0271]术语“多肽”或“蛋白质”是指具有蛋白质的氨基酸序列的大分子，其包含天然序列的一个或多个氨基酸的缺失、添加和/或取代，并且优选为其中不超过8个氨基酸取代。优选地，如本文所定义的那样分离多肽或蛋白质。术语“多肽”和“蛋白质”特别涵盖具有抗原结合蛋白的一个或多个氨基酸的缺失、添加和/或取代，并且优选地其中不超过8个氨基酸取代的CLL-1抗原结合分子、抗体或序列。术语“多肽片段”是指与全长天然蛋白质相比具有氨基末端缺失、羧基末端缺失和/或内部缺失的分离多肽。与天然蛋白质相比，此类片段还可以含有经修饰的氨基酸。有用的多肽片段包括抗原结合分子的免疫功能片段。有用的片段

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包括但不限于一个或多个CDR区、重链和/或轻链的可变域、抗体链的其他部分的一部分等。[0272]术语“分离的”是指(i)不含至少一些通常会与其一起被发现的蛋白质，(ii)基本上不含来自相同来源的其他蛋白质，例如来自相同物种，(iii)与至少约50％的自然界中与其相关的多核苷酸、脂质、碳水化合物或其他物质分离，(iv)与自然界中与其无关的多肽可操作结合(通过共价或非共价相互作用)，或(v)不在自然界中发生。[0273]多肽(例如，抗原结合分子或抗体)的“变体”包含氨基酸序列，其中相对于另一种多肽序列，将一个或多个氨基酸残基插入氨基酸序列中、从氨基酸序列中删除和/或取代到氨基酸序列中。变体包括融合蛋白。[0274]术语“同一性”是指两个或更多个多肽分子或两个或更多个核酸分子的序列之间的关系，如通过比对和比较序列所确定的。“同一性百分比”是指比较分子中氨基酸或核苷酸之间相同残基的百分比，并且基于所比较的分子中的最小者的大小计算。对于这些计算，优选地，通过特定的数学模型或计算机程序(即，“算法”)来解决比对中的缺口(如果有的话)。

[0275]为了计算百分比同一性，所比较的序列通常以给出序列之间最大匹配的方式比对。可以用于确定百分比同一性的计算机程序的一个实例是GCG程序包，其包括GAP(Devereuxet al.,1984,Nucl.Acid Res.12:387；Genetics Computer Group,University of Wisconsin,Madison,Wis.)。使用计算机算法GAP比对要测定百分比序列同一性的两种多肽或多核苷酸。比对序列以使它们各自的氨基酸或核苷酸最佳匹配(“匹配跨度”，如由算法确定)。在某些实施方案中，算法也使用标准比较矩阵(参见对于PAM 250比较矩阵，Dayhoffet al.,1978,Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352；对于BLOSUM 62比较矩阵，Henikoffet al.,1992,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89:10915-10919)。

[0276]如本文所用，二十种常规(例如，天然存在的)氨基酸及其缩写遵循常规用法。参见Immunology-A Synthesis(2nd Edition,Golub and Gren,Eds.,Sinauer Assoc.,Sunderland,Mass.(1991))，其出于任何目的通过引用并入本文。二十种常规氨基酸的立体异构体(例如D-氨基酸)，非天然氨基酸如alpha-,alpha-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸和其他非常规氨基酸也可以是本发明的多肽的合适的组分。非常规氨基酸的实例包括：4-羟基脯氨酸、.gamma.-羧基谷氨酸、epsilon-N,N,N-三甲基赖氨酸、e-N-乙酰基赖氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-乙酰丝氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、3-甲基组氨酸、5-羟基赖氨酸、.sigma.-N-甲基精氨酸、和其他类似的氨基酸和亚氨基酸(例如，4-羟基脯氨酸)。在本文使用的多肽符号中，根据标准用法和惯例，左手方向是氨基端方向，并且右手方向是羧基端方向。[0277]保守氨基酸取代可以涵盖非天然存在的氨基酸残基，其通常通过化学肽合成而非通过生物系统中的合成掺入。这些包括肽模拟物和氨基酸部分的其他反向或倒置形式。天然残基可以根据共同的侧链特性分为几类：[0278]a)疏水性：正亮氨酸,Met,Ala,Val,Leu,Ile；[0279]b)中性亲水：Cys,Ser,Thr,Asn,Gln；[0280]c)酸性：Asp,Glu；[0281]d)碱性：His,Lys,Arg；[0282]e)影响链取向的残基：Gly,Pro；和

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f)芳香族：Trp,Tyr,Phe.

[0284]例如，非保守取代可以牵涉用这些类别之一的成员交换来自另一类别的成员。可以将此类取代的残基引入例如与非人抗体同源的人抗体区域中或者引入分子的非同源区中。表3中列出了例示性的氨基酸取代。[0285]表3

[0286]

术语“衍生物”是指包括除氨基酸(或核酸)的插入、缺失或取代之外的化学修饰的

分子。在某些实施方案中，衍生物包含共价修饰，包括但不限于与聚合物、脂质或其他有机或无机部分的化学键合。在某些实施方案中，经化学修饰的抗原结合分子可以具有比未化学修饰的抗原结合分子更大的循环半衰期。在一些实施方案中，将衍生抗原结合分子共价

[0287]

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修饰以包含一种或多种水溶性聚合物附着物，包括但不限于聚乙二醇、聚氧乙烯二醇(polyoxyethylene glycol)或聚丙二醇。

[0288]肽类似物通常在制药业中用作具有与模板肽性质类似的性质的非肽药物。这些类型的非肽化合物称为“肽的模拟物”或“肽模拟物”。Fauchere,J.,Adv.Drug Res.,15:29(1986)；Veber&Freidinger,TINS,p.392(1985)；和Evans et al.,J.Med.Chem.,30:1229(1987)，其出于任何目的通过引用并入本文。[0289]治疗剂(例如工程化的CAR T细胞)的“治疗有效量”、“有效剂量”、“有效量”或“治疗有效剂量”是单独使用或与另一种治疗剂组合使用时通过疾病症状的严重性降低、无疾病症状期的频率和持续时间增加、或预防因疾病折磨引起的损伤或残疾来保护受试者免于疾病发作或促进疾病消退的任何量。可以使用熟练从业人员已知的多种方法，例如在临床试验期间在人类受试者中，在预测人中功效的动物模型系统中，或通过在体外测定法中测定试剂的活性评估治疗剂促进疾病消退的能力。[0290]术语“患者”和“受试者”可互换使用，并且包括人和非人动物受试者以及具有正式诊断的病症的那些、没有正式识别的病症的那些、接受医学注意的那些、有风险形成病症的那些等

[0291]术语“治疗”和“处理”包括治疗性处理、预防性处理和降低受试者将形成病症或其他风险因素的风险的应用。治疗不需要疾病的完全治愈，并且涵盖其中减轻症状或潜在风险因素的实施方案。术语“预防”不要求100％消除事件的可能性。相反，它表示在存在化合物或方法的情况下已经降低事件发生的可能性。[0292]标准技术可以用于重组DNA、寡核苷酸合成和组织培养和转化(例如，电穿孔，脂质转染)。酶促反应和纯化技术可以根据制造商的说明书进行，或者如本领域通常实现的或如本文所述进行。前述技术和程序通常可以根据本领域公知的常规方法进行，并且如贯穿本说明书引用和讨论的各种一般和更具体的参考文献中所述进行。参见例如Sambrooket al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual(第2版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.(1989))，其出于任何目的通过引用并入本文。[0293]通过引用并入

[0294]本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请明确且单独地指出通过引用并入一样。然而，本文中的参考文献的引用不应解释为承认此类参考文献是本发明的现有技术。在通过引用并入的参考文献中提供的任何定义或术语与本文提供的术语和讨论不同的情况下，以本术语和定义为准。

[0295]认为前述书面描述足以使本领域技术人员能够实施本发明。前面的描述和实例详述本发明的某些优选实施方案，并描述了发明人设想的最佳模式。然而，应当理解，无论前述内容如何详细地出现在文本中，本发明可以以多种方式实施，并且本发明应当根据所附权利要求书及其任何等同方案来解释。

[0296]以下实施例(包括进行的实验和实现的结果)仅用于说明目的而不应解释为限制本发明。

[0297]实施例1

[0298]通过人PBMC中的mRNA电穿孔确定CLL-1CAR活性。通过用EcoRI和BamHI(NEB)过夜

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消化10ug DNA而线性化编码T7启动子、CAR构建体和β珠蛋白稳定序列的质粒。然后将DNA在50℃下用蛋白酶K(ThermoFisherTM,600U/ml)消化2小时，用酚/氯仿纯化，并通过加入乙酸钠和两倍体积的乙醇沉淀。然后将团粒干燥，重悬浮于无RNA酶/DNA酶的水中并定量。然后使用mMESSAGEmMACHINE T7Ultra(ThermoFisherTM)按照制造商的说明书使用1ug线性DNA产生体外转录。使用MEGAClear试剂盒(ThermoFisherTM)按照制造商的说明书进一步纯化RNA，并使用NanoDropTM定量。通过运行琼脂糖凝胶评估mRNA完整性。[0299]评估不同的癌细胞系的CLL-1表达。在4℃将Namalwa(ATCC),U937(ATCC),HL-60(ATCC),EoL-1(Sigma),KG1a(ATCC)和MV4；11(ATCC)细胞用染色缓冲液(BD PharmingenTM)中与PE缀合的抗CLL-1抗体(BD PharmingenTM)染色30分钟。然后清洗细胞并重悬于含有碘化丙啶(BD PharmingenTM)的染色缓冲液中，之后进行数据采集。然后通过流式细胞术获取样品并分析数据并使用FlowJoTM以直方图作图。CLL-1表达的结果可以在图1中看到。

[0300]使用ficoll-paque密度离心根据制造商的说明书从健康供体白细胞单采术(leukopaks)(HemacareTM)中分离PBMC。使用R10培养基+IL-2(300IU/ml,

Therapeutics and Diagnostics)中的OKT3(50ng/ml,

MiltenyiBiotecTM)刺激PBMC。刺激后7天，将T细胞在Opti-MEMTM(Thermo Fisher ScientificTM)中清洗两次，并在Opti-MEM中以2.5x107个细胞/ml的终浓度重悬。每次电穿孔使用10μg mRNA。使用Gemini X2系统(Harvard Apparatus BTXTM)进行细胞电穿孔，该系统设置为在2mm比色皿(Harvard Apparatus BTXTM)中递送单个400V脉冲达0.5ms。立即将细胞转移到R10+IL-2培养基中并使其恢复。将细胞维持在0.5-2.0x 106个细胞/ml，之后用于活性测定法。

[0301]在mRNA电穿孔后6小时，将T细胞用染色缓冲液(BD PharmingenTM)中的生物素化蛋白L(ThermoScientificTM)在4℃下染色30分钟。然后清洗细胞并用染色缓冲液中的PE链霉抗生物素蛋白(BD PharmingenTM)在4℃染色30分钟。然后清洗细胞并重悬于含有碘化丙啶(BD PharmingenTM)的染色缓冲液中，之后进行数据采集。CAR检测的结果显示在图2中。[0302]在mRNA电穿孔后6小时，在R10培养基中以1:1E:T比将靶细胞与靶细胞一起培养。测试的细胞系包括Namalwa,U937,HL-60,EoL-1,KG1a和MV4；11。共培养16小时后，按照制造商的说明，通过Luminex(EMD Millipore)分析上清液，并通过碘化丙啶(PI)摄取的流式细胞术分析评估靶细胞存活力。对应于细胞因子释放测定的结果可以在图3中找到。细胞溶解活性测定的结果可以在图4和图5中找到。[0303]实施例2

[0304]通过人PBMC的慢病毒转导确定CLL-1CAR活性。将含有不同CLL-1CAR构建体的第三代慢病毒转移载体与ViraPowerTM慢病毒包装混合物(Life TechnologiesTM)一起使用以产生慢病毒上清液。简言之，通过在600ul OptiMEMTM培养基中混合15ug DNA和22.5ul聚乙烯亚胺(polyethileneimine)(PolysciencesTM,1mg/ml)产生转染混合物。将混合物在室温下温育5分钟。同时，用胰蛋白酶处理293T细胞(ATCC)，计数并将总共10x106个总细胞沿着转染混合物铺在T75烧瓶中。转染后三天，收集上清液并通过0.45um滤器过滤，并储存在-80℃直至使用。

[0305]使用ficoll-paque密度离心根据制造商的说明书从健康供体白细胞单采术(HemacareTM)中分离PBMC。使用R10培养基+IL-2(300IU/ml,

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Therapeutics and Diagnostics)中的OKT3(50ng/ml,MiltenyiBiotecTM)刺激PBMC。刺激后48小时，使用慢病毒以MOI＝10转导细胞。将细胞维持在0.5-2.0x 106个细胞/ml，之后用于活性测定法。

[0306]在刺激后第12天，将T细胞用染色缓冲液(BD PharmingenTM)中的生物素化蛋白L(ThermoScientificTM)在4℃染色30分钟。然后清洗细胞并用染色缓冲液中的PE链霉抗生物素蛋白(BD PharmingenTM)在4℃染色30分钟。然后清洗细胞并重悬于含有碘化丙啶(BD PharmingenTM)的染色缓冲液中，之后进行数据采集。CAR检测的结果显示在图6中。[0307]在T细胞刺激后12天，在R10培养基中以1:1E:T比将效应细胞与靶细胞一起培养。测试的细胞系包括Namalwa,U937,HL-60,EoL-1,KG1a和MV4；11。共培养后16小时，按照制造商的说明书通过Luminex(EMD MilliporeTM)分析上清液，并通过碘化丙啶(PI)摄取的流式细胞术分析评估靶细胞存活力。对应于细胞因子释放测定的结果可以在图7中找到。细胞溶解活性测定的结果可以在图8中找到。[0308]实施例3

[0309]在该研究中使用龄期5-6周龄的雌性Jackson NSG小鼠(NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ)。给小鼠随意喂食经辐照的Harlan 2918.15Rodent Dietand水。将小鼠圈养在InnoviveTM一次性通气笼中，在

洁净室内使用玉米轴垫层，所述

洁净室每小时100次完全换气，将H.E.P.A过滤空气提供到气泡环境中。所有

处理、体重测定和肿瘤测量均在气泡环境中进行。将环境温度控制到70°±2°F的温度范围和30-70％的湿度范围。所有程序均符合国立卫生研究院(National Institutes of Health，NIH)的所有法律、法规和指南并且在得到Molecular Imaging,Inc.动物护理和使用委员会批准的情况下进行。[0310]肿瘤细胞制备

[0311]

在防护溶液(Preservation Solution)中获得U937-luc细胞。将细胞在4

℃以200rcf离心8分钟，吸出上清液，并且通过移液将团粒重悬浮在冷的Dulbecco磷酸盐缓冲盐水(DPBS)中。将均质细胞悬浮液的等分试样在锥虫蓝溶液中稀释，并使用LunaTM自动细胞计数器计数。将细胞悬浮液在4℃以200rcf离心8分钟。吸出上清液，并且将细胞团粒重悬浮于冷的无血清培养基中，以产生排斥锥虫蓝的细胞/ml的终浓度。在植入期间将细胞悬浮液在湿冰上维持。使用27号针头和注射器，在第0天在0.2ml中通过侧尾静脉静脉内对测试动物植入1.00E+06细胞，。[0312]CAR T细胞制备

[0313]获得根据本发明的T细胞，在干冰上冷冻，并储存在液氮中。在处理当天，将提供的冷冻管从低温保存中取出并在37℃水浴中解冻。对于每组，将提供的T细胞合并到具有温的RPMI 1640的单个50ml锥形管中，所述RPMI1640补充有10％FBS。用具有10％FBS的温RPMI 1640漂洗冷冻管，以使细胞损失最小化，从而达到每个锥形管中的总体积50ml。将每个50ml锥形管在4℃以200rcf离心8分钟。吸出上清液，并且将细胞团粒重悬于10ml室温DPBS中。将均质细胞悬浮液的等分试样在锥虫蓝溶液中稀释，并使用血细胞计数器手动计数。将细胞悬浮液再次在4℃以200rcf离心8分钟。吸出上清液，将细胞团粒重悬浮在室温DPBS中，以产生所需要的最终浓度。在处理施用期间将细胞悬浮液在湿冰上维持。[0314]生物发光成像

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使用IVIS系列(Perkin Elmer，Hopkinton，MA)进行体内生物发光成像(BLI)。在约

1-2％的异氟烷气体麻醉下一次对动物成像多达5次。对每只小鼠IP注射150mg/kg(15mg/ml)D-萤光素，并在注射后10分钟在俯卧位，然后仰卧位成像。使用CCD芯片的大到小框并(binning)，并且调节曝光时间(2秒到2分钟)以获得每个图像的至少几百个计数，并且进一步避免CCD芯片的饱和。在第3天、第11天、第18天和第25天收集BLI图像。使用Living Image第4.5版(Perkin Elmer，Hopkinton，MA)软件分析图像。在每个个体动物的俯卧和仰卧图像上放置全身固定体积ROI，并根据动物标识标记。计算以光子/秒(p/s)表示的总辐射率，并且对于所有ROI进行输出以促进组间的分析。将俯卧和仰卧的ROI加在一起以估计全身肿瘤负荷。

[0316]处理

[0317]基于BLI衍生的全身肿瘤负荷估计，将所有小鼠分成研究组。分配小鼠以确保所有组的平均肿瘤负荷在研究群体的总体平均肿瘤负荷的10％内。在第3天开始用CAR T细胞处理。用0.2mL的固定体积对所有小鼠给药。图10中列出结果。[0318]评估副作用

[0319]每天至少一次观察所有动物的临床症状。在处理的每天对动物称重。每周记录个体体重3次。

[0320]以下序列将进一步示例本发明。[0321]CD28T DNA胞外，跨膜，胞内

[0322]CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC(SEQ ID NO.1)

[0323]CD28T胞外，跨膜，胞内AA

[0324]LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS(SEQ ID NO.2)[0325]CD28T DNA-胞外

[0326]CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCA(SEQ ID NO.3)[0327]CD28T AA-胞外[0328]LDNEKSNGTI IHVKGKHLCP SPLFPGPSKP(SEQ ID NO.4)[0329]CD28 DNA跨膜域

[0330]TTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT(SEQ ID NO.5)[0331]CD28AA跨膜域[0332]FWVLVVVGGV LACYSLLVTV AFIIFWV(SEQ ID NO.6)[0333]CD28DNA胞内域

[0334]AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC(SEQ ID NO.7)

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CD28AA胞内域

[0336]RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS(SEQ ID NO.8)[0337]CD3zeta DNA

[0338]AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.9)[0339]CD3zeta AA

[0340]RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.10)[0341]CD3zeta变体AA

[0342]RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.146)[0343]CD28DNA

[0344]ATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCC(SEQ ID NO.11)[0345]CD28AA

[0346]IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO.12)[0347]CD8DNA胞外和跨膜域

[0348]GCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAAC(SEQ ID NO.13)

[0349]CD8AA胞外和跨膜域

[0350]AAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN(SEQ IDNO.14)[0351]克隆24C1HC DNA

[0352]CAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCC(SEQ ID NO.15)

[0353]克隆24C1 HC AA(CDR加下划线)

[0354]QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO.16)[0355]克隆24C1 HC AA CDR1:GGSISSY(SEQ ID NO.17)

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克隆24C1 HC AA CDR2:YYSGS(SEQ ID NO.18)

[0357]克隆24C1 HC AA CDR3:LVYCGGDCYS GFDY(SEQ ID NO.19)[0358]克隆24C1LC DNA

[0359]GACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGG(SEQ ID NO.20)[0360]克隆24C1 LC AA(CDR加下划线)

[0361]DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO.21)[0362]克隆24C1 LC CDR1 AA:QASQDINNFLN(SEQ ID NO.22)[0363]克隆24C1 LC CDR2 AA:DASNLET(SEQ ID NO.23)[0364]克隆24C1 LC CDR3 AA:QQYGNLPFT(SEQ ID NO.24)[0365]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0366]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.25)[0367]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链[0368](信号肽为粗体)

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[0369]

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克隆24C1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0372]CAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.27)[0373]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0374]QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.28)

[0371]

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克隆24C1CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0376]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGGGGAGGCTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGGTGGAGGCAGCGACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCTGGGTTCTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTTGCTTGTTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGCGTTTATCATTTTTTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.29)[0377]克隆24C1CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链[0378](信号肽为粗体)

[0379]

[0380]

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克隆24C1CD28CD3zetaCAR DNA重链和轻链

[0382]CAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGGGGAGGCTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGGTGGAGGCAGCGACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCTGGGTTCTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTTGCTTGTTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGCGTTTATCATTTTTTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.31)[0383]克隆24C1CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0384]QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLST ATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.32)[0385]克隆24C1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0386]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGCCCCGGACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCTTAGCCTGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCAGCATCTCCTCTTATTACTGGAGCTGGATCAGGCAGCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATGGATTGGGTACATCTACTACTCTGGCTCAACAAATTATAATCCATCCCTGAAGTCCCGCGTGACTATCTCTGTGGACACCAGCAAGAATCAGTTTTCACTGAAGTTGTCTAGTGTTACCGCGGCCGACACCGCCGTATACTACTGTGTGTCTCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTGCTATTCCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGCGGCGGGTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGGTGGCGGCTCCGACATCCAGCTGACACAATCACCATCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGGGACAGAGTGTCCTTCACATGCCAGGCCAGCCAGGATATCAATAACTTCCTGAACTGGTACCAACAGAAACCCGGAAAGGCTCCAAAGCTCCTGATCTATGATGCTTCCAACCTGGAGACCGGCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTTCAGGATCAGGCACTGACTTTACGTTCACCATATCCAGTCTTCAGCCCGAAGACATTGCAACCTATTACTGCCAACAATACGGGAA

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CCTTCCCTTTACATTCGGAGGCGGCACCAAGGTGGAAATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.33)[0387]克隆24C1CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链[0388](信号肽为粗体)

[0389]

[0390]

克隆24C1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0392]CAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGCCCCGGACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCTTAGCCTGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCAGCATCTCCTCTTATTACTGGAGCTGGATCAGGCAGCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATGGATTGGGTACATCTACTACTCTGGCTCAACAAATTATAATCCATCCCTGAAGTCCCGCGTGACTATCTCTGTGGACACCAGCAAGAATCAGTTTTCACTGAAGTTGTCTAGTGTTACCGCGGCCGACACCGCCGTATACTACTGTGTGTCTCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTGCTATTCCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGCGGCGGGTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGGTGGCGGCTCCGACATCCAGCTGACACAATCACCATCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGGGACAGAGTGTCCTTCACATGCCAGGCCAGCCAGGATATCAATAACTTCCTGAACTGGTACCAACAGAAACCCGGAAAGGCTCCAAAGCTCCTGATCTATGATGCTTCCAACCTGGAGACCGGCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTTCAGGATCAGGCACTGACTTTACGTTCACCATATCCAGTCTTCAGCCCGAAGACATTGCAACCTATTACTGCCAACAATACGGGAACCTTCCCTTTACATTCGGAGGCGGCACCAAGGTGGAAATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCG

[0391]

CN 109641008 A

说　明　书

49/78页

CTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.35)[0393]克隆24C1CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0394]QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.36)[0395]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0396]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGATATCCAGCTCACGCAATCCCCCTCAAGCTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCGGGTGTCCTTCACATGTCAGGCAAGCCAAGACATAAATAATTTCCTGAATTGGTACCAACAAAAACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCTGATTTATGATGCCTCCAATCTGGAGACCGGGGTCCCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGCAGCGGCACAGACTTTACATTTACTATCTCTTCTCTGCAACCAGAGGACATCGCCACATACTATTGCCAGCAATACGGCAATCTGCCCTTCACCTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGAAATTAAAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAAGTACAATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACTCGTGAAGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGACATGTACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCCAGTTACTATTGGTCCTGGATTAGACAGCCACCCGGCAAAGGACTGGAATGGATTGGATATATCTACTACTCTGGATCTACAAACTATAATCCCAGCCTCAAATCCAGGGTCACTATTAGTGTGGATACATCAAAGAATCAGTTCTCCTTGAAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCCGACACCGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCTGGTCTACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCGGTTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTTACCGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGATAACGAGAAGTCCAACGGTACGATTATCCACGTTAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCGCTGTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTTTTGGGTCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTACTCGCCTGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTCGCATTCATCATCTTCTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.37)[0397]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链[0398](信号肽为粗体)

CN 109641008 A

说　明　书

50/78页

[0399]

[0400]

克隆24C1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0402]GATATCCAGCTCACGCAATCCCCCTCAAGCTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCGGGTGTCCTTCACATGTCAGGCAAGCCAAGACATAAATAATTTCCTGAATTGGTACCAACAAAAACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCTGATTTATGATGCCTCCAATCTGGAGACCGGGGTCCCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGCAGCGGCACAGACTTTACATTTACTATCTCTTCTCTGCAACCAGAGGACATCGCCACATACTATTGCCAGCAATACGGCAATCTGCCCTTCACCTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGAAATTAAAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAAGTACAATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACTCGTGAAGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGACATGTACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCCAGTTACTATTGGTCCTGGATTAGACAGCCACCCGGCAAAGGACTGGAATGGATTGGATATATCTACTACTCTGGATCTACAAACTATAATCCCAGCCTCAAATCCAGGGTCACTATTAGTGTGGATACATCAAAGAATCAGTTCTCCTTGAAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCCGACACCGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCTGGTCTACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCGGTTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTTACCGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGATAACGAGAAGTCCAACGGTACGATTATCCACGTTAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCGCTGTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTTTTGGGTCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTACTCGCCTGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTCGCATTCATCATCTTCTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQID NO.39)[0403]克隆24C1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0404]DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.40)

[0401]

CN 109641008 A[0405]

说　明　书

51/78页

克隆24C1CD28CD3zeta CAR DNA AA重链和轻链

[0406]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGATATCCAGCTGACCCAGTCTCCATCCTCTTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCGCGTCTCTTTCACTTGCCAAGCCAGCCAAGACATCAACAACTTTCTGAATTGGTACCAGCAGAAACCAGGCAAAGCACCAAAGCTCCTCATCTACGACGCCTCCAACCTGGAAACCGGGGTGCCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGTTCTGGCACGGATTTTACGTTCACCATCTCCTCTCTGCAGCCCGAGGATATAGCTACTTATTACTGTCAGCAGTACGGGAATCTGCCATTTACTTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGAAATCAAAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGGGCGGGGGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAGGTGCAACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATTGGTGAAGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTACTTGTACTGTTAGCGGAGGCAGCATAAGCAGCTACTATTGGTCCTGGATCAGACAGCCACCAGGGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCTACATTTACTATTCCGGGTCCACCAACTACAACCCATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAATTTCCGTCGACACAAGCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAACTTAGTAGCGTCACTGCTGCAGATACAGCAGTGTACTATTGTGTCAGCCTTGTCTACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTGGCTTTGATTACTGGGGACAGGGCACGCTCGTGACAGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGAGGTAATGTATCCGCCACCGTATCTGGACAACGAGAAGTCTAATGGGACAATCATTCACGTGAAGGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCCCCTGTTTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCTGGGTGCTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTGGCCTGCTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGCGTTTATTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.41)[0407]克隆24C1CD28CD3zeta CARAA重链和轻链[0408](信号肽为粗体)

[0409]

[0410][0411]

克隆24C1CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0412]GATATCCAGCTGACCCAGTCTCCATCCTCTTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCGCGTCTCTTTCACTTGCCAAGCCAGCCAAGACATCAACAACTTTCTGAATTGGTACCAGCAGAAACCAGGCAAAGCACCAAAGCTCCTCATC

CN 109641008 A

说　明　书

52/78页

TACGACGCCTCCAACCTGGAAACCGGGGTGCCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGTTCTGGCACGGATTTTACGTTCACCATCTCCTCTCTGCAGCCCGAGGATATAGCTACTTATTACTGTCAGCAGTACGGGAATCTGCCATTTACTTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGAAATCAAAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGGGCGGGGGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAGGTGCAACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATTGGTGAAGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTACTTGTACTGTTAGCGGAGGCAGCATAAGCAGCTACTATTGGTCCTGGATCAGACAGCCACCAGGGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCTACATTTACTATTCCGGGTCCACCAACTACAACCCATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAATTTCCGTCGACACAAGCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAACTTAGTAGCGTCACTGCTGCAGATACAGCAGTGTACTATTGTGTCAGCCTTGTCTACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTGGCTTTGATTACTGGGGACAGGGCACGCTCGTGACAGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGAGGTAATGTATCCGCCACCGTATCTGGACAACGAGAAGTCTAATGGGACAATCATTCACGTGAAGGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCCCCTGTTTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCTGGGTGCTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTGGCCTGCTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGCGTTTATTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.43)[0413]克隆24C1CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0414]DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.44)[0415]克隆24C1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0416]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGACATTCAATTGACCCAGTCCCCTAGCAGTCTCTCAGCAAGTGTGGGAGATAGGGTGTCATTCACCTGTCAGGCTTCACAGGACATCAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAAGGCACCAAAGCTGCTCATATATGACGCTTCAAACCTTGAAACCGGAGTACCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGATCAGGGACTGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTACTGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCTTTTACATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGAGATTAAGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAGGCGGTGGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAGGTCCAGCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCTGGTTAAGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCACGTGTACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCCTCATACTATTGGTCTTGGATACGGCAACCTCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCTATATCTACTATAGTGGCTCCACTAATTACAACCCTTCCCTCAAGTCCAGAGTCACCATTTCCGTGGACACATCTAAGAACCAGTTCAGTCTGAAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCAGACACAGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCTTGTTTACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCGGCTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCTTGGTCACAGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTCTAACAGTATTATGTACTTTTCTCATTTTGTACCCGTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACTACTACCCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCCTGCACCCACAATAGCCAGTCAGCCTTTGAGCCTGAGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCTGCTGGGGGTGCAGTGCACACACG

CN 109641008 A

说　明　书

53/78页

AGGTCTTGATTTTGCTTGCGACATATACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTGCTTCTGAGCTTGGTCATCACGCTCTATTGCAACCATCGCAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.45)[0417]克隆24C1CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链[0418](信号肽为粗体)

[0419]

[0420]

克隆24C1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0422]GACATTCAATTGACCCAGTCCCCTAGCAGTCTCTCAGCAAGTGTGGGAGATAGGGTGTCATTCACCTGTCAGGCTTCACAGGACATCAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAAGGCACCAAAGCTGCTCATATATGACGCTTCAAACCTTGAAACCGGAGTACCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGATCAGGGACTGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTACTGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCTTTTACATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGAGATTAAGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAGGCGGTGGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAGGTCCAGCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCTGGTTAAGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCACGTGTACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCCTCATACTATTGGTCTTGGATACGGCAACCTCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCTATATCTACTATAGTGGCTCCACTAATTACAACCCTTCCCTCAAGTCCAGAGTCACCATTTCCGTGGACACATCTAAGAACCAGTTCAGTCTGAAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCAGACACAGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCTTGTTTACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCGGCTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCTTGGTCACAGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTCTAACAGTATTATGTACTTTTCTCATTTTGTACCCGTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACTACTACCCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCCTGCACCCACAATAGCCAGTCAGCCTTTGAGCCTGAGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCTGCTGGGGGTGCAGTGCACACACGAGGTCTTGATTTTGCTTGCGACATATACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTGCTTCTGAGCTTGGTCATCACGCTCTATTGCAACCATCGCAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCG

[0421]

CN 109641008 A

说　明　书

54/78页

CTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.47)[0423]克隆24C1CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0424]DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQA LPPR(SEQ ID NO.48)[0425]克隆24C8重链(HC)DNA

[0426]CAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCT(SEQ ID NO.48)[0427]克隆24C8AA HC(CDR在下划线中)

[0428]QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO.50)[0429]克隆24C8 HC CDR1 AA:GGSISSGGF(SEQ ID NO.51)[0430]克隆24C8 HC CDR2 AA:HHSGS(SEQ ID NO.52)[0431]克隆24C8 HC CDR3AA:LVYCGGDCYS GFDY(SEQ ID NO.53)[0432]克隆24C8轻链(LC)DNA

[0433]GATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGG(SEQ ID NO.54)[0434]克隆24C8LC AA(CDR在下划线中)

[0435]DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKR(SEQ ID NO.55)[0436]克隆24C8LC CDR1 AA:QASQDINNFLN(SEQ ID NO.56)[0437]克隆24C8 LC CDR2AA:DASNLET(SEQ ID NO.57)[0438]克隆24C8 LC CDR3AA:QQYGNLPFT(SEQ ID NO.58)[0439]克隆24C8CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

CN 109641008 A[0440]

说　明　书

55/78页

ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGT

ACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCTGGAGGGGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTCAGGGGGGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGCACTGGACAATGAGAAGTCCAACGGCACCATCATCCACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGCCCTAGTCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAAACCTTTTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTCACGGTGGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.59)[0441]克隆24C8CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链[0442](信号肽为粗体)

[0443]

[0444]

克隆24C8CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0446]CAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCT

[0445]

CN 109641008 A

说　明　书

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GGAGGGGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTCAGGGGGGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGCACTGGACAATGAGAAGTCCAACGGCACCATCATCCACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGCCCTAGTCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAAACCTTTTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTCACGGTGGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.61)[0447]克隆24C8CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0448]QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.62)[0449]克隆24C8CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0450]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGTCCGGGACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCTGAGTCTGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCTCTATTTCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCTTGGATCAGACAACACCCTGGCAAAGGGCTGGAGTGGATAGGGTATATTCACCACTCTGGGTCCACTCACTACAACCCATCATTGAAATCCAGAGTGACTATCTCAATCGACACATCCAAGAACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCATCAGTTACCGCCGCTGACACCGCGGTGTATTATTGCGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGGCGATTGTTATAGTGGCTTTGACTACTGGGGGCAGGGGACATTGGTTACCGTTTCAAGTGGAGGCGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAGCGGAGGTGGGGGGAGCGACATACAGCTTACGCAGAGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCCGTGGGGGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCAGGCTTCCCAGGACATAAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGGAAAGCACCAAAGCTGCTCATCTACGATGCCAGCAACCTGGAAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCTCTGGAAGTGGCAGTGGGACCGATTTCACTTTTACAATCTCAAGTTTGCAGCCAGAAGACATTGCAACATACTACTGTCAACAGTACGGCAATCTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGAACTAAAGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGCCATTGAAGTTATGTATCCGCCCCCGTATCTGGATAACGAGAAATCTAATGGTACCATAATACATGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCCATCACCGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAACCTTTCTGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGAGTTCTGGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGACCGTGGCGTTTATCATCTTCTGGGTAAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAA

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CCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.63)[0451]克隆24C8CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链[0452](信号肽为粗体)

[0453]

克隆24C8CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0455]CAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGTCCGGGACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCTGAGTCTGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCTCTATTTCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCTTGGATCAGACAACACCCTGGCAAAGGGCTGGAGTGGATAGGGTATATTCACCACTCTGGGTCCACTCACTACAACCCATCATTGAAATCCAGAGTGACTATCTCAATCGACACATCCAAGAACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCATCAGTTACCGCCGCTGACACCGCGGTGTATTATTGCGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGGCGATTGTTATAGTGGCTTTGACTACTGGGGGCAGGGGACATTGGTTACCGTTTCAAGTGGAGGCGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAGCGGAGGTGGGGGGAGCGACATACAGCTTACGCAGAGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCCGTGGGGGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCAGGCTTCCCAGGACATAAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGGAAAGCACCAAAGCTGCTCATCTACGATGCCAGCAACCTGGAAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCTCTGGAAGTGGCAGTGGGACCGATTTCACTTTTACAATCTCAAGTTTGCAGCCAGAAGACATTGCAACATACTACTGTCAACAGTACGGCAATCTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGAACTAAAGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGCCATTGAAGTTATGTATCCGCCCCCGTATCTGGATAACGAGAAATCTAATGGTACCATAATACATGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCCATCACCGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAACCTTTCTGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGAGTTCTGGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGACCGTGGCGTTTATCATCTTCTGGGTAAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTAT

[0454]

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TCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.65)[0456]克隆24C8CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0457]QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.66)[0458]克隆24C8CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0459]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGGCCTGGCCTTGTGAAACCAAGCCAGACACTGAGCCTGACATGCACTGTGTCCGGCGGGTCCATATCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCCTGGATACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACTTGAATGGATTGGATATATCCACCATTCCGGAAGCACCCACTACAATCCAAGCCTTAAATCCCGGGTGACAATCTCCATCGACACCTCAAAGAATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTTCAGTAACTGCCGCCGATACCGCTGTGTACTACTGTGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGGAGATTGTTATTCTGGGTTCGATTATTGGGGTCAAGGCACACTGGTAACTGTCAGCAGCGGAGGCGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAGTGGAGGGGGCGGATCTGACATTCAGCTTACGCAGTCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGCGTTGGCGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCAAGCAAGTCAGGATATCAACAACTTTCTTAACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCAAGGCACCCAAGTTGCTGATTTACGATGCTTCTAACCTCGAGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCTCCGGGAGCGGCAGCGGCACAGACTTTACCTTTACGATTTCCAGTCTGCAGCCAGAGGATATAGCAACTTATTACTGTCAGCAGTATGGCAACCTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGCACAAAGGTCGAGATTAAAAGAGCCGCAGCGTTGTCCAACTCCATAATGTATTTTTCTCATTTTGTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAACCTACCACCACCCCCGCCCCACGACCACCTACTCCAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGCCCCTCAGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGCCCTGCTGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAGAGGACTCGACTTCGCCTGCGATATTTATATATGGGCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGAGTCTTGCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCTTTATTGTAACCATCGGAATAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.67)[0460]克隆24C8CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链[0461](信号肽为粗体)

CN 109641008 A[0462]

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克隆24C8CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0464]CAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGGCCTGGCCTTGTGAAACCAAGCCAGACACTGAGCCTGACATGCACTGTGTCCGGCGGGTCCATATCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCCTGGATACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACTTGAATGGATTGGATATATCCACCATTCCGGAAGCACCCACTACAATCCAAGCCTTAAATCCCGGGTGACAATCTCCATCGACACCTCAAAGAATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTTCAGTAACTGCCGCCGATACCGCTGTGTACTACTGTGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGGAGATTGTTATTCTGGGTTCGATTATTGGGGTCAAGGCACACTGGTAACTGTCAGCAGCGGAGGCGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAGTGGAGGGGGCGGATCTGACATTCAGCTTACGCAGTCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGCGTTGGCGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCAAGCAAGTCAGGATATCAACAACTTTCTTAACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCAAGGCACCCAAGTTGCTGATTTACGATGCTTCTAACCTCGAGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCTCCGGGAGCGGCAGCGGCACAGACTTTACCTTTACGATTTCCAGTCTGCAGCCAGAGGATATAGCAACTTATTACTGTCAGCAGTATGGCAACCTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGCACAAAGGTCGAGATTAAAAGAGCCGCAGCGTTGTCCAACTCCATAATGTATTTTTCTCATTTTGTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAACCTACCACCACCCCCGCCCCACGACCACCTACTCCAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGCCCCTCAGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGCCCTGCTGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAGAGGACTCGACTTCGCCTGCGATATTTATATATGGGCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGAGTCTTGCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCTTTATTGTAACCATCGGAATAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.69)[0465]克隆24C8CD8CD3zetaCAR AA重链和轻链

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[0463]

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QSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTA TKDTYDALHM QALPPR(SEQ ID NO.70)[0467]克隆20C5.1HC DNA

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[0469]克隆20C5.1AA HC(CDR在下划线中)

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[0477]DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKR(SEQ ID NO.77)[0478]克隆20C5.1AA LC CDR1:RASQSISSYLN(SEQ ID NO.78)[0479]克隆20C5.1AA LC CDR2:GASSLKS(SEQ ID NO.79)[0480]克隆20C5.1AA LC CDR3:QQSYSTPIT(SEQ ID NO.80)[0481]克隆20C5.1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0482]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACTATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGTGACTGTGACCGAAGACACTAGTACCGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGATCAGAAGATACCGCAGTGTACTACTGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTGGTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGTGGCAGCGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGGCGGCTCTGATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAATCTCCAGTTATTTGAATTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCA

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CCTAAGCTGTTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATCAGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACTACTGCCAACAGTCATACAGCACTCCGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAATCAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAATGAGAAGTCAAACGGCACCATCATACATGTTAAAGGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCGCTGTTCCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTGGGTTCTGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCGCTTGCTATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCCTTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.81)

[0483]克隆20C5.1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链[0484](信号肽为粗体)

[0485]

克隆20C5.1CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0487]CAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACTATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGTGACTGTGACCGAAGACACTAGTACCGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGATCAGAAGATACCGCAGTGTACTACTGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTGGTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGTGGCAGCGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGGCGGCTCTGATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAATCTCCAGTTATTTGAATTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTGTTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATCAGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACTACTGCCAACAGTCATACAGCACTCCGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAATCAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAATGA

[0486]

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GAAGTCAAACGGCACCATCATACATGTTAAAGGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCGCTGTTCCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTGGGTTCTGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCGCTTGCTATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCCTTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.83)[0488]克隆20C5.1CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0489]QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.84)

[0490]克隆20C5.1CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0491]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGGGCCGAGGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGTCAAAGTGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACACCCTCACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTGGATGGGTGGATTTGATCCAGAAGATGGAGAGACTATCTACGCCCAGAAGTTCCAGGGCCGGGTCACCGTAACAGAAGACACCTCAACTGACACCGCTTACATGGAGCTGAGTTCACTGCGGTCCGAGGACACGGCCGTGTATTATTGTGCCACCGAGAGCCGCGGAATCGGATGGCCTTACTTCGACTACTGGGGACAGGGTACACTTGTTACAGTATCATCCGGGGGTGGCGGCTCTGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGGTGGATCAGATATCCAAATGACTCAAAGTCCAAGTTCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGATAGAGTCACCATAACCTGCAGGGCAAGTCAGTCCATCTCCTCCTATCTGAACTGGTACCAACAGAAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTCCTGATCTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATCCGGTGTCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTGGAAGCGGTACAGATTTTACTTTGACCATTAGCAGCCTCCCACCGGAAGACTTTGCTACATATTACTGCCAGCAGTCTTACTCAACCCCAATCACCTTCGGGCAAGGCACCAGACTCGAAATAAAAAGAGCAGCTGCTATCGAGGTTATGTACCCACCGCCGTACTTGGATAACGAAAAAAGCAATGGGACCATCATTCATGTGAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACTGTTTCCTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGGTACTTGTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCCTGCTACTCACTCCTGGTTACCGTCGCATTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.85)[0492]克隆20C5.1CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

CN 109641008 A[0493][0494]

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(信号肽为粗体)

克隆20C5.1CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0496]CAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGGGCCGAGGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGTCAAAGTGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACACCCTCACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTGGATGGGTGGATTTGATCCAGAAGATGGAGAGACTATCTACGCCCAGAAGTTCCAGGGCCGGGTCACCGTAACAGAAGACACCTCAACTGACACCGCTTACATGGAGCTGAGTTCACTGCGGTCCGAGGACACGGCCGTGTATTATTGTGCCACCGAGAGCCGCGGAATCGGATGGCCTTACTTCGACTACTGGGGACAGGGTACACTTGTTACAGTATCATCCGGGGGTGGCGGCTCTGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGGTGGATCAGATATCCAAATGACTCAAAGTCCAAGTTCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGATAGAGTCACCATAACCTGCAGGGCAAGTCAGTCCATCTCCTCCTATCTGAACTGGTACCAACAGAAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTCCTGATCTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATCCGGTGTCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTGGAAGCGGTACAGATTTTACTTTGACCATTAGCAGCCTCCCACCGGAAGACTTTGCTACATATTACTGCCAGCAGTCTTACTCAACCCCAATCACCTTCGGGCAAGGCACCAGACTCGAAATAAAAAGAGCAGCTGCTATCGAGGTTATGTACCCACCGCCGTACTTGGATAACGAAAAAAGCAATGGGACCATCATTCATGTGAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACTGTTTCCTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGGTACTTGTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCCTGCTACTCACTCCTGGTTACCGTCGCATTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.87)[0497]克隆20C5.1CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0498]QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSP

[0495]

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SSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHM QALPPR(SEQ ID NO.88)[0499]克隆20C5.1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0500]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGTTGGTGCAAAGCGGCGCAGAAGTTAAGAAACCTGGGGCGTCAGTTAAGGTGTCTTGCAAAGTATCTGGCTATACCCTCACTGAGCTGTCCATGCATTGGGTAAGGCAGGCTCCTGGAAAGGGGCTCGAATGGATGGGAGGATTTGACCCTGAAGACGGAGAGACCATCTACGCCCAGAAATTCCAGGGTAGAGTAACAGTGACTGAGGACACTAGCACTGACACAGCGTACATGGAGCTGAGTTCTCTGAGAAGTGAGGACACAGCCGTTTACTACTGCGCTACCGAGTCCAGAGGTATTGGCTGGCCATACTTCGACTATTGGGGTCAGGGCACCCTGGTTACAGTGAGTTCAGGAGGCGGGGGCTCTGGGGGGGGCGGTTCCGGAGGGGGGGGCTCAGATATACAGATGACGCAGAGTCCATCAAGTCTCTCAGCCAGCGTGGGAGATCGCGTGACTATTACTTGCCGCGCCAGCCAGAGTATTAGCTCCTATCTGAATTGGTACCAGCAAAAGCCCGGGAAGGCCCCTAAGCTTCTGATTTCTGGCGCCTCCTCTTTGAAGTCAGGTGTGCCAAGCAGATTTAGCGGGTCTGGAAGTGGCACTGACTTTACACTTACTATCTCCAGCCTGCCCCCAGAGGATTTTGCCACATATTACTGTCAGCAAAGCTACTCTACTCCAATCACTTTCGGCCAGGGCACAAGATTGGAGATTAAGAGGGCTGCCGCACTTTCAAATTCCATCATGTATTTCAGCCATTTTGTGCCTGTTTTTCTTCCGGCCAAACCTACAACCACTCCCGCCCCACGCCCACCTACTCCCGCCCCTACCATTGCCTCCCAGCCTCTGTCTCTTAGACCTGAGGCTTGTAGACCTGCTGCCGGCGGAGCCGTGCACACTCGCGGTCTGGACTTCGCCTGCGACATCTATATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACCTGCGGCGTTCTCCTTCTCTCACTCGTAATCACACTCTATTGCAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.89)[0501]克隆20C5.1CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链[0502](信号肽为粗体)

CN 109641008 A[0503]

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克隆20C5.1CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

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[0504]

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[0523]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGCGGTGGTGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTTGAGGCTTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTACTTTTTCCAGCTATGGAATGCACTGGGTGCGGCAGGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTGGGTGGCCGTCATTTCTTATGACGGATCAGATAAGTACTACGTGGACAGCGTCAAGGGCAGATTCACCATCTCTAGGGACAACAGTAAAAATAGACTCTACCTCCAGATGAATAGCCTCAGAGCTGAAGACACGGCCGTCTACTATTGTGCTCGGGAGCGGTATAGTGGCAGAGACTACTGGGGGCAGGGCACACTCGTTACAGTGAGTAGCGGCGGAGGAGGGAGTGGGGGCGGTGGCTCCGGTGGAGGAGGTTCTGAGATTGTTATGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCTCAGTCAGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTGTCTTGCAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTCTCTTCTGACATGGTACCAGCAAAAGCCCGGGCAGGCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGGGCTTCAACAAGAGCCACTGGGATTCCCGCACGATTCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTGGTTTCACCC

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[0526]

克隆20C5.2CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

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[0527]

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CTGGTTGTTGTGGGGGGCGTGCTGGCCTGCTATAGCCTTTTGGTCACTGTAGCCTTCATTATTTTTTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.105)

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[0531]克隆20C5.2CD28CD3zetaCAR DNA重链和轻链

[0532]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGCGGCGGCGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCTGCGCCTGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTACTTTTTCCTCCTACGGCATGCACTGGGTGCGCCAGGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTGGGTCGCCGTGATCTCATACGATGGGTCAGACAAATACTATGTCGATTCTGTTAAAGGGCGGTTTACCATTTCAAGAGATAACTCTAAGAATAGGCTGTATTTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGCGCTAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGATTACTGGGGACAGGGTACACTGGTGACCGTGAGCTCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGTGGCGGAAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAATTGTGATGACCCAGTCTCCGGCTACACTTTCAGTCTCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTGTCATGCAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTCTCTCCTTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGTGCCTCCACAAGGGCGACCGGGATTCCAGCCCGCTTCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTGGTTTCACTTTGACAATCAGTTCACTGCAGTCAGAGGATTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAATACGACACATGGCCATTCACTTTCGGACCCGGTACCAAAGTCGATTTCAAGAGAGCCGCGGCCATCGAGGTTATGTACCCACCACCATATCTGGACAATGAAAAAAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAGGGTAAACACCTCTGCCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCCATCAAAGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCGTGGGGGGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTTCTGGTGACGGTTGCTTTCATTATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.107)[0533]克隆20C5.2CD28CD3zetaCAR AA重链和轻链[0534](信号肽为粗体)

CN 109641008 A[0535]

说　明　书

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克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0537]CAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGCGGCGGCGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCTGCGCCTGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTACTTTTTCCTCCTACGGCATGCACTGGGTGCGCCAGGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTGGGTCGCCGTGATCTCATACGATGGGTCAGACAAATACTATGTCGATTCTGTTAAAGGGCGGTTTACCATTTCAAGAGATAACTCTAAGAATAGGCTGTATTTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGCGCTAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGATTACTGGGGACAGGGTACACTGGTGACCGTGAGCTCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGTGGCGGAAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAATTGTGATGACCCAGTCTCCGGCTACACTTTCAGTCTCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTGTCATGCAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTCTCTCCTTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGTGCCTCCACAAGGGCGACCGGGATTCCAGCCCGCTTCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTGGTTTCACTTTGACAATCAGTTCACTGCAGTCAGAGGATTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAATACGACACATGGCCATTCACTTTCGGACCCGGTACCAAAGTCGATTTCAAGAGAGCCGCGGCCATCGAGGTTATGTACCCACCACCATATCTGGACAATGAAAAAAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAGGGTAAACACCTCTGCCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCCATCAAAGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCGTGGGGGGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTTCTGGTGACGGTTGCTTTCATTATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.109)[0538]克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0539]QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYC

[0536]

CN 109641008 A

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CN 109641008 A[0544]

说　明　书

71/78页

克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0546]CAGGTGCAGTTGGTTGAATCAGGAGGGGGTGTGGTGCAACCCGGTCGGTCACTGCGCCTCAGTTGTGCTGCTTCCGGGTTTACTTTCAGCTCATATGGGATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCAGGTAAAGGCTTGGAATGGGTGGCGGTGATCAGCTATGACGGCTCTGACAAATATTATGTGGACTCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCAGTCGAGACAACTCAAAGAATAGACTCTACTTGCAGATGAATAGCCTCCGGGCCGAAGATACTGCAGTCTATTATTGCGCCCGGGAGCGCTACAGTGGAAGAGACTATTGGGGGCAAGGAACTCTTGTCACAGTCTCATCTGGCGGCGGCGGCAGCGGTGGGGGCGGATCTGGCGGGGGCGGCAGCGAAATCGTTATGACTCAGAGTCCTGCCACACTGAGCGTTAGCCCTGGTGAGAGAGCAACACTTAGCTGCAGAGCTAGTCAGAGTGTTTCCAGTCTTTTGACATGGTACCAACAGAAGCCCGGTCAAGCTCCACGACTGCTCATCTTCGGTGCATCCACCCGCGCAACCGGGATACCCGCCCGGTTTTCCGGTTCTGGAAGTGGCACAGGATTCACGCTCACCATTTCTTCTCTGCAGTCTGAAGACTTTGCCGTGTATTACTGCCAGCAGTACGATACCTGGCCCTTTACCTTTGGCCCAGGTACTAAAGTGGATTTTAAACGAGCTGCTGCACTTTCCAATAGTATTATGTACTTTTCACATTTTGTGCCCGTGTTCCTGCCTGCGAAGCCTACGACAACCCCAGCCCCTAGGCCGCCCACACCGGCCCCAACTATTGCCTCCCAGCCATTGTCTCTGAGACCCGAAGCTTGCAGACCTGCTGCTGGAGGCGCCGTTCACACCCGAGGATTGGATTTCGCATGTGACATTTACATCTGGGCCCCTTTGGCCGGAACCTGCGGTGTGCTGCTGCTGTCACTCGTGATTACACTTTACTGCAACCACCGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.113)[0547]克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链

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[0545]

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72/78页

VSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.114)[0549]克隆20C5.2CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0550]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAGATTGTGATGACCCAGTCCCCTGCTACCCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAGAGCCACCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGTCCGTCAGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAGCAAAAACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTTGATTTTTGGTGCAAGCACACGCGCCACTGGCATTCCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGATCTGGGACAGGCTTCACTCTGACAATCAGTAGCCTGCAGAGTGAGGACTTTGCTGTTTACTACTGTCAACAGTACGACACCTGGCCATTCACATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGACTTCAAGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTGGTGGCGGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAGGTTCAACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGTTGTCCAACCGGGGCGATCACTTCGACTTTCCTGTGCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCATCCTATGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGCTCCCGGAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAGTGATCTCTTACGATGGCTCAGACAAGTATTATGTGGACTCAGTCAAGGGGAGATTCACAATAAGCCGAGACAACTCCAAAAACCGGCTTTATCTCCAGATGAACAGCCTTAGAGCGGAAGATACCGCGGTATACTACTGTGCCCGCGAGAGGTATTCCGGCAGAGACTACTGGGGACAGGGCACACTGGTCACCGTGAGTTCTGCCGCAGCGCTCGATAACGAAAAGAGCAACGGAACCATTATCCACGTTAAGGGCAAGCACCTGTGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGACCATCTAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGTAGTTGGAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCCTTTTGGTCACCGTCGCCTTCATTATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.115)

[0551]克隆20C5.2CD28TCD3zeta CAR AA重链和轻链[0552](信号肽为粗体)

CN 109641008 A[0553]

说　明　书

73/78页

克隆20C5.2CD28T CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0555]GAGATTGTGATGACCCAGTCCCCTGCTACCCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAGAGCCACCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGTCCGTCAGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAGCAAAAACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTTGATTTTTGGTGCAAGCACACGCGCCACTGGCATTCCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGATCTGGGACAGGCTTCACTCTGACAATCAGTAGCCTGCAGAGTGAGGACTTTGCTGTTTACTACTGTCAACAGTACGACACCTGGCCATTCACATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGACTTCAAGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTGGTGGCGGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAGGTTCAACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGTTGTCCAACCGGGGCGATCACTTCGACTTTCCTGTGCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCATCCTATGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGCTCCCGGAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAGTGATCTCTTACGATGGCTCAGACAAGTATTATGTGGACTCAGTCAAGGGGAGATTCACAATAAGCCGAGACAACTCCAAAAACCGGCTTTATCTCCAGATGAACAGCCTTAGAGCGGAAGATACCGCGGTATACTACTGTGCCCGCGAGAGGTATTCCGGCAGAGACTACTGGGGACAGGGCACACTGGTCACCGTGAGTTCTGCCGCAGCGCTCGATAACGAAAAGAGCAACGGAACCATTATCCACGTTAAGGGCAAGCACCTGTGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGACCATCTAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGTAGTTGGAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCCTTTTGGTCACCGTCGCCTTCATTATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.117)

[0556]克隆20C5.2CD28T CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0557]EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFI

[0554]

CN 109641008 A

说　明　书

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IFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.118)

[0558]克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0559]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAGATCGTCATGACACAGAGTCCAGCTACCCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAGAGCCACCCTGTCCTGTAGGGCTAGTCAGAGTGTGTCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAACAGAAGCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCTTATCTTCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAGGCATCCCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGCAGTGGCACCGGGTTCACTCTCACGATCTCATCCCTGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAGTACGATACATGGCCCTTCACCTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGATTTCAAGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGGGCGGGGGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAAGTACAGCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGTGGTTCAGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGAGTTGCGCAGCATCAGGATTCACATTCAGTTCTTATGGAATGCATTGGGTCAGACAGGCTCCCGGGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAGTCATTAGCTACGACGGAAGCGATAAGTACTATGTGGACTCAGTTAAAGGGAGATTTACTATCAGCCGCGACAATTCCAAAAACAGATTGTATTTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCGGAGGACACTGCTGTATATTACTGCGCACGAGAGAGATACTCCGGCCGAGACTATTGGGGCCAAGGAACATTGGTAACTGTGAGCTCCGCCGCAGCTATTGAGGTCATGTACCCCCCACCTTATCTCGATAATGAGAAGAGTAATGGGACTATAATTCACGTAAAGGGCAAACACCTGTGCCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCCAAGTAAGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGGTGGGAGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGTTGGTTACCGTGGCCTTTATCATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.119)[0560]克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链[0561](信号肽为粗体)

CN 109641008 A[0562]

说　明　书

75/78页

克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0564]GAGATCGTCATGACACAGAGTCCAGCTACCCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAGAGCCACCCTGTCCTGTAGGGCTAGTCAGAGTGTGTCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAACAGAAGCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCTTATCTTCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAGGCATCCCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGCAGTGGCACCGGGTTCACTCTCACGATCTCATCCCTGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAGTACGATACATGGCCCTTCACCTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGATTTCAAGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGGGCGGGGGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAAGTACAGCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGTGGTTCAGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGAGTTGCGCAGCATCAGGATTCACATTCAGTTCTTATGGAATGCATTGGGTCAGACAGGCTCCCGGGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAGTCATTAGCTACGACGGAAGCGATAAGTACTATGTGGACTCAGTTAAAGGGAGATTTACTATCAGCCGCGACAATTCCAAAAACAGATTGTATTTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCGGAGGACACTGCTGTATATTACTGCGCACGAGAGAGATACTCCGGCCGAGACTATTGGGGCCAAGGAACATTGGTAACTGTGAGCTCCGCCGCAGCTATTGAGGTCATGTACCCCCCACCTTATCTCGATAATGAGAAGAGTAATGGGACTATAATTCACGTAAAGGGCAAACACCTGTGCCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCCAAGTAAGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGGTGGGAGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGTTGGTTACCGTGGCCTTTATCATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.121)[0565]克隆20C5.2CD28CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0566]EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCA

[0563]

CN 109641008 A

说　明　书

76/78页

RERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.122)[0567]克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0568]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAAATAGTGATGACTCAGTCCCCGGCCACCCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCGAGCGACCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGAGTGTCAGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAGCAAAAGCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCTCATCTTCGGGGCATCAACTAGGGCCACCGGCATTCCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGCAGCGGCACCGGCTTCACCCTTACCATTAGCTCTCTGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTTACTATTGTCAGCAGTATGATACTTGGCCCTTTACCTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGACTTCAAGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAGGTGGTGGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAGGTCCAGTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGTGGTGCAGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGAGCTGTGCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCTAGCTATGGAATGCATTGGGTAAGACAGGCTCCCGGAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGGTCATTAGCTATGATGGATCTGATAAATACTATGTGGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCACAATCTCAAGAGACAATAGCAAAAATAGACTGTACCTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCCGAGGACACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCGAGAGATACAGCGGACGGGATTACTGGGGCCAGGGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCCGCTGCCGCCCTTAGCAACAGCATTATGTACTTTTCTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCCCAGCAAAGCCCACCACTACCCCGGCCCCCAGGCCGCCTACTCCTGCCCCCACTATCGCGTCTCAGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGGCCTGCCGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTACATACTCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGACATATATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCACATGTGGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTTATAACCCTCTATTGCAACCATAGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(SEQ ID NO.123)[0569]克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链[0570](信号肽为粗体)

CN 109641008 A

说　明　书

77/78页

[0571]

克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR DNA重链和轻链

[0573]GAAATAGTGATGACTCAGTCCCCGGCCACCCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCGAGCGACCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGAGTGTCAGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAGCAAAAGCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCTCATCTTCGGGGCATCAACTAGGGCCACCGGCATTCCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGCAGCGGCACCGGCTTCACCCTTACCATTAGCTCTCTGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTTACTATTGTCAGCAGTATGATACTTGGCCCTTTACCTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGACTTCAAGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAGGTGGTGGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAGGTCCAGTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGTGGTGCAGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGAGCTGTGCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCTAGCTATGGAATGCATTGGGTAAGACAGGCTCCCGGAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGGTCATTAGCTATGATGGATCTGATAAATACTATGTGGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCACAATCTCAAGAGACAATAGCAAAAATAGACTGTACCTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCCGAGGACACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCGAGAGATACAGCGGACGGGATTACTGGGGCCAGGGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCCGCTGCCGCCCTTAGCAACAGCATTATGTACTTTTCTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCCCAGCAAAGCCCACCACTACCCCGGCCCCCAGGCCGCCTACTCCTGCCCCCACTATCGCGTCTCAGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGGCCTGCCGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTACATACTCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGACATATATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCACATGTGGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTTATAACCCTCTATTGCAACCATAGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(SEQ ID NO.125)[0574]克隆20C5.2CD8CD3zeta CAR AA重链和轻链

[0575]EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGG

[0572]

CN 109641008 A

说　明　书

78/78页

AVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(SEQ ID NO.126)[0576]CAR信号肽DNA

[0577]ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCG(SEQ ID NO.127)

[0578]CAR信号肽:MALPVTALLLPLALLLHAARP(SEQ ID NO.128)[0579]scFv G4S接头DNA

[0580]GGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCC(SEQ ID NO.129)[0581]scFv G4s接头:GGGGSGGGGSGGGG S(SEQ ID NO.130)[0582]另外的G4S接头:GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO.145)[0583]scFv Whitlow接头DNA

[0584]GGGTCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGGG(SEQ ID NO.131)[0585]scFv Whitlow接头:GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ ID NO.132)[0586]CD28AA胞外域

[0587]MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLHKGLDSAVEVCVVYGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFCKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP(SEQ ID NO.133)[0588]GX2X3X4X5X6X7X8X9(SEQ ID NO:134)[0589]X1X2X3X4X5X6(SEQ ID NO:135)[0590]X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12DY(SEQ ID NO:136)[0591]X1ASQX5X6X7X8X9LX11(SEQ ID NO:137)[0592]X1ASX4X5X6X7(SEQ ID NO:138)[0593]QQX3X4X5X6PX8T(SEQ ID NO:139)[0594]CLL-1 AA(又称为CLEC12A)

[0595]MSEEVTYADLQFQNSSEMEKIPEIGKFGEKAPPAPSHVWRPAALFLTLLCLLLLIGLGVLASMFHVTLKIEMKKMNKLQNISEELQRNISLQLMSNMNISNKIRNLSTTLQTIATKLCRELYSKEQEHKCKPCPRRWIWHKDSCYFLSDDVQTWQESKMACAAQNASLLKINNKNALEFIKSQSRSYDYWLGLSPEEDSTRGMRVDNIINSSAWVIRNAPDLNNMYCGYINRLYVQYYHCTYKKRMICEKMANPVQLGSTYFREA(SEQ ID NO.140)[0596]4-1BB核酸序列(胞内域)

[0597]AAGCGCGGCAGGAAGAAGCTCCTCTACATTTTTAAGCAGCCTTTTATGAGGCCCGTACAGACAACACAGGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCAGATTTCCCGAGGAGGAGGAAGGTGGGTGCGAGCTG(SEQ ID NO.141)[0598]4-1BB AA(胞内域)

[0599]KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL(SEQ ID NO.142)[0600]OX40AA

[0601]RRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKI(SEQ ID NO.143)[0602]前导序列AA

[0603]MALPVTALLLPLALLLHAARP(SEQ ID NO:144)

CN 109641008 A

序　列　表

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序列表<110> 凯德药业股份有限公司<120> 嵌合受体及其方法和用途<130> K-1029.02<150> 62/317,068<151> 2016-04-01<160> 146<170> PatentIn version 3.5<210> 1<211> 294<212> DNA<213> 智人<400> 1cttgataatg aaaagtcaaa cggaacaatc attcacgtga agggcaagca cctctgtccg 60tcacccttgt tccctggtcc atccaagcca ttctgggtgt tggtcgtagt gggtggagtc 120ctcgcttgtt actctctgct cgtcaccgtg gcttttataa tcttctgggt tagatccaaa 180agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 240aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagc 294<210> 2<211> 98<212> PRT<213> 智人<400> 2Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys1 5 10 15His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp 20 25 30Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val 35 40 45Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 50 55 60Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr65 70 75 80Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 85 90 95Arg Ser<210> 3<211> 90

CN 109641008 A

序　列　表

2/123页

<212> DNA<213> 智人<400> 3cttgataatg aaaagtcaaa cggaacaatc attcacgtga agggcaagca cctctgtccg 60tcacccttgt tccctggtcc atccaagcca 90<210> 4<211> 30<212> PRT<213> 智人<400> 4Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys1 5 10 15His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro 20 25 30<210> 5<211> 81<212> DNA<213> 智人<400> 5ttctgggtgt tggtcgtagt gggtggagtc ctcgcttgtt actctctgct cgtcaccgtg 60gcttttataa tcttctgggt t 81<210> 6<211> 27<212> PRT<213> 智人<400> 6Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu1 5 10 15Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 20 25<210> 7<211> 123<212> DNA<213> 智人<400> 7agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 60ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 120agc 123<210> 8

CN 109641008 A

序　列　表

3/123页

<211> 41<212> PRT<213> 智人<400> 8Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr1 5 10 15Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 20 25 30Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser 35 40<210> 9<211> 336<212> DNA<213> 智人<400> 9agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg 60tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga 120cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat 180gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg 240agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac cagggactca gcactgctac gaaggatact 300tatgacgctc tccacatgca agccctgcca cctagg 336<210> 10<211> 112<212> PRT<213> 智人<400> 10Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly1 5 10 15Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 50 55 60Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg65 70 75 80Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

CN 109641008 A

序　列　表

4/123页

100 105 110<210> 11<211> 117<212> DNA<213> 智人<400> 11attgaggtga tgtatccacc gccttacctg gataacgaaa agagtaacgg taccatcatt 60cacgtgaaag gtaaacacct gtgtccttct cccctcttcc ccgggccatc aaagccc 117<210> 12<211> 39<212> PRT<213> 智人<400> 12Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn1 5 10 15Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu 20 25 30Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro 35<210> 13<211> 288<212> DNA<213> 智人<400> 13gctgcagcat tgagcaactc aataatgtat tttagtcact ttgtaccagt gttcttgccg 60gctaagccta ctaccacacc cgctccacgg ccacctaccc cagctcctac catcgcttca 120cagcctctgt ccctgcgccc agaggcttgc cgaccggccg cagggggcgc tgttcatacc 180agaggactgg atttcgcctg cgatatctat atctgggcac ccctggccgg aacctgcggc 240gtactcctgc tgtccctggt catcacgctc tattgtaatc acaggaac 288<210> 14<211> 96<212> PRT<213> 智人<400> 14Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro1 5 10 15Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro 20 25 30Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

CN 109641008 A

序　列　表

5/123页

35 40 45Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp 50 55 60Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly65 70 75 80Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn 85 90 95<210> 15<211> 366<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 15caggtgcagc tgcaggaatc cggaccgggg ctggtgaagc ccagcgagac tctgagtctc 60acgtgtacag tttctggagg tagcattagc tcctactatt ggtcatggat aaggcagccc 120cccgggaagg gattggaatg gatcggctat atttactaca gtgggagcac caattacaac 180ccctcactga agtctagagt tacaatcagc gttgacacct caaagaatca gttcagtttg 240aaattgtcta gcgtcacagc agctgataca gccgtctatt attgtgtttc tctggtctat 300tgcggtgggg attgttacag tggctttgac tattgggggc agggtactct ggttacagtt 360tcttcc 366<210> 16<211> 122<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 16Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

CN 109641008 A

序　列　表

6/123页

65 70 75 80Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val 85 90 95Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 100 105 110Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120<210> 17<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 17Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr1 5<210> 18<211> 5<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 18Tyr Tyr Ser Gly Ser1 5<210> 19<211> 14<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 19Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr1 5 10<210> 20<211> 324

CN 109641008 A

序　列　表

7/123页

<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 20gacatccagt tgacacagag cccgagttcc ttgtccgcct ccgtcgggga tagagtgtca 60tttacctgtc aggcctctca ggatattaat aactttctga attggtatca gcaaaagccc 120ggaaaggcac ccaagctgtt gatttacgac gccagtaacc tggagacagg cgtgccctcc 180cggtttagtg gtagcggaag cggtacggat tttaccttta ctatcagctc tctccaaccc 240gaagacattg caacctacta ttgtcaacaa tatggaaacc tgccttttac atttggcggc 300ggcaccaagg tggagattaa gcgg 324<210> 21<211> 108<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 21Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105<210> 22<211> 11<212> PRT<213> 人工序列<220>

CN 109641008 A

序　列　表

8/123页

<223> 人工序列的描述：合成肽<400> 22Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn1 5 10<210> 23<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 23Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr1 5<210> 24<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 24Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr1 5<210> 25<211> 1440<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 25atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtcc aactgcaaga aagcggaccc ggactggtga agccttctga gacacttagt 120ctgacgtgca cggtcagtgg cggctccatc tcctcctatt attggtcatg gatacgacaa 180cccccaggta agggcctgga atggattggc tatatctact attcaggaag cacgaactac 240aatcccagcc tgaagtcccg agtgacaatt tcagtagata ccagtaaaaa ccagttcagt 300cttaaactgt caagcgtgac agctgccgac accgctgtgt attactgcgt ctcactggtg 360

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序　列　表

9/123页

tattgtggag gggattgtta tagcgggttc gattattggg gacagggaac cctggtgact 420gtatcttccg gcggcggcgg ctcagggggt ggcggtagtg gcggtggggg ttccgatatt 480caactgacac aatcccccag ctcactcagc gccagcgtgg gggacagggt tagctttacc 540tgtcaagcct ctcaggatat aaataacttt ctgaactggt atcaacagaa gcctgggaag 600gcgcccaaac tcctgatcta tgatgcgtcc aacctggaaa ctggcgtgcc ttcacgcttt 660agcggctctg gcagtggtac agacttcact tttaccatct cttcacttca gccggaggac 720atcgccacat attactgtca acagtacgga aacttgccct ttacttttgg aggcggcacc 780aaagttgaaa tcaaaagggc cgctgccctg gataacgaaa agagcaatgg gactataata 840catgttaaag gaaaacacct gtgtccatct cccctgttcc ctggaccgtc aaagccattt 900tgggtgctcg tggttgtcgg tggcgttctc gcctgttata gcttgctggt gacagtagcc 960ttcattatct tttgggtgag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440<210> 26<211> 479<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 26Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr65 70 75 80Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys 85 90 95Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

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序　列　表

10/123页

100 105 110Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser 115 120 125Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly 130 135 140Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile145 150 155 160Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg 165 170 175Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn 180 185 190Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp 195 200 205Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly 210 215 220Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp225 230 235 240Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe 245 250 255Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn 260 265 270Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys 275 280 285Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val 290 295 300Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala305 310 315 320Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser 325 330 335Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His 340 345 350Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg 355 360 365Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln 370 375 380Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp385 390 395 400Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro 405 410 415

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序　列　表

11/123页

Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp 420 425 430Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg 435 440 445Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr 450 455 460Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg465 470 475<210> 27<211> 1374<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 27caggtccaac tgcaagaaag cggacccgga ctggtgaagc cttctgagac acttagtctg 60acgtgcacgg tcagtggcgg ctccatctcc tcctattatt ggtcatggat acgacaaccc 120ccaggtaagg gcctggaatg gattggctat atctactatt caggaagcac gaactacaat 180cccagcctga agtcccgagt gacaatttca gtagatacca gtaaaaacca gttcagtctt 240aaactgtcaa gcgtgacagc tgccgacacc gctgtgtatt actgcgtctc actggtgtat 300tgtggagggg attgttatag cgggttcgat tattggggac agggaaccct ggtgactgta 360tcttccggcg gcggcggctc agggggtggc ggtagtggcg gtgggggttc cgatattcaa 420ctgacacaat cccccagctc actcagcgcc agcgtggggg acagggttag ctttacctgt 480caagcctctc aggatataaa taactttctg aactggtatc aacagaagcc tgggaaggcg 540cccaaactcc tgatctatga tgcgtccaac ctggaaactg gcgtgccttc acgctttagc 600ggctctggca gtggtacaga cttcactttt accatctctt cacttcagcc ggaggacatc 660gccacatatt actgtcaaca gtacggaaac ttgcccttta cttttggagg cggcaccaaa 720gttgaaatca aaagggccgc tgccctggat aacgaaaaga gcaatgggac tataatacat 780gttaaaggaa aacacctgtg tccatctccc ctgttccctg gaccgtcaaa gccattttgg 840gtgctcgtgg ttgtcggtgg cgttctcgcc tgttatagct tgctggtgac agtagccttc 900attatctttt gggtgagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 960actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1020ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1080cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1140ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1200caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1260ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1320actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc tagg 1374

CN 109641008 A

序　列　表

12/123页

<210> 28<211> 458<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 28Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu65 70 75 80Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val 85 90 95Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 100 105 110Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser 130 135 140Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys145 150 155 160Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu 180 185 190Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 195 200 205Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr 210 215 220Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys225 230 235 240Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly

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序　列　表

13/123页

245 250 255Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 260 265 270Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 275 280 285Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 290 295 300Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met305 310 315 320Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 325 330 335Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 340 345 350Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 355 360 365Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 370 375 380Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro385 390 395 400Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 405 410 415Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 420 425 430Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 435 440 445Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455<210> 29<211> 1467<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 29atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agctgcagga atccggaccg gggctggtga agcccagcga gactctgagt 120ctcacgtgta cagtttctgg aggtagcatt agctcctact attggtcatg gataaggcag 180ccccccggga agggattgga atggatcggc tatatttact acagtgggag caccaattac 240

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序　列　表

14/123页

aacccctcac tgaagtctag agttacaatc agcgttgaca cctcaaagaa tcagttcagt 300ttgaaattgt ctagcgtcac agcagctgat acagccgtct attattgtgt ttctctggtc 360tattgcggtg gggattgtta cagtggcttt gactattggg ggcagggtac tctggttaca 420gtttcttccg gggggggagg ctctgggggc ggaggctcag gtggtggagg cagcgacatc 480cagttgacac agagcccgag ttccttgtcc gcctccgtcg gggatagagt gtcatttacc 540tgtcaggcct ctcaggatat taataacttt ctgaattggt atcagcaaaa gcccggaaag 600gcacccaagc tgttgattta cgacgccagt aacctggaga caggcgtgcc ctcccggttt 660agtggtagcg gaagcggtac ggattttacc tttactatca gctctctcca acccgaagac 720attgcaacct actattgtca acaatatgga aacctgcctt ttacatttgg cggcggcacc 780aaggtggaga ttaagcgggc ggcagctatt gaggtgatgt atccaccgcc ttacctggat 840aacgaaaaga gtaacggtac catcattcac gtgaaaggta aacacctgtg tccttctccc 900ctcttccccg ggccatcaaa gcccttctgg gttcttgtgg tcgtgggagg cgtgcttgct 960tgttattctc tgctcgttac cgtggcgttt atcatttttt gggttagatc caaaagaagc 1020cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa 1080cactaccagc cttacgcacc acctagagat ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt 1140tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag cagggccaga accaactgta taacgagctc 1200aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag 1260atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc caggagggtc tctataatga gctgcagaag 1320gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa 1380gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc actgctacga aggatactta tgacgctctc 1440cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1467<210> 30<211> 488<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 30Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr65 70 75 80

100

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序　列　表

15/123页

Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys 85 90 95Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala 100 105 110Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser 115 120 125Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly 130 135 140Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile145 150 155 160Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg 165 170 175Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn 180 185 190Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp 195 200 205Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly 210 215 220Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp225 230 235 240Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe 245 250 255Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val 260 265 270Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile 275 280 285Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly 290 295 300Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala305 310 315 320Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg 325 330 335Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro 340 345 350Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro 355 360 365Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 370 375 380Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu

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序　列　表

16/123页

385 390 395 400Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 405 410 415Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 420 425 430Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 435 440 445Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 450 455 460Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu465 470 475 480His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485<210> 31<211> 1401<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 31caggtgcagc tgcaggaatc cggaccgggg ctggtgaagc ccagcgagac tctgagtctc 60acgtgtacag tttctggagg tagcattagc tcctactatt ggtcatggat aaggcagccc 120cccgggaagg gattggaatg gatcggctat atttactaca gtgggagcac caattacaac 180ccctcactga agtctagagt tacaatcagc gttgacacct caaagaatca gttcagtttg 240aaattgtcta gcgtcacagc agctgataca gccgtctatt attgtgtttc tctggtctat 300tgcggtgggg attgttacag tggctttgac tattgggggc agggtactct ggttacagtt 360tcttccgggg ggggaggctc tgggggcgga ggctcaggtg gtggaggcag cgacatccag 420ttgacacaga gcccgagttc cttgtccgcc tccgtcgggg atagagtgtc atttacctgt 480caggcctctc aggatattaa taactttctg aattggtatc agcaaaagcc cggaaaggca 540cccaagctgt tgatttacga cgccagtaac ctggagacag gcgtgccctc ccggtttagt 600ggtagcggaa gcggtacgga ttttaccttt actatcagct ctctccaacc cgaagacatt 660gcaacctact attgtcaaca atatggaaac ctgcctttta catttggcgg cggcaccaag 720gtggagatta agcgggcggc agctattgag gtgatgtatc caccgcctta cctggataac 780gaaaagagta acggtaccat cattcacgtg aaaggtaaac acctgtgtcc ttctcccctc 840ttccccgggc catcaaagcc cttctgggtt cttgtggtcg tgggaggcgt gcttgcttgt 900tattctctgc tcgttaccgt ggcgtttatc attttttggg ttagatccaa aagaagccgc 960ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1020taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1080

102

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序　列　表

17/123页

agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1140ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1200ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1260aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1320cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1380atgcaagccc tgccacctag g 1401<210> 32<211> 467<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 32Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu65 70 75 80Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val 85 90 95Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 100 105 110Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser 130 135 140Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys145 150 155 160Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu 180 185 190Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

103

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序　列　表

18/123页

195 200 205Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr 210 215 220Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys225 230 235 240Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro 245 250 255Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly 260 265 270Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe 275 280 285Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu 290 295 300Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg305 310 315 320Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 325 330 335Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala 340 345 350Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 355 360 365Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 370 375 380Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met385 390 395 400Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 405 410 415Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys 420 425 430Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 435 440 445Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu 450 455 460Pro Pro Arg465<210> 33<211> 1548<212> DNA<213> 人工序列

104

CN 109641008 A

序　列　表

19/123页

<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 33atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc aattgcaaga gtccggcccc ggactcgtta aacccagtga gacgcttagc 120ctgacctgta ccgtctcagg gggcagcatc tcctcttatt actggagctg gatcaggcag 180cctccaggaa aaggccttga atggattggg tacatctact actctggctc aacaaattat 240aatccatccc tgaagtcccg cgtgactatc tctgtggaca ccagcaagaa tcagttttca 300ctgaagttgt ctagtgttac cgcggccgac accgccgtat actactgtgt gtctcttgtg 360tactgtggcg gcgactgcta ttccgggttc gactactggg gccaagggac tctggtaacc 420gtgtcctcag gcggcggcgg gtcaggagga ggcggcagtg gaggtggcgg ctccgacatc 480cagctgacac aatcaccatc ttccctttca gcttcagtcg gggacagagt gtccttcaca 540tgccaggcca gccaggatat caataacttc ctgaactggt accaacagaa acccggaaag 600gctccaaagc tcctgatcta tgatgcttcc aacctggaga ccggcgtgcc ctccaggttc 660agtggttcag gatcaggcac tgactttacg ttcaccatat ccagtcttca gcccgaagac 720attgcaacct attactgcca acaatacggg aaccttccct ttacattcgg aggcggcacc 780aaggtggaaa tcaaaagggc tgcagcattg agcaactcaa taatgtattt tagtcacttt 840gtaccagtgt tcttgccggc taagcctact accacacccg ctccacggcc acctacccca 900gctcctacca tcgcttcaca gcctctgtcc ctgcgcccag aggcttgccg accggccgca 960gggggcgctg ttcataccag aggactggat ttcgcctgcg atatctatat ctgggcaccc 1020ctggccggaa cctgcggcgt actcctgctg tccctggtca tcacgctcta ttgtaatcac 1080aggaacagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1140cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1200tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1260aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1320cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1380ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1440ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1500aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1548<210> 34<211> 515<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 34Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

105

CN 109641008 A

序　列　表

20/123页

1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr65 70 75 80Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys 85 90 95Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala 100 105 110Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser 115 120 125Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly 130 135 140Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile145 150 155 160Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg 165 170 175Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn 180 185 190Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp 195 200 205Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly 210 215 220Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp225 230 235 240Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe 245 250 255Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn 260 265 270Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys 275 280 285Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile 290 295 300Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala305 310 315 320

106

CN 109641008 A

序　列　表

21/123页

Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr 325 330 335Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu 340 345 350Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg 355 360 365Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 370 375 380Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala385 390 395 400Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 405 410 415Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 420 425 430Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met 435 440 445Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 450 455 460Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys465 470 475 480Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 485 490 495Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu 500 505 510Pro Pro Arg 515<210> 35<211> 1482<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 35caggtgcaat tgcaagagtc cggccccgga ctcgttaaac ccagtgagac gcttagcctg 60acctgtaccg tctcaggggg cagcatctcc tcttattact ggagctggat caggcagcct 120ccaggaaaag gccttgaatg gattgggtac atctactact ctggctcaac aaattataat 180ccatccctga agtcccgcgt gactatctct gtggacacca gcaagaatca gttttcactg 240aagttgtcta gtgttaccgc ggccgacacc gccgtatact actgtgtgtc tcttgtgtac 300

107

CN 109641008 A

序　列　表

22/123页

tgtggcggcg actgctattc cgggttcgac tactggggcc aagggactct ggtaaccgtg 360tcctcaggcg gcggcgggtc aggaggaggc ggcagtggag gtggcggctc cgacatccag 420ctgacacaat caccatcttc cctttcagct tcagtcgggg acagagtgtc cttcacatgc 480caggccagcc aggatatcaa taacttcctg aactggtacc aacagaaacc cggaaaggct 540ccaaagctcc tgatctatga tgcttccaac ctggagaccg gcgtgccctc caggttcagt 600ggttcaggat caggcactga ctttacgttc accatatcca gtcttcagcc cgaagacatt 660gcaacctatt actgccaaca atacgggaac cttcccttta cattcggagg cggcaccaag 720gtggaaatca aaagggctgc agcattgagc aactcaataa tgtattttag tcactttgta 780ccagtgttct tgccggctaa gcctactacc acacccgctc cacggccacc taccccagct 840cctaccatcg cttcacagcc tctgtccctg cgcccagagg cttgccgacc ggccgcaggg 900ggcgctgttc ataccagagg actggatttc gcctgcgata tctatatctg ggcacccctg 960gccggaacct gcggcgtact cctgctgtcc ctggtcatca cgctctattg taatcacagg 1020aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1080cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1140cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1200caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1260agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1320tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1380gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1440gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta gg 1482<210> 36<211> 494<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 36Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu65 70 75 80Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

108

CN 109641008 A

序　列　表

23/123页

85 90 95Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 100 105 110Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser 130 135 140Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys145 150 155 160Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu 180 185 190Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 195 200 205Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr 210 215 220Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys225 230 235 240Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe 245 250 255Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro 260 265 270Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu 275 280 285Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His 290 295 300Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu305 310 315 320Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr 325 330 335Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 340 345 350Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 355 360 365Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 370 375 380Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn385 390 395 400

109

CN 109641008 A

序　列　表

24/123页

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 405 410 415Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 420 425 430Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 435 440 445Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 450 455 460Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys465 470 475 480Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490<210> 37<211> 1440<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 37atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggatatcc agctcacgca atccccctca agcttgagtg cctccgtggg cgaccgggtg 120tccttcacat gtcaggcaag ccaagacata aataatttcc tgaattggta ccaacaaaaa 180cccggcaagg ctcccaaact cctgatttat gatgcctcca atctggagac cggggtccct 240tctagattca gcggaagtgg cagcggcaca gactttacat ttactatctc ttctctgcaa 300ccagaggaca tcgccacata ctattgccag caatacggca atctgccctt caccttcgga 360ggcggaacca aggtagaaat taaaaggggc ggtggaggct ccggaggggg gggctctggc 420ggagggggct cccaagtaca attgcaggag tcagggcctg gactcgtgaa gccttcagaa 480actttgtcac tgacatgtac agtgtccggc ggaagcattt ccagttacta ttggtcctgg 540attagacagc cacccggcaa aggactggaa tggattggat atatctacta ctctggatct 600acaaactata atcccagcct caaatccagg gtcactatta gtgtggatac atcaaagaat 660cagttctcct tgaagctgag ctcagtcact gctgccgaca ccgcagtgta ctattgtgtg 720agcctggtct actgcggcgg agattgctac agcggtttcg attactgggg ccagggcacc 780ctggttaccg ttagttccgc ggctgctctt gataacgaga agtccaacgg tacgattatc 840cacgttaagg gtaagcacct ttgccctagc ccgctgttcc caggccccag taagcccttt 900tgggtcctcg ttgtggtagg tggggtactc gcctgctact ccctgctcgt cactgtcgca 960ttcatcatct tctgggtcag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140

110

CN 109641008 A

序　列　表

25/123页

cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440<210> 38<211> 458<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 38Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln 115 120 125Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr 130 135 140Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile145 150 155 160Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr 165 170 175Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile 180 185 190Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val 195 200 205

111

CN 109641008 A

序　列　表

26/123页

Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys 210 215 220Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu225 230 235 240Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 245 250 255Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 260 265 270Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 275 280 285Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 290 295 300Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met305 310 315 320Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 325 330 335Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 340 345 350Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 355 360 365Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 370 375 380Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro385 390 395 400Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 405 410 415Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 420 425 430Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 435 440 445Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455<210> 39<211> 1374<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

112

CN 109641008 A

序　列　表

27/123页

<400> 39gatatccagc tcacgcaatc cccctcaagc ttgagtgcct ccgtgggcga ccgggtgtcc 60ttcacatgtc aggcaagcca agacataaat aatttcctga attggtacca acaaaaaccc 120ggcaaggctc ccaaactcct gatttatgat gcctccaatc tggagaccgg ggtcccttct 180agattcagcg gaagtggcag cggcacagac tttacattta ctatctcttc tctgcaacca 240gaggacatcg ccacatacta ttgccagcaa tacggcaatc tgcccttcac cttcggaggc 300ggaaccaagg tagaaattaa aaggggcggt ggaggctccg gagggggggg ctctggcgga 360gggggctccc aagtacaatt gcaggagtca gggcctggac tcgtgaagcc ttcagaaact 420ttgtcactga catgtacagt gtccggcgga agcatttcca gttactattg gtcctggatt 480agacagccac ccggcaaagg actggaatgg attggatata tctactactc tggatctaca 540aactataatc ccagcctcaa atccagggtc actattagtg tggatacatc aaagaatcag 600ttctccttga agctgagctc agtcactgct gccgacaccg cagtgtacta ttgtgtgagc 660ctggtctact gcggcggaga ttgctacagc ggtttcgatt actggggcca gggcaccctg 720gttaccgtta gttccgcggc tgctcttgat aacgagaagt ccaacggtac gattatccac 780gttaagggta agcacctttg ccctagcccg ctgttcccag gccccagtaa gcccttttgg 840gtcctcgttg tggtaggtgg ggtactcgcc tgctactccc tgctcgtcac tgtcgcattc 900atcatcttct gggtcagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 960actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1020ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1080cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1140ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1200caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1260ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1320actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc tagg 1374<210> 40<211> 458<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 40Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

113

CN 109641008 A

序　列　表

28/123页

50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln 115 120 125Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr 130 135 140Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile145 150 155 160Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr 165 170 175Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile 180 185 190Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val 195 200 205Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys 210 215 220Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu225 230 235 240Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 245 250 255Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 260 265 270Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 275 280 285Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 290 295 300Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met305 310 315 320Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 325 330 335Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 340 345 350Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 355 360 365

114

CN 109641008 A

序　列　表

29/123页

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 370 375 380Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro385 390 395 400Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 405 410 415Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 420 425 430Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 435 440 445Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455<210> 41<211> 1467<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 41atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggatatcc agctgaccca gtctccatcc tctttgagtg cctccgtggg tgaccgcgtc 120tctttcactt gccaagccag ccaagacatc aacaactttc tgaattggta ccagcagaaa 180ccaggcaaag caccaaagct cctcatctac gacgcctcca acctggaaac cggggtgccc 240agcaggttta gcgggagcgg ttctggcacg gattttacgt tcaccatctc ctctctgcag 300cccgaggata tagctactta ttactgtcag cagtacggga atctgccatt tacttttggg 360ggtggaacta aggtggaaat caaaaggggc ggcgggggaa gcgggggcgg gggctcaggt 420ggcggaggga gccaggtgca actccaggaa agtggcccag gattggtgaa gcccagcgag 480accctttccc ttacttgtac tgttagcgga ggcagcataa gcagctacta ttggtcctgg 540atcagacagc caccagggaa agggcttgaa tggattggct acatttacta ttccgggtcc 600accaactaca acccatccct caagtcccgc gtgacaattt ccgtcgacac aagcaagaac 660cagttctccc tgaaacttag tagcgtcact gctgcagata cagcagtgta ctattgtgtc 720agccttgtct actgtggcgg cgactgctac agtggctttg attactgggg acagggcacg 780ctcgtgacag tgtccagcgc tgcggctatc gaggtaatgt atccgccacc gtatctggac 840aacgagaagt ctaatgggac aatcattcac gtgaagggga agcacctgtg tccatccccc 900ctgtttccgg gtcccagtaa acccttctgg gtgcttgttg tcgttggcgg ggtgctggcc 960tgctattccc tgctggtgac cgtcgcgttt attattttct gggttagatc caaaagaagc 1020cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa 1080cactaccagc cttacgcacc acctagagat ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt 1140

115

CN 109641008 A

序　列　表

30/123页

tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag cagggccaga accaactgta taacgagctc 1200aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag 1260atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc caggagggtc tctataatga gctgcagaag 1320gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa 1380gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc actgctacga aggatactta tgacgctctc 1440cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1467<210> 42<211> 488<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 42Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 20 25 30Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln 35 40 45Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala 50 55 60Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro65 70 75 80Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile 85 90 95Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu145 150 155 160Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 165 170 175Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 180 185 190Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

116

CN 109641008 A

序　列　表

31/123页

195 200 205Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 210 215 220Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val225 230 235 240Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 245 250 255Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val 260 265 270Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile 275 280 285Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly 290 295 300Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala305 310 315 320Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg 325 330 335Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro 340 345 350Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro 355 360 365Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 370 375 380Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu385 390 395 400Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly 405 410 415Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu 420 425 430Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 435 440 445Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly 450 455 460Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu465 470 475 480His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485<210> 43<211> 1401

117

CN 109641008 A

序　列　表

32/123页

<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 43gatatccagc tgacccagtc tccatcctct ttgagtgcct ccgtgggtga ccgcgtctct 60ttcacttgcc aagccagcca agacatcaac aactttctga attggtacca gcagaaacca 120ggcaaagcac caaagctcct catctacgac gcctccaacc tggaaaccgg ggtgcccagc 180aggtttagcg ggagcggttc tggcacggat tttacgttca ccatctcctc tctgcagccc 240gaggatatag ctacttatta ctgtcagcag tacgggaatc tgccatttac ttttgggggt 300ggaactaagg tggaaatcaa aaggggcggc gggggaagcg ggggcggggg ctcaggtggc 360ggagggagcc aggtgcaact ccaggaaagt ggcccaggat tggtgaagcc cagcgagacc 420ctttccctta cttgtactgt tagcggaggc agcataagca gctactattg gtcctggatc 480agacagccac cagggaaagg gcttgaatgg attggctaca tttactattc cgggtccacc 540aactacaacc catccctcaa gtcccgcgtg acaatttccg tcgacacaag caagaaccag 600ttctccctga aacttagtag cgtcactgct gcagatacag cagtgtacta ttgtgtcagc 660cttgtctact gtggcggcga ctgctacagt ggctttgatt actggggaca gggcacgctc 720gtgacagtgt ccagcgctgc ggctatcgag gtaatgtatc cgccaccgta tctggacaac 780gagaagtcta atgggacaat cattcacgtg aaggggaagc acctgtgtcc atcccccctg 840tttccgggtc ccagtaaacc cttctgggtg cttgttgtcg ttggcggggt gctggcctgc 900tattccctgc tggtgaccgt cgcgtttatt attttctggg ttagatccaa aagaagccgc 960ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1020taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1080agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1140ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1200ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1260aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1320cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1380atgcaagccc tgccacctag g 1401<210> 44<211> 467<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 44Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

118

CN 109641008 A

序　列　表

33/123页

1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln 115 120 125Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr 130 135 140Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile145 150 155 160Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr 165 170 175Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile 180 185 190Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val 195 200 205Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys 210 215 220Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu225 230 235 240Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro 245 250 255Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly 260 265 270Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe 275 280 285Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu 290 295 300Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg305 310 315 320

119

CN 109641008 A

序　列　表

34/123页

Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 325 330 335Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala 340 345 350Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 355 360 365Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 370 375 380Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met385 390 395 400Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 405 410 415Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys 420 425 430Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 435 440 445Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu 450 455 460Pro Pro Arg465<210> 45<211> 1548<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 45atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggacattc aattgaccca gtcccctagc agtctctcag caagtgtggg agatagggtg 120tcattcacct gtcaggcttc acaggacatc aacaacttcc tcaattggta tcagcagaag 180ccagggaagg caccaaagct gctcatatat gacgcttcaa accttgaaac cggagtacct 240agccgcttca gcggaagcgg atcagggact gacttcactt ttaccatctc ttcactgcag 300cccgaagaca tcgccacata ctactgccag cagtacggaa acttgccttt tacatttggg 360ggcggcacca aagtggagat taagcgaggg ggaggcggct caggaggcgg tggctccgga 420ggcgggggtt cccaggtcca gctccaggaa tccggcccag gtctggttaa gcccagtgaa 480actttgtccc tcacgtgtac tgtgagcggt ggttcaatct cctcatacta ttggtcttgg 540atacggcaac ctcctggaaa gggcctcgag tggatcggct atatctacta tagtggctcc 600actaattaca acccttccct caagtccaga gtcaccattt ccgtggacac atctaagaac 660

120

CN 109641008 A

序　列　表

35/123页

cagttcagtc tgaagttgtc cagcgttaca gccgcagaca cagccgttta ttactgtgtg 720tctcttgttt actgcggggg agactgttat agcggcttcg attactgggg ccagggcacc 780ttggtcacag tctcttccgc ggccgccctc tctaacagta ttatgtactt ttctcatttt 840gtacccgtgt tccttcccgc taagccaact actaccccgg ccccacggcc gcctacccct 900gcacccacaa tagccagtca gcctttgagc ctgagacctg aggcttgtcg gccggctgct 960gggggtgcag tgcacacacg aggtcttgat tttgcttgcg acatatacat ctgggcccct 1020ctggccggga cctgtggggt gctgcttctg agcttggtca tcacgctcta ttgcaaccat 1080cgcaacagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1140cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1200tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1260aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1320cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1380ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1440ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1500aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1548<210> 46<211> 515<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 46Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 20 25 30Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln 35 40 45Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala 50 55 60Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro65 70 75 80Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile 85 90 95Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125

121

CN 109641008 A

序　列　表

36/123页

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu145 150 155 160Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 165 170 175Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 180 185 190Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 195 200 205Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 210 215 220Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val225 230 235 240Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp 245 250 255Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn 260 265 270Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys 275 280 285Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile 290 295 300Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala305 310 315 320Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr 325 330 335Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu 340 345 350Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg 355 360 365Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 370 375 380Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala385 390 395 400Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 405 410 415Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg 420 425 430Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

122

CN 109641008 A

序　列　表

37/123页

435 440 445Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 450 455 460Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys465 470 475 480Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 485 490 495Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu 500 505 510Pro Pro Arg 515<210> 47<211> 1482<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 47gacattcaat tgacccagtc ccctagcagt ctctcagcaa gtgtgggaga tagggtgtca 60ttcacctgtc aggcttcaca ggacatcaac aacttcctca attggtatca gcagaagcca 120gggaaggcac caaagctgct catatatgac gcttcaaacc ttgaaaccgg agtacctagc 180cgcttcagcg gaagcggatc agggactgac ttcactttta ccatctcttc actgcagccc 240gaagacatcg ccacatacta ctgccagcag tacggaaact tgccttttac atttgggggc 300ggcaccaaag tggagattaa gcgaggggga ggcggctcag gaggcggtgg ctccggaggc 360gggggttccc aggtccagct ccaggaatcc ggcccaggtc tggttaagcc cagtgaaact 420ttgtccctca cgtgtactgt gagcggtggt tcaatctcct catactattg gtcttggata 480cggcaacctc ctggaaaggg cctcgagtgg atcggctata tctactatag tggctccact 540aattacaacc cttccctcaa gtccagagtc accatttccg tggacacatc taagaaccag 600ttcagtctga agttgtccag cgttacagcc gcagacacag ccgtttatta ctgtgtgtct 660cttgtttact gcgggggaga ctgttatagc ggcttcgatt actggggcca gggcaccttg 720gtcacagtct cttccgcggc cgccctctct aacagtatta tgtacttttc tcattttgta 780cccgtgttcc ttcccgctaa gccaactact accccggccc cacggccgcc tacccctgca 840cccacaatag ccagtcagcc tttgagcctg agacctgagg cttgtcggcc ggctgctggg 900ggtgcagtgc acacacgagg tcttgatttt gcttgcgaca tatacatctg ggcccctctg 960gccgggacct gtggggtgct gcttctgagc ttggtcatca cgctctattg caaccatcgc 1020aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1080cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1140cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1200

123

CN 109641008 A

序　列　表

38/123页

caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1260agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1320tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1380gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1440gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta gg 1482<210> 48<211> 494<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 48Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln 115 120 125Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr 130 135 140Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile145 150 155 160Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr 165 170 175Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile 180 185 190Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val 195 200 205

124

CN 109641008 A

序　列　表

39/123页

Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys 210 215 220Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu225 230 235 240Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe 245 250 255Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro 260 265 270Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu 275 280 285Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His 290 295 300Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu305 310 315 320Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr 325 330 335Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 340 345 350Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 355 360 365Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 370 375 380Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn385 390 395 400Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 405 410 415Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 420 425 430Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 435 440 445Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 450 455 460Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys465 470 475 480Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490<210> 49<211> 372<212> DNA

125

CN 109641008 A

序　列　表

40/123页

<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 49caggtacagc tgcaggaatc tgggcccgga cttgtcaagc caagtcagac actttctctt 60acatgtaccg tgagcggcgg aagtataagc agtggaggct tttactggtc ttggatacgg 120cagcacccag gcaaaggctt ggagtggatt ggatacattc atcattcagg atctacacac 180tataatccat cccttaagtc ccgggtcacc attagcattg atacgtctaa gaatctgttc 240agtctcaggc tgtcctccgt cactgctgcc gacacagccg tgtactactg cgcctccttg 300gtttactgcg gaggcgactg ttatagcggc tttgattatt gggggcaggg gaccctcgta 360accgtgagct ct 372<210> 50<211> 124<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 50Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly 20 25 30Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser 50 55 60Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe65 70 75 80Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp 100 105 110Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120<210> 51<211> 9<212> PRT

126

CN 109641008 A

序　列　表

41/123页

<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 51Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe1 5<210> 52<211> 5<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 52His His Ser Gly Ser1 5<210> 53<211> 14<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 53Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr1 5 10<210> 54<211> 324<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 54gatatccagc tcactcaaag cccctctagt ctctctgcct cagtggggga tcgggtcagt 60tttacttgtc aagcttcaca ggatatcaac aacttcctta attggtatca gcagaagcca 120ggaaaagcac ccaagctgct catctatgat gcctcaaatt tggagacggg tgttcccagt 180cgattctctg ggtcagggtc cgggaccgac tttacgttta cgatctcctc tctgcagccc 240

127

CN 109641008 A

序　列　表

42/123页

gaagacatcg ccacatacta ttgtcaacag tacggcaact tgcctttcac atttgggggc 300gggactaagg ttgaaatcaa gagg 324<210> 55<211> 108<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 55Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro65 70 75 80Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105<210> 56<211> 11<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 56Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn1 5 10<210> 57<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220>

128

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序　列　表

43/123页

<223> 人工序列的描述：合成肽<400> 57Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr1 5<210> 58<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 58Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr1 5<210> 59<211> 1446<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 59atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtac agctgcagga atctgggccc ggacttgtca agccaagtca gacactttct 120cttacatgta ccgtgagcgg cggaagtata agcagtggag gcttttactg gtcttggata 180cggcagcacc caggcaaagg cttggagtgg attggataca ttcatcattc aggatctaca 240cactataatc catcccttaa gtcccgggtc accattagca ttgatacgtc taagaatctg 300ttcagtctca ggctgtcctc cgtcactgct gccgacacag ccgtgtacta ctgcgcctcc 360ttggtttact gcggaggcga ctgttatagc ggctttgatt attgggggca ggggaccctc 420gtaaccgtga gctctggagg gggtgggagc gggggaggag gttcaggggg gggcggctcc 480gatatccagc tcactcaaag cccctctagt ctctctgcct cagtggggga tcgggtcagt 540tttacttgtc aagcttcaca ggatatcaac aacttcctta attggtatca gcagaagcca 600ggaaaagcac ccaagctgct catctatgat gcctcaaatt tggagacggg tgttcccagt 660cgattctctg ggtcagggtc cgggaccgac tttacgttta cgatctcctc tctgcagccc 720gaagacatcg ccacatacta ttgtcaacag tacggcaact tgcctttcac atttgggggc 780gggactaagg ttgaaatcaa gagggccgct gcactggaca atgagaagtc caacggcacc 840atcatccacg tgaagggcaa gcacctgtgc cctagtcctc tgttcccagg cccatccaaa 900cctttttggg ttcttgttgt ggtcgggggg gtgctggcct gctattctct gctggtcacg 960

129

CN 109641008 A

序　列　表

44/123页

gtggccttca taattttctg ggttagatcc aaaagaagcc gcctgctcca tagcgattac 1020atgaatatga ctccacgccg ccctggcccc acaaggaaac actaccagcc ttacgcacca 1080cctagagatt tcgctgccta tcggagcagg gtgaagtttt ccagatctgc agatgcacca 1140gcgtatcagc agggccagaa ccaactgtat aacgagctca acctgggacg cagggaagag 1200tatgacgttt tggacaagcg cagaggacgg gaccctgaga tgggtggcaa accaagacga 1260aaaaaccccc aggagggtct ctataatgag ctgcagaagg ataagatggc tgaagcctat 1320tctgaaatag gcatgaaagg agagcggaga aggggaaaag ggcacgacgg tttgtaccag 1380ggactcagca ctgctacgaa ggatacttat gacgctctcc acatgcaagc cctgccacct 1440aggtaa 1446<210> 60<211> 481<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 60Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro 50 55 60Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr65 70 75 80His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr 85 90 95Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp 100 105 110Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys 115 120 125Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 130 135 140Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser145 150 155 160Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 165 170 175

130

CN 109641008 A

序　列　表

45/123页

Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 180 185 190Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 195 200 205Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 210 215 220Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro225 230 235 240Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 245 250 255Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu 260 265 270Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His 275 280 285Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val 290 295 300Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr305 310 315 320Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu 325 330 335His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg 340 345 350Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg 355 360 365Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln 370 375 380Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu385 390 395 400Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly 405 410 415Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln 420 425 430Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu 435 440 445Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr 450 455 460Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro465 470 475 480Arg

131

CN 109641008 A

序　列　表

46/123页

<210> 61<211> 1380<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 61caggtacagc tgcaggaatc tgggcccgga cttgtcaagc caagtcagac actttctctt 60acatgtaccg tgagcggcgg aagtataagc agtggaggct tttactggtc ttggatacgg 120cagcacccag gcaaaggctt ggagtggatt ggatacattc atcattcagg atctacacac 180tataatccat cccttaagtc ccgggtcacc attagcattg atacgtctaa gaatctgttc 240agtctcaggc tgtcctccgt cactgctgcc gacacagccg tgtactactg cgcctccttg 300gtttactgcg gaggcgactg ttatagcggc tttgattatt gggggcaggg gaccctcgta 360accgtgagct ctggaggggg tgggagcggg ggaggaggtt cagggggggg cggctccgat 420atccagctca ctcaaagccc ctctagtctc tctgcctcag tgggggatcg ggtcagtttt 480acttgtcaag cttcacagga tatcaacaac ttccttaatt ggtatcagca gaagccagga 540aaagcaccca agctgctcat ctatgatgcc tcaaatttgg agacgggtgt tcccagtcga 600ttctctgggt cagggtccgg gaccgacttt acgtttacga tctcctctct gcagcccgaa 660gacatcgcca catactattg tcaacagtac ggcaacttgc ctttcacatt tgggggcggg 720actaaggttg aaatcaagag ggccgctgca ctggacaatg agaagtccaa cggcaccatc 780atccacgtga agggcaagca cctgtgccct agtcctctgt tcccaggccc atccaaacct 840ttttgggttc ttgttgtggt cgggggggtg ctggcctgct attctctgct ggtcacggtg 900gccttcataa ttttctgggt tagatccaaa agaagccgcc tgctccatag cgattacatg 960aatatgactc cacgccgccc tggccccaca aggaaacact accagcctta cgcaccacct 1020agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg 1080tatcagcagg gccagaacca actgtataac gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat 1140gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa 1200aacccccagg agggtctcta taatgagctg cagaaggata agatggctga agcctattct 1260gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga 1320ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac gctctccaca tgcaagccct gccacctagg 1380<210> 62<211> 460<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 62

132

CN 109641008 A

序　列　表

47/123页

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly 20 25 30Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser 50 55 60Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe65 70 75 80Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp 100 105 110Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr 130 135 140Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe145 150 155 160Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln 165 170 175Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn 180 185 190Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr 210 215 220Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly225 230 235 240Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser 245 250 255Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro 260 265 270Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly 275 280 285Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile 290 295 300Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met

133

CN 109641008 A

序　列　表

48/123页

305 310 315 320Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro 325 330 335Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe 340 345 350Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu 355 360 365Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp 370 375 380Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys385 390 395 400Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala 405 410 415Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys 420 425 430Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr 435 440 445Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460<210> 63<211> 1473<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 63atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agctgcagga aagcggtccg ggacttgtca agccgtccca aacgctgagt 120ctgacgtgta ctgtctctgg tggctctatt tcttccgggg gcttttattg gtcttggatc 180agacaacacc ctggcaaagg gctggagtgg atagggtata ttcaccactc tgggtccact 240cactacaacc catcattgaa atccagagtg actatctcaa tcgacacatc caagaacctt 300ttcagcctga ggttgtcatc agttaccgcc gctgacaccg cggtgtatta ttgcgcctct 360ctcgtgtact gcggtggcga ttgttatagt ggctttgact actgggggca ggggacattg 420gttaccgttt caagtggagg cggtgggtct ggcgggggcg gtagcggagg tggggggagc 480gacatacagc ttacgcagag cccctccagc ctttcagcct ccgtggggga tagggtgtcc 540tttacctgcc aggcttccca ggacataaac aacttcctca attggtatca gcaaaagccc 600gggaaagcac caaagctgct catctacgat gccagcaacc tggaaaccgg agtgccgtct 660cgcttctctg gaagtggcag tgggaccgat ttcactttta caatctcaag tttgcagcca 720

134

CN 109641008 A

序　列　表

49/123页

gaagacattg caacatacta ctgtcaacag tacggcaatc tcccctttac atttgggggg 780ggaactaaag tggagattaa gcgcgctgca gccattgaag ttatgtatcc gcccccgtat 840ctggataacg agaaatctaa tggtaccata atacatgtga aggggaagca cctctgtcca 900tcaccgctgt tccccggccc ttcaaaacct ttctgggtac tcgttgtcgt gggtggagtt 960ctggcctgct atagtctgct ggtgaccgtg gcgtttatca tcttctgggt aagatccaaa 1020agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1080aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1140aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1200gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1260cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1320cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1380ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1440gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1473<210> 64<211> 490<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 64Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro 50 55 60Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr65 70 75 80His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr 85 90 95Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp 100 105 110Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys 115 120 125Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 130 135 140

135

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序　列　表

50/123页

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser145 150 155 160Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 165 170 175Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 180 185 190Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 195 200 205Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 210 215 220Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro225 230 235 240Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 245 250 255Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile 260 265 270Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 275 280 285Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 290 295 300Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val305 310 315 320Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp 325 330 335Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met 340 345 350Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 355 360 365Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 370 375 380Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn385 390 395 400Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg 405 410 415Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 420 425 430Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 435 440 445Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

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序　列　表

51/123页

450 455 460Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp465 470 475 480Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490<210> 65<211> 1407<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 65caggtgcagc tgcaggaaag cggtccggga cttgtcaagc cgtcccaaac gctgagtctg 60acgtgtactg tctctggtgg ctctatttct tccgggggct tttattggtc ttggatcaga 120caacaccctg gcaaagggct ggagtggata gggtatattc accactctgg gtccactcac 180tacaacccat cattgaaatc cagagtgact atctcaatcg acacatccaa gaaccttttc 240agcctgaggt tgtcatcagt taccgccgct gacaccgcgg tgtattattg cgcctctctc 300gtgtactgcg gtggcgattg ttatagtggc tttgactact gggggcaggg gacattggtt 360accgtttcaa gtggaggcgg tgggtctggc gggggcggta gcggaggtgg ggggagcgac 420atacagctta cgcagagccc ctccagcctt tcagcctccg tgggggatag ggtgtccttt 480acctgccagg cttcccagga cataaacaac ttcctcaatt ggtatcagca aaagcccggg 540aaagcaccaa agctgctcat ctacgatgcc agcaacctgg aaaccggagt gccgtctcgc 600ttctctggaa gtggcagtgg gaccgatttc acttttacaa tctcaagttt gcagccagaa 660gacattgcaa catactactg tcaacagtac ggcaatctcc cctttacatt tgggggggga 720actaaagtgg agattaagcg cgctgcagcc attgaagtta tgtatccgcc cccgtatctg 780gataacgaga aatctaatgg taccataata catgtgaagg ggaagcacct ctgtccatca 840ccgctgttcc ccggcccttc aaaacctttc tgggtactcg ttgtcgtggg tggagttctg 900gcctgctata gtctgctggt gaccgtggcg tttatcatct tctgggtaag atccaaaaga 960agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1020aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1080ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1140ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1200gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1260aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1320aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1380ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1407<210> 66<211> 469

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序　列　表

52/123页

<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 66Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly 20 25 30Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser 50 55 60Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe65 70 75 80Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp 100 105 110Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr 130 135 140Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe145 150 155 160Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln 165 170 175Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn 180 185 190Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr 210 215 220Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly225 230 235 240Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro 245 250 255Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val

138

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序　列　表

53/123页

260 265 270Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys 275 280 285Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser 290 295 300Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg305 310 315 320Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro 325 330 335Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe 340 345 350Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 355 360 365Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 370 375 380Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro385 390 395 400Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr 405 410 415Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 420 425 430Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 435 440 445Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 450 455 460Ala Leu Pro Pro Arg465<210> 67<211> 1554<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 67atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agttgcagga aagcgggcct ggccttgtga aaccaagcca gacactgagc 120ctgacatgca ctgtgtccgg cgggtccata tcttccgggg gtttttattg gtcctggata 180cgccagcatc ccgggaaagg acttgaatgg attggatata tccaccattc cggaagcacc 240

139

CN 109641008 A

序　列　表

54/123页

cactacaatc caagccttaa atcccgggtg acaatctcca tcgacacctc aaagaatctt 300ttttccctgc ggttgtcttc agtaactgcc gccgataccg ctgtgtacta ctgtgccagc 360ctcgtctatt gcggcggaga ttgttattct gggttcgatt attggggtca aggcacactg 420gtaactgtca gcagcggagg cggcggttcc gggggcgggg gcagtggagg gggcggatct 480gacattcagc ttacgcagtc cccatcttca cttagcgcca gcgttggcga tcgggtcagc 540ttcacgtgtc aagcaagtca ggatatcaac aactttctta actggtacca gcagaagcca 600ggcaaggcac ccaagttgct gatttacgat gcttctaacc tcgagacggg agtgcctagc 660cgcttctccg ggagcggcag cggcacagac tttaccttta cgatttccag tctgcagcca 720gaggatatag caacttatta ctgtcagcag tatggcaacc tcccttttac cttcggtggt 780ggcacaaagg tcgagattaa aagagccgca gcgttgtcca actccataat gtatttttct 840cattttgtgc ccgtctttct gcctgccaaa cctaccacca cccccgcccc acgaccacct 900actccagccc ccaccatcgc ctcccagccc ctcagcctga ggccagaggc ttgtcgccct 960gctgcggggg gcgctgtcca taccagagga ctcgacttcg cctgcgatat ttatatatgg 1020gcccccctcg ccggcacctg cggagtcttg ctcctgagcc ttgtgatcac gctttattgt 1080aaccatcgga atagatccaa aagaagccgc ctgctccata gcgattacat gaatatgact 1140ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac taccagcctt acgcaccacc tagagatttc 1200gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag 1260ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg 1320gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag 1380gagggtctct ataatgagct gcagaaggat aagatggctg aagcctattc tgaaataggc 1440atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact 1500gctacgaagg atacttatga cgctctccac atgcaagccc tgccacctag gtaa 1554<210> 68<211> 517<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 68Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu 20 25 30Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly 35 40 45Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro 50 55 60Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr

140

CN 109641008 A

序　列　表

55/123页

65 70 75 80His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr 85 90 95Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp 100 105 110Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys 115 120 125Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 130 135 140Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser145 150 155 160Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 165 170 175Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 180 185 190Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 195 200 205Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 210 215 220Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro225 230 235 240Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe 245 250 255Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu 260 265 270Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro 275 280 285Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 290 295 300Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro305 310 315 320Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp 325 330 335Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu 340 345 350Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg 355 360 365Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro 370 375 380

141

CN 109641008 A

序　列　表

56/123页

Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe385 390 395 400Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 405 410 415Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 420 425 430Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 435 440 445Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr 450 455 460Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly465 470 475 480Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 485 490 495Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 500 505 510Ala Leu Pro Pro Arg 515<210> 69<211> 1488<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 69caggtgcagt tgcaggaaag cgggcctggc cttgtgaaac caagccagac actgagcctg 60acatgcactg tgtccggcgg gtccatatct tccgggggtt tttattggtc ctggatacgc 120cagcatcccg ggaaaggact tgaatggatt ggatatatcc accattccgg aagcacccac 180tacaatccaa gccttaaatc ccgggtgaca atctccatcg acacctcaaa gaatcttttt 240tccctgcggt tgtcttcagt aactgccgcc gataccgctg tgtactactg tgccagcctc 300gtctattgcg gcggagattg ttattctggg ttcgattatt ggggtcaagg cacactggta 360actgtcagca gcggaggcgg cggttccggg ggcgggggca gtggaggggg cggatctgac 420attcagctta cgcagtcccc atcttcactt agcgccagcg ttggcgatcg ggtcagcttc 480acgtgtcaag caagtcagga tatcaacaac tttcttaact ggtaccagca gaagccaggc 540aaggcaccca agttgctgat ttacgatgct tctaacctcg agacgggagt gcctagccgc 600ttctccggga gcggcagcgg cacagacttt acctttacga tttccagtct gcagccagag 660gatatagcaa cttattactg tcagcagtat ggcaacctcc cttttacctt cggtggtggc 720acaaaggtcg agattaaaag agccgcagcg ttgtccaact ccataatgta tttttctcat 780

142

CN 109641008 A

序　列　表

57/123页

tttgtgcccg tctttctgcc tgccaaacct accaccaccc ccgccccacg accacctact 840ccagccccca ccatcgcctc ccagcccctc agcctgaggc cagaggcttg tcgccctgct 900gcggggggcg ctgtccatac cagaggactc gacttcgcct gcgatattta tatatgggcc 960cccctcgccg gcacctgcgg agtcttgctc ctgagccttg tgatcacgct ttattgtaac 1020catcggaata gatccaaaag aagccgcctg ctccatagcg attacatgaa tatgactcca 1080cgccgccctg gccccacaag gaaacactac cagccttacg caccacctag agatttcgct 1140gcctatcgga gcagggtgaa gttttccaga tctgcagatg caccagcgta tcagcagggc 1200cagaaccaac tgtataacga gctcaacctg ggacgcaggg aagagtatga cgttttggac 1260aagcgcagag gacgggaccc tgagatgggt ggcaaaccaa gacgaaaaaa cccccaggag 1320ggtctctata atgagctgca gaaggataag atggctgaag cctattctga aataggcatg 1380aaaggagagc ggagaagggg aaaagggcac gacggtttgt accagggact cagcactgct 1440acgaaggata cttatgacgc tctccacatg caagccctgc cacctagg 1488<210> 70<211> 496<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 70Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln1 5 10 15Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly 20 25 30Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser 50 55 60Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe65 70 75 80Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp 100 105 110Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly 115 120 125Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr 130 135 140Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe

143

CN 109641008 A

序　列　表

58/123页

145 150 155 160Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln 165 170 175Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn 180 185 190Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 195 200 205Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr 210 215 220Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly225 230 235 240Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met 245 250 255Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr 260 265 270Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln 275 280 285Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala 290 295 300Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala305 310 315 320Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr 325 330 335Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His 340 345 350Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys 355 360 365His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser 370 375 380Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly385 390 395 400Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 405 410 415Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 420 425 430Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 435 440 445Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 450 455 460

144

CN 109641008 A

序　列　表

59/123页

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala465 470 475 480Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490 495<210> 71<211> 363<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 71caggtccaac tggtgcagtc cggagccgaa gtcaagaaac caggtgcctc cgttaaagtg 60agttgcaaag tctctggata cactctgacc gagctctcta tgcactgggt ccggcaggcc 120cccggcaagg gattggaatg gatgggcggg ttcgatcctg aggacggaga gactatctac 180gctcaaaaat tccagggacg agtgactgtg accgaagaca ctagtaccga cactgcctac 240atggaacttt cctctctgcg atcagaagat accgcagtgt actactgtgc tactgaatct 300aggggcattg gatggcccta cttcgattac tggggtcagg gaactctggt gactgtctcc 360agc 363<210> 72<211> 121<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 72Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala1 5 10 15Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu 20 25 30Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr65 70 75 80Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

145

CN 109641008 A

序　列　表

60/123页

Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120<210> 73<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 73Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu1 5<210> 74<211> 6<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 74Asp Pro Glu Asp Gly Glu1 5<210> 75<211> 12<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 75Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr1 5 10<210> 76<211> 324<212> DNA<213> 人工序列<220>

146

CN 109641008 A

序　列　表

61/123页

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 76gatattcaga tgactcaatc tccttcttct ctgtccgctt ccgtgggcga tagagtgacc 60attacttgta gggcgtccca gtcaatctcc agttatttga attggtatca gcagaagccc 120gggaaagcac ctaagctgtt gatcagcggg gcttctagcc tgaagagtgg ggtaccttca 180cggttcagcg gaagcggaag cggaaccgat ttcaccctga ctatcagcag cctgccacct 240gaggactttg caacttacta ctgccaacag tcatacagca ctccgatcac tttcggccag 300ggcacccggc tcgaaatcaa gcgc 324<210> 77<211> 108<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 77Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro65 70 75 80Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile 85 90 95Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg 100 105<210> 78<211> 11<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 78

147

CN 109641008 A

序　列　表

62/123页

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn1 5 10<210> 79<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 79Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser1 5<210> 80<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 80Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr1 5<210> 81<211> 1437<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 81atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtcc aactggtgca gtccggagcc gaagtcaaga aaccaggtgc ctccgttaaa 120gtgagttgca aagtctctgg atacactctg accgagctct ctatgcactg ggtccggcag 180gcccccggca agggattgga atggatgggc gggttcgatc ctgaggacgg agagactatc 240tacgctcaaa aattccaggg acgagtgact gtgaccgaag acactagtac cgacactgcc 300tacatggaac tttcctctct gcgatcagaa gataccgcag tgtactactg tgctactgaa 360tctaggggca ttggatggcc ctacttcgat tactggggtc agggaactct ggtgactgtc 420tccagcggtg gaggtggcag cggtggtggc ggaagcgggg ggggcggctc tgatattcag 480atgactcaat ctccttcttc tctgtccgct tccgtgggcg atagagtgac cattacttgt 540

148

CN 109641008 A

序　列　表

63/123页

agggcgtccc agtcaatctc cagttatttg aattggtatc agcagaagcc cgggaaagca 600cctaagctgt tgatcagcgg ggcttctagc ctgaagagtg gggtaccttc acggttcagc 660ggaagcggaa gcggaaccga tttcaccctg actatcagca gcctgccacc tgaggacttt 720gcaacttact actgccaaca gtcatacagc actccgatca ctttcggcca gggcacccgg 780ctcgaaatca agcgcgctgc tgctttggac aatgagaagt caaacggcac catcatacat 840gttaaaggta aacatctgtg tccctccccg ctgttccccg gcccttccaa accgttctgg 900gttctggtgg tggtcggagg cgtactcgct tgctatagtc tgctggtaac tgtcgccttc 960atcatctttt gggtgagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 1020actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1080ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1140cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1200ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1260caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1320ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1380actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1437<210> 82<211> 478<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 82Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 20 25 30Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr 35 40 45Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile65 70 75 80Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser 85 90 95Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr 115 120 125

149

CN 109641008 A

序　列　表

64/123页

Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 130 135 140Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln145 150 155 160Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val 165 170 175Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp 180 185 190Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala 195 200 205Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 210 215 220Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe225 230 235 240Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly 245 250 255Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu 260 265 270Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro 275 280 285Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val 290 295 300Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe305 310 315 320Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 325 330 335Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 340 345 350Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 355 360 365Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 370 375 380Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val385 390 395 400Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 405 410 415Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 420 425 430Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

150

CN 109641008 A

序　列　表

65/123页

435 440 445Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 450 455 460Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg465 470 475<210> 83<211> 1371<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 83caggtccaac tggtgcagtc cggagccgaa gtcaagaaac caggtgcctc cgttaaagtg 60agttgcaaag tctctggata cactctgacc gagctctcta tgcactgggt ccggcaggcc 120cccggcaagg gattggaatg gatgggcggg ttcgatcctg aggacggaga gactatctac 180gctcaaaaat tccagggacg agtgactgtg accgaagaca ctagtaccga cactgcctac 240atggaacttt cctctctgcg atcagaagat accgcagtgt actactgtgc tactgaatct 300aggggcattg gatggcccta cttcgattac tggggtcagg gaactctggt gactgtctcc 360agcggtggag gtggcagcgg tggtggcgga agcggggggg gcggctctga tattcagatg 420actcaatctc cttcttctct gtccgcttcc gtgggcgata gagtgaccat tacttgtagg 480gcgtcccagt caatctccag ttatttgaat tggtatcagc agaagcccgg gaaagcacct 540aagctgttga tcagcggggc ttctagcctg aagagtgggg taccttcacg gttcagcgga 600agcggaagcg gaaccgattt caccctgact atcagcagcc tgccacctga ggactttgca 660acttactact gccaacagtc atacagcact ccgatcactt tcggccaggg cacccggctc 720gaaatcaagc gcgctgctgc tttggacaat gagaagtcaa acggcaccat catacatgtt 780aaaggtaaac atctgtgtcc ctccccgctg ttccccggcc cttccaaacc gttctgggtt 840ctggtggtgg tcggaggcgt actcgcttgc tatagtctgc tggtaactgt cgccttcatc 900atcttttggg tgagatccaa aagaagccgc ctgctccata gcgattacat gaatatgact 960ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac taccagcctt acgcaccacc tagagatttc 1020gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag 1080ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg 1140gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag 1200gagggtctct ataatgagct gcagaaggat aagatggctg aagcctattc tgaaataggc 1260atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact 1320gctacgaagg atacttatga cgctctccac atgcaagccc tgccacctag g 1371<210> 84<211> 457<212> PRT

151

CN 109641008 A

序　列　表

66/123页

<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 84Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala1 5 10 15Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu 20 25 30Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr65 70 75 80Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 130 135 140Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg145 150 155 160Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser 180 185 190Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 195 200 205Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 210 215 220Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu225 230 235 240Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr 245 250 255Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro 260 265 270

152

CN 109641008 A

序　列　表

67/123页

Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu 275 280 285Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 290 295 300Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr305 310 315 320Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 325 330 335Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 340 345 350Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu 355 360 365Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 370 375 380Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln385 390 395 400Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 405 410 415Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 420 425 430Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala 435 440 445Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455<210> 85<211> 1464<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 85atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agcttgtgca gagcggggcc gaggtgaaga agcccggggc cagcgtcaaa 120gtgtcctgta aggtcagcgg ttacaccctc accgagctga gcatgcactg ggtacggcag 180gctcccggca aaggtcttga gtggatgggt ggatttgatc cagaagatgg agagactatc 240tacgcccaga agttccaggg ccgggtcacc gtaacagaag acacctcaac tgacaccgct 300tacatggagc tgagttcact gcggtccgag gacacggccg tgtattattg tgccaccgag 360agccgcggaa tcggatggcc ttacttcgac tactggggac agggtacact tgttacagta 420

153

CN 109641008 A

序　列　表

68/123页

tcatccgggg gtggcggctc tggtgggggc ggctccggag ggggtggatc agatatccaa 480atgactcaaa gtccaagttc cctgtctgcc tcagtcggag atagagtcac cataacctgc 540agggcaagtc agtccatctc ctcctatctg aactggtacc aacagaaacc tggaaaggcg 600cctaagctcc tgatctccgg agcctcatct ttgaaatccg gtgtcccatc tcgcttcagt 660ggctctggaa gcggtacaga ttttactttg accattagca gcctcccacc ggaagacttt 720gctacatatt actgccagca gtcttactca accccaatca ccttcgggca aggcaccaga 780ctcgaaataa aaagagcagc tgctatcgag gttatgtacc caccgccgta cttggataac 840gaaaaaagca atgggaccat cattcatgtg aagggtaagc acctttgccc tagcccactg 900tttcctggcc cgagtaaacc cttttgggta cttgtggtcg tcggcggcgt gctggcctgc 960tactcactcc tggttaccgt cgcattcatc atcttttggg tgagatccaa aagaagccgc 1020ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1080taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1140agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1200ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1260ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1320aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1380cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1440atgcaagccc tgccacctag gtaa 1464<210> 86<211> 487<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 86Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 20 25 30Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr 35 40 45Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile65 70 75 80Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser 85 90 95Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

154

CN 109641008 A

序　列　表

69/123页

100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr 115 120 125Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 130 135 140Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln145 150 155 160Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val 165 170 175Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp 180 185 190Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala 195 200 205Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 210 215 220Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe225 230 235 240Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly 245 250 255Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met 260 265 270Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile 275 280 285His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro 290 295 300Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys305 310 315 320Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser 325 330 335Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg 340 345 350Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg 355 360 365Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp 370 375 380Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn385 390 395 400Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg 405 410 415

155

CN 109641008 A

序　列　表

70/123页

Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly 420 425 430Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu 435 440 445Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu 450 455 460Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His465 470 475 480Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485<210> 87<211> 1398<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 87caggtgcagc ttgtgcagag cggggccgag gtgaagaagc ccggggccag cgtcaaagtg 60tcctgtaagg tcagcggtta caccctcacc gagctgagca tgcactgggt acggcaggct 120cccggcaaag gtcttgagtg gatgggtgga tttgatccag aagatggaga gactatctac 180gcccagaagt tccagggccg ggtcaccgta acagaagaca cctcaactga caccgcttac 240atggagctga gttcactgcg gtccgaggac acggccgtgt attattgtgc caccgagagc 300cgcggaatcg gatggcctta cttcgactac tggggacagg gtacacttgt tacagtatca 360tccgggggtg gcggctctgg tgggggcggc tccggagggg gtggatcaga tatccaaatg 420actcaaagtc caagttccct gtctgcctca gtcggagata gagtcaccat aacctgcagg 480gcaagtcagt ccatctcctc ctatctgaac tggtaccaac agaaacctgg aaaggcgcct 540aagctcctga tctccggagc ctcatctttg aaatccggtg tcccatctcg cttcagtggc 600tctggaagcg gtacagattt tactttgacc attagcagcc tcccaccgga agactttgct 660acatattact gccagcagtc ttactcaacc ccaatcacct tcgggcaagg caccagactc 720gaaataaaaa gagcagctgc tatcgaggtt atgtacccac cgccgtactt ggataacgaa 780aaaagcaatg ggaccatcat tcatgtgaag ggtaagcacc tttgccctag cccactgttt 840cctggcccga gtaaaccctt ttgggtactt gtggtcgtcg gcggcgtgct ggcctgctac 900tcactcctgg ttaccgtcgc attcatcatc ttttgggtga gatccaaaag aagccgcctg 960ctccatagcg attacatgaa tatgactcca cgccgccctg gccccacaag gaaacactac 1020cagccttacg caccacctag agatttcgct gcctatcgga gcagggtgaa gttttccaga 1080tctgcagatg caccagcgta tcagcagggc cagaaccaac tgtataacga gctcaacctg 1140ggacgcaggg aagagtatga cgttttggac aagcgcagag gacgggaccc tgagatgggt 1200ggcaaaccaa gacgaaaaaa cccccaggag ggtctctata atgagctgca gaaggataag 1260

156

CN 109641008 A

序　列　表

71/123页

atggctgaag cctattctga aataggcatg aaaggagagc ggagaagggg aaaagggcac 1320gacggtttgt accagggact cagcactgct acgaaggata cttatgacgc tctccacatg 1380caagccctgc cacctagg 1398<210> 88<211> 466<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 88Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala1 5 10 15Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu 20 25 30Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr65 70 75 80Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 130 135 140Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg145 150 155 160Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser 180 185 190Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 195 200 205Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 210 215 220

157

CN 109641008 A

序　列　表

72/123页

Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu225 230 235 240Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr 245 250 255Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys 260 265 270His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp 275 280 285Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val 290 295 300Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu305 310 315 320Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 325 330 335Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr 340 345 350Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 355 360 365Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 370 375 380Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly385 390 395 400Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 405 410 415Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly 420 425 430Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 435 440 445Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 450 455 460Pro Arg465<210> 89<211> 1545<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

158

CN 109641008 A

序　列　表

73/123页

<400> 89atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agttggtgca aagcggcgca gaagttaaga aacctggggc gtcagttaag 120gtgtcttgca aagtatctgg ctataccctc actgagctgt ccatgcattg ggtaaggcag 180gctcctggaa aggggctcga atggatggga ggatttgacc ctgaagacgg agagaccatc 240tacgcccaga aattccaggg tagagtaaca gtgactgagg acactagcac tgacacagcg 300tacatggagc tgagttctct gagaagtgag gacacagccg tttactactg cgctaccgag 360tccagaggta ttggctggcc atacttcgac tattggggtc agggcaccct ggttacagtg 420agttcaggag gcgggggctc tggggggggc ggttccggag gggggggctc agatatacag 480atgacgcaga gtccatcaag tctctcagcc agcgtgggag atcgcgtgac tattacttgc 540cgcgccagcc agagtattag ctcctatctg aattggtacc agcaaaagcc cgggaaggcc 600cctaagcttc tgatttctgg cgcctcctct ttgaagtcag gtgtgccaag cagatttagc 660gggtctggaa gtggcactga ctttacactt actatctcca gcctgccccc agaggatttt 720gccacatatt actgtcagca aagctactct actccaatca ctttcggcca gggcacaaga 780ttggagatta agagggctgc cgcactttca aattccatca tgtatttcag ccattttgtg 840cctgtttttc ttccggccaa acctacaacc actcccgccc cacgcccacc tactcccgcc 900cctaccattg cctcccagcc tctgtctctt agacctgagg cttgtagacc tgctgccggc 960ggagccgtgc acactcgcgg tctggacttc gcctgcgaca tctatatctg ggcccctctg 1020gccggcacct gcggcgttct ccttctctca ctcgtaatca cactctattg caatcacagg 1080aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1140cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1200cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1260caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1320agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1380tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1440gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1500gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1545<210> 90<211> 514<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 90Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val 20 25 30

159

CN 109641008 A

序　列　表

74/123页

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr 35 40 45Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile65 70 75 80Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser 85 90 95Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr 100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr 115 120 125Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 130 135 140Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln145 150 155 160Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val 165 170 175Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp 180 185 190Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala 195 200 205Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 210 215 220Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe225 230 235 240Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly 245 250 255Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser 260 265 270Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro 275 280 285Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala 290 295 300Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly305 310 315 320Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile 325 330 335Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

160

CN 109641008 A

序　列　表

75/123页

340 345 350Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu 355 360 365Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr 370 375 380Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr385 390 395 400Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln 405 410 415Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu 420 425 430Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly 435 440 445Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 450 455 460Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly465 470 475 480Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 485 490 495Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro 500 505 510Pro Arg<210> 91<211> 1479<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 91caggtgcagt tggtgcaaag cggcgcagaa gttaagaaac ctggggcgtc agttaaggtg 60tcttgcaaag tatctggcta taccctcact gagctgtcca tgcattgggt aaggcaggct 120cctggaaagg ggctcgaatg gatgggagga tttgaccctg aagacggaga gaccatctac 180gcccagaaat tccagggtag agtaacagtg actgaggaca ctagcactga cacagcgtac 240atggagctga gttctctgag aagtgaggac acagccgttt actactgcgc taccgagtcc 300agaggtattg gctggccata cttcgactat tggggtcagg gcaccctggt tacagtgagt 360tcaggaggcg ggggctctgg ggggggcggt tccggagggg ggggctcaga tatacagatg 420acgcagagtc catcaagtct ctcagccagc gtgggagatc gcgtgactat tacttgccgc 480gccagccaga gtattagctc ctatctgaat tggtaccagc aaaagcccgg gaaggcccct 540

161

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序　列　表

76/123页

aagcttctga tttctggcgc ctcctctttg aagtcaggtg tgccaagcag atttagcggg 600tctggaagtg gcactgactt tacacttact atctccagcc tgcccccaga ggattttgcc 660acatattact gtcagcaaag ctactctact ccaatcactt tcggccaggg cacaagattg 720gagattaaga gggctgccgc actttcaaat tccatcatgt atttcagcca ttttgtgcct 780gtttttcttc cggccaaacc tacaaccact cccgccccac gcccacctac tcccgcccct 840accattgcct cccagcctct gtctcttaga cctgaggctt gtagacctgc tgccggcgga 900gccgtgcaca ctcgcggtct ggacttcgcc tgcgacatct atatctgggc ccctctggcc 960ggcacctgcg gcgttctcct tctctcactc gtaatcacac tctattgcaa tcacaggaac 1020agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 1080ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1140agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1200ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1260ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1320aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1380cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1440acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1479<210> 92<211> 493<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 92Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala1 5 10 15Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu 20 25 30Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr65 70 75 80Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

162

CN 109641008 A

序　列　表

77/123页

115 120 125Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 130 135 140Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg145 150 155 160Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser 180 185 190Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 195 200 205Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 210 215 220Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu225 230 235 240Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser 245 250 255His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala 260 265 270Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser 275 280 285Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr 290 295 300Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala305 310 315 320Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys 325 330 335Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 340 345 350Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 355 360 365Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys 370 375 380Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln385 390 395 400Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 405 410 415Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 420 425 430

163

CN 109641008 A

序　列　表

78/123页

Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 435 440 445Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly 450 455 460Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp465 470 475 480Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490<210> 93<211> 351<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 93caggtccagt tggtcgaaag tggcggtggt gtagtgcagc cgggccgcag tttgaggctt 60tcctgtgcgg cttcaggctt tactttttcc agctatggaa tgcactgggt gcggcaggcc 120cccggcaaag gacttgagtg ggtggccgtc atttcttatg acggatcaga taagtactac 180gtggacagcg tcaagggcag attcaccatc tctagggaca acagtaaaaa tagactctac 240ctccagatga atagcctcag agctgaagac acggccgtct actattgtgc tcgggagcgg 300tatagtggca gagactactg ggggcagggc acactcgtta cagtgagtag c 351<210> 94<211> 117<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 94Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg1 5 10 15Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr

164

CN 109641008 A

序　列　表

79/123页

65 70 75 80Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110Val Thr Val Ser Ser 115<210> 95<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 95Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr1 5<210> 96<211> 6<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 96Ser Tyr Asp Gly Ser Asp1 5<210> 97<211> 8<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 97Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr1 5<210> 98<211> 324

165

CN 109641008 A

序　列　表

80/123页

<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 98gagattgtta tgacccagag tcctgcgacc ctctcagtca gccccgggga gcgcgcaact 60ttgtcttgca gagctagtca gtccgtgtcc tctcttctga catggtacca gcaaaagccc 120gggcaggctc cgcgcctttt gatctttggg gcttcaacaa gagccactgg gattcccgca 180cgattctctg gctccgggag cggtactggt ttcaccctga cgattagcag tctccagagc 240gaggacttcg ccgtatacta ctgccagcag tacgatacgt ggccattcac ttttggacca 300gggactaaag tggattttaa gcgc 324<210> 99<211> 108<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 99Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly1 5 10 15Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu 20 25 30Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser65 70 75 80Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg 100 105<210> 100<211> 11<212> PRT<213> 人工序列<220>

166

CN 109641008 A

序　列　表

81/123页

<223> 人工序列的描述：合成肽<400> 100Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr1 5 10<210> 101<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 101Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr1 5<210> 102<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 102Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr1 5<210> 103<211> 1425<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 103atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtcc agttggtcga aagtggcggt ggtgtagtgc agccgggccg cagtttgagg 120ctttcctgtg cggcttcagg ctttactttt tccagctatg gaatgcactg ggtgcggcag 180gcccccggca aaggacttga gtgggtggcc gtcatttctt atgacggatc agataagtac 240tacgtggaca gcgtcaaggg cagattcacc atctctaggg acaacagtaa aaatagactc 300tacctccaga tgaatagcct cagagctgaa gacacggccg tctactattg tgctcgggag 360

167

CN 109641008 A

序　列　表

82/123页

cggtatagtg gcagagacta ctgggggcag ggcacactcg ttacagtgag tagcggcgga 420ggagggagtg ggggcggtgg ctccggtgga ggaggttctg agattgttat gacccagagt 480cctgcgaccc tctcagtcag ccccggggag cgcgcaactt tgtcttgcag agctagtcag 540tccgtgtcct ctcttctgac atggtaccag caaaagcccg ggcaggctcc gcgccttttg 600atctttgggg cttcaacaag agccactggg attcccgcac gattctctgg ctccgggagc 660ggtactggtt tcaccctgac gattagcagt ctccagagcg aggacttcgc cgtatactac 720tgccagcagt acgatacgtg gccattcact tttggaccag ggactaaagt ggattttaag 780cgcgccgccg ctctcgataa cgaaaagtca aatggcacca taatccacgt caaaggcaag 840cacctgtgcc cttccccgct cttccccgga cccagtaaac cattttgggt gctggttgtt 900gtggggggcg tgctggcctg ctatagcctt ttggtcactg tagccttcat tattttttgg 960gtcagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1020cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1080cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1140caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1200agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1260tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1320gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1380gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1425<210> 104<211> 474<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 104Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val 20 25 30Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe 35 40 45Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr65 70 75 80Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser 85 90 95Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr

168

CN 109641008 A

序　列　表

83/123页

100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp 115 120 125Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser145 150 155 160Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 165 170 175Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys 180 185 190Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala 195 200 205Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe 210 215 220Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr225 230 235 240Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys 245 250 255Val Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 260 265 270Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 275 280 285Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 290 295 300Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp305 310 315 320Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met 325 330 335Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 340 345 350Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 355 360 365Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 370 375 380Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg385 390 395 400Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 405 410 415

169

CN 109641008 A

序　列　表

84/123页

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 420 425 430Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 435 440 445Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 450 455 460Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg465 470<210> 105<211> 1359<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 105caggtccagt tggtcgaaag tggcggtggt gtagtgcagc cgggccgcag tttgaggctt 60tcctgtgcgg cttcaggctt tactttttcc agctatggaa tgcactgggt gcggcaggcc 120cccggcaaag gacttgagtg ggtggccgtc atttcttatg acggatcaga taagtactac 180gtggacagcg tcaagggcag attcaccatc tctagggaca acagtaaaaa tagactctac 240ctccagatga atagcctcag agctgaagac acggccgtct actattgtgc tcgggagcgg 300tatagtggca gagactactg ggggcagggc acactcgtta cagtgagtag cggcggagga 360gggagtgggg gcggtggctc cggtggagga ggttctgaga ttgttatgac ccagagtcct 420gcgaccctct cagtcagccc cggggagcgc gcaactttgt cttgcagagc tagtcagtcc 480gtgtcctctc ttctgacatg gtaccagcaa aagcccgggc aggctccgcg ccttttgatc 540tttggggctt caacaagagc cactgggatt cccgcacgat tctctggctc cgggagcggt 600actggtttca ccctgacgat tagcagtctc cagagcgagg acttcgccgt atactactgc 660cagcagtacg atacgtggcc attcactttt ggaccaggga ctaaagtgga ttttaagcgc 720gccgccgctc tcgataacga aaagtcaaat ggcaccataa tccacgtcaa aggcaagcac 780ctgtgccctt ccccgctctt ccccggaccc agtaaaccat tttgggtgct ggttgttgtg 840gggggcgtgc tggcctgcta tagccttttg gtcactgtag ccttcattat tttttgggtc 900agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 960ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1020agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1080ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1140ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1200aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1260cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1320acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1359

170

CN 109641008 A

序　列　表

85/123页

<210> 106<211> 453<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 106Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg1 5 10 15Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr65 70 75 80Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 130 135 140Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser145 150 155 160Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 165 170 175Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 180 185 190Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp 210 215 220Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg225 230 235 240Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val

171

CN 109641008 A

序　列　表

86/123页

245 250 255Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys 260 265 270Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser 275 280 285Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg 290 295 300Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro305 310 315 320Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe 325 330 335Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 340 345 350Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 355 360 365Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 370 375 380Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr385 390 395 400Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 405 410 415Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 420 425 430Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 435 440 445Ala Leu Pro Pro Arg 450<210> 107<211> 1452<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 107atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agctcgtgga gtctggcggc ggcgtggtcc agcccggccg gtccctgcgc 120ctgtcctgcg ccgccagcgg gtttactttt tcctcctacg gcatgcactg ggtgcgccag 180gctcccggca agggcctcga gtgggtcgcc gtgatctcat acgatgggtc agacaaatac 240

172

CN 109641008 A

序　列　表

87/123页

tatgtcgatt ctgttaaagg gcggtttacc atttcaagag ataactctaa gaataggctg 300tatttgcaga tgaacagcct gagggctgaa gataccgcag tgtactattg cgctagggag 360cggtatagtg gccgcgatta ctggggacag ggtacactgg tgaccgtgag ctctgggggt 420ggcggaagcg ggggtggcgg aagcggcgga gggggtagtg aaattgtgat gacccagtct 480ccggctacac tttcagtctc ccctggggag agagctacac tgtcatgcag agcgtcccag 540tccgtctctt ctctccttac ctggtatcag cagaagcccg gccaggctcc tcgactgctg 600atcttcggtg cctccacaag ggcgaccggg attccagccc gcttctcagg ttctgggagc 660ggaactggtt tcactttgac aatcagttca ctgcagtcag aggatttcgc cgtgtactac 720tgccagcaat acgacacatg gccattcact ttcggacccg gtaccaaagt cgatttcaag 780agagccgcgg ccatcgaggt tatgtaccca ccaccatatc tggacaatga aaaaagcaat 840ggaaccatta tccatgtgaa gggtaaacac ctctgcccta gcccactttt ccctggccca 900tcaaagccct tctgggtctt ggtggtcgtg gggggtgtgc tggcctgtta cagccttctg 960gtgacggttg ctttcattat cttctgggtt agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440ccacctaggt aa 1452<210> 108<211> 483<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 108Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val 20 25 30Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe 35 40 45Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr65 70 75 80

173

CN 109641008 A

序　列　表

88/123页

Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser 85 90 95Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr 100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp 115 120 125Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 130 135 140Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser145 150 155 160Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 165 170 175Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys 180 185 190Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala 195 200 205Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe 210 215 220Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr225 230 235 240Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys 245 250 255Val Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro 260 265 270Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly 275 280 285Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe 290 295 300Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu305 310 315 320Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg 325 330 335Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 340 345 350Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala 355 360 365Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 370 375 380Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

174

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序　列　表

89/123页

385 390 395 400Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met 405 410 415Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 420 425 430Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys 435 440 445Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 450 455 460Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu465 470 475 480Pro Pro Arg<210> 109<211> 1386<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 109caggtgcagc tcgtggagtc tggcggcggc gtggtccagc ccggccggtc cctgcgcctg 60tcctgcgccg ccagcgggtt tactttttcc tcctacggca tgcactgggt gcgccaggct 120cccggcaagg gcctcgagtg ggtcgccgtg atctcatacg atgggtcaga caaatactat 180gtcgattctg ttaaagggcg gtttaccatt tcaagagata actctaagaa taggctgtat 240ttgcagatga acagcctgag ggctgaagat accgcagtgt actattgcgc tagggagcgg 300tatagtggcc gcgattactg gggacagggt acactggtga ccgtgagctc tgggggtggc 360ggaagcgggg gtggcggaag cggcggaggg ggtagtgaaa ttgtgatgac ccagtctccg 420gctacacttt cagtctcccc tggggagaga gctacactgt catgcagagc gtcccagtcc 480gtctcttctc tccttacctg gtatcagcag aagcccggcc aggctcctcg actgctgatc 540ttcggtgcct ccacaagggc gaccgggatt ccagcccgct tctcaggttc tgggagcgga 600actggtttca ctttgacaat cagttcactg cagtcagagg atttcgccgt gtactactgc 660cagcaatacg acacatggcc attcactttc ggacccggta ccaaagtcga tttcaagaga 720gccgcggcca tcgaggttat gtacccacca ccatatctgg acaatgaaaa aagcaatgga 780accattatcc atgtgaaggg taaacacctc tgccctagcc cacttttccc tggcccatca 840aagcccttct gggtcttggt ggtcgtgggg ggtgtgctgg cctgttacag ccttctggtg 900acggttgctt tcattatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 960tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1020ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1080ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1140

175

CN 109641008 A

序　列　表

90/123页

gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1200cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1260tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1320cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1380cctagg 1386<210> 110<211> 462<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 110Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg1 5 10 15Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr65 70 75 80Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 130 135 140Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser145 150 155 160Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 165 170 175Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 180 185 190Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205

176

CN 109641008 A

序　列　表

91/123页

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp 210 215 220Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg225 230 235 240Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu 245 250 255Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro 260 265 270Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val 275 280 285Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe 290 295 300Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp305 310 315 320Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 325 330 335Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 340 345 350Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 355 360 365Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg385 390 395 400Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460<210> 111<211> 1533<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

177

CN 109641008 A

序　列　表

92/123页

<400> 111atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccgcaggtgc agttggttga atcaggaggg ggtgtggtgc aacccggtcg gtcactgcgc 120ctcagttgtg ctgcttccgg gtttactttc agctcatatg ggatgcactg ggtacggcag 180gctccaggta aaggcttgga atgggtggcg gtgatcagct atgacggctc tgacaaatat 240tatgtggact ccgtgaaagg cagattcacc atcagtcgag acaactcaaa gaatagactc 300tacttgcaga tgaatagcct ccgggccgaa gatactgcag tctattattg cgcccgggag 360cgctacagtg gaagagacta ttgggggcaa ggaactcttg tcacagtctc atctggcggc 420ggcggcagcg gtgggggcgg atctggcggg ggcggcagcg aaatcgttat gactcagagt 480cctgccacac tgagcgttag ccctggtgag agagcaacac ttagctgcag agctagtcag 540agtgtttcca gtcttttgac atggtaccaa cagaagcccg gtcaagctcc acgactgctc 600atcttcggtg catccacccg cgcaaccggg atacccgccc ggttttccgg ttctggaagt 660ggcacaggat tcacgctcac catttcttct ctgcagtctg aagactttgc cgtgtattac 720tgccagcagt acgatacctg gccctttacc tttggcccag gtactaaagt ggattttaaa 780cgagctgctg cactttccaa tagtattatg tacttttcac attttgtgcc cgtgttcctg 840cctgcgaagc ctacgacaac cccagcccct aggccgccca caccggcccc aactattgcc 900tcccagccat tgtctctgag acccgaagct tgcagacctg ctgctggagg cgccgttcac 960acccgaggat tggatttcgc atgtgacatt tacatctggg cccctttggc cggaacctgc 1020ggtgtgctgc tgctgtcact cgtgattaca ctttactgca accaccgaaa cagatccaaa 1080agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1140aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1200aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1260gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1320cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1380cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1440ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1500gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1533<210> 112<211> 509<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 112Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val 20 25 30

178

CN 109641008 A

序　列　表

93/123页

Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe 35 40 45Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys 50 55 60Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr65 70 75 80Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser 85 90 95Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr 100 105 110Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp 115 120 125Gly Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 130 135 140Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro145 150 155 160Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg 165 170 175Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 180 185 190Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 195 200 205Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr 210 215 220Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys225 230 235 240Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val 245 250 255Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser 260 265 270His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala 275 280 285Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser 290 295 300Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr305 310 315 320Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala 325 330 335Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

179

CN 109641008 A

序　列　表

94/123页

340 345 350Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr 355 360 365Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln 370 375 380Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys385 390 395 400Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln 405 410 415Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu 420 425 430Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg 435 440 445Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met 450 455 460Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly465 470 475 480Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp 485 490 495Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 500 505<210> 113<211> 1467<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 113caggtgcagt tggttgaatc aggagggggt gtggtgcaac ccggtcggtc actgcgcctc 60agttgtgctg cttccgggtt tactttcagc tcatatggga tgcactgggt acggcaggct 120ccaggtaaag gcttggaatg ggtggcggtg atcagctatg acggctctga caaatattat 180gtggactccg tgaaaggcag attcaccatc agtcgagaca actcaaagaa tagactctac 240ttgcagatga atagcctccg ggccgaagat actgcagtct attattgcgc ccgggagcgc 300tacagtggaa gagactattg ggggcaagga actcttgtca cagtctcatc tggcggcggc 360ggcagcggtg ggggcggatc tggcgggggc ggcagcgaaa tcgttatgac tcagagtcct 420gccacactga gcgttagccc tggtgagaga gcaacactta gctgcagagc tagtcagagt 480gtttccagtc ttttgacatg gtaccaacag aagcccggtc aagctccacg actgctcatc 540ttcggtgcat ccacccgcgc aaccgggata cccgcccggt tttccggttc tggaagtggc 600

180

CN 109641008 A

序　列　表

95/123页

acaggattca cgctcaccat ttcttctctg cagtctgaag actttgccgt gtattactgc 660cagcagtacg atacctggcc ctttaccttt ggcccaggta ctaaagtgga ttttaaacga 720gctgctgcac tttccaatag tattatgtac ttttcacatt ttgtgcccgt gttcctgcct 780gcgaagccta cgacaacccc agcccctagg ccgcccacac cggccccaac tattgcctcc 840cagccattgt ctctgagacc cgaagcttgc agacctgctg ctggaggcgc cgttcacacc 900cgaggattgg atttcgcatg tgacatttac atctgggccc ctttggccgg aacctgcggt 960gtgctgctgc tgtcactcgt gattacactt tactgcaacc accgaaacag atccaaaaga 1020agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1080aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1140ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1200ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1260gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1320aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1380aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1440ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1467<210> 114<211> 489<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 114Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg1 5 10 15Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr65 70 75 80Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125

181

CN 109641008 A

序　列　表

96/123页

Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 130 135 140Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser145 150 155 160Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 165 170 175Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 180 185 190Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp 210 215 220Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg225 230 235 240Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro 245 250 255Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro 260 265 270Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu 275 280 285Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp 290 295 300Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly305 310 315 320Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn 325 330 335Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 340 345 350Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 355 360 365Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 370 375 380Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu385 390 395 400Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 405 410 415Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln 420 425 430Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr

182

CN 109641008 A

序　列　表

97/123页

435 440 445Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 450 455 460Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala465 470 475 480Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485<210> 115<211> 1425<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 115atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggagattg tgatgaccca gtcccctgct accctgtccg tcagtccggg cgagagagcc 120accttgtcat gccgggccag ccagtccgtc agcagtctcc tgacttggta tcagcaaaaa 180ccagggcagg caccgcggct tttgattttt ggtgcaagca cacgcgccac tggcattcca 240gctaggtttt ctggaagtgg atctgggaca ggcttcactc tgacaatcag tagcctgcag 300agtgaggact ttgctgttta ctactgtcaa cagtacgaca cctggccatt cacattcggg 360cccggcacca aggtcgactt caagaggggc ggtggaggtt caggtggtgg cgggtcaggc 420ggcggtgggt ctcaggttca actggtggaa tcaggtggcg gcgttgtcca accggggcga 480tcacttcgac tttcctgtgc tgcctcaggc tttacttttt catcctatgg gatgcactgg 540gttcggcagg ctcccggaaa aggactcgag tgggttgcag tgatctctta cgatggctca 600gacaagtatt atgtggactc agtcaagggg agattcacaa taagccgaga caactccaaa 660aaccggcttt atctccagat gaacagcctt agagcggaag ataccgcggt atactactgt 720gcccgcgaga ggtattccgg cagagactac tggggacagg gcacactggt caccgtgagt 780tctgccgcag cgctcgataa cgaaaagagc aacggaacca ttatccacgt taagggcaag 840cacctgtgcc ccagtcccct cttcccagga ccatctaaac ccttctgggt tctggtagta 900gttggagggg tccttgcatg ttactccctt ttggtcaccg tcgccttcat tattttctgg 960gtgagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1020cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1080cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1140caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1200agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1260tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1320gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1380gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1425

183

CN 109641008 A

序　列　表

98/123页

<210> 116<211> 474<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 116Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu 20 25 30Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln 35 40 45Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro65 70 75 80Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys 115 120 125Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg145 150 155 160Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 165 170 175Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 180 185 190Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 195 200 205Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr 210 215 220Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys225 230 235 240Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

184

CN 109641008 A

序　列　表

99/123页

245 250 255Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly 260 265 270Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe 275 280 285Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val 290 295 300Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp305 310 315 320Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met 325 330 335Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala 340 345 350Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg 355 360 365Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn 370 375 380Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg385 390 395 400Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro 405 410 415Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala 420 425 430Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His 435 440 445Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp 450 455 460Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg465 470<210> 117<211> 1359<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 117gagattgtga tgacccagtc ccctgctacc ctgtccgtca gtccgggcga gagagccacc 60ttgtcatgcc gggccagcca gtccgtcagc agtctcctga cttggtatca gcaaaaacca 120

185

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序　列　表

100/123页

gggcaggcac cgcggctttt gatttttggt gcaagcacac gcgccactgg cattccagct 180aggttttctg gaagtggatc tgggacaggc ttcactctga caatcagtag cctgcagagt 240gaggactttg ctgtttacta ctgtcaacag tacgacacct ggccattcac attcgggccc 300ggcaccaagg tcgacttcaa gaggggcggt ggaggttcag gtggtggcgg gtcaggcggc 360ggtgggtctc aggttcaact ggtggaatca ggtggcggcg ttgtccaacc ggggcgatca 420cttcgacttt cctgtgctgc ctcaggcttt actttttcat cctatgggat gcactgggtt 480cggcaggctc ccggaaaagg actcgagtgg gttgcagtga tctcttacga tggctcagac 540aagtattatg tggactcagt caaggggaga ttcacaataa gccgagacaa ctccaaaaac 600cggctttatc tccagatgaa cagccttaga gcggaagata ccgcggtata ctactgtgcc 660cgcgagaggt attccggcag agactactgg ggacagggca cactggtcac cgtgagttct 720gccgcagcgc tcgataacga aaagagcaac ggaaccatta tccacgttaa gggcaagcac 780ctgtgcccca gtcccctctt cccaggacca tctaaaccct tctgggttct ggtagtagtt 840ggaggggtcc ttgcatgtta ctcccttttg gtcaccgtcg ccttcattat tttctgggtg 900agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 960ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1020agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1080ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1140ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1200aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1260cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1320acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1359<210> 118<211> 453<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 118Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly1 5 10 15Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu 20 25 30Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser65 70 75 80

186

CN 109641008 A

序　列　表

101/123页

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val 115 120 125Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser 130 135 140Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val145 150 155 160Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr 165 170 175Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr 180 185 190Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser 195 200 205Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr 210 215 220Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser225 230 235 240Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val 245 250 255Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys 260 265 270Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser 275 280 285Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg 290 295 300Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro305 310 315 320Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe 325 330 335Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro 340 345 350Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly 355 360 365Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro 370 375 380Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr

187

CN 109641008 A

序　列　表

102/123页

385 390 395 400Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly 405 410 415Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln 420 425 430Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln 435 440 445Ala Leu Pro Pro Arg 450<210> 119<211> 1452<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 119atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggagatcg tcatgacaca gagtccagct accctgagcg tgtcccctgg agagagagcc 120accctgtcct gtagggctag tcagagtgtg tccagcctcc tcacctggta tcaacagaag 180cctggtcaag ctccccggct gcttatcttc ggggccagca cgcgagccac aggcatcccg 240gccagattct ctggctctgg cagtggcacc gggttcactc tcacgatctc atccctgcag 300tcagaggatt tcgctgtgta ttactgtcag cagtacgata catggccctt caccttcggc 360ccgggcacaa aagtagattt caagcgcggc ggcgggggta gtgggggcgg gggatcagga 420ggagggggct cccaagtaca gctggttgag agcggcggcg gggtggttca gcccgggcgc 480agcctcaggc tgagttgcgc agcatcagga ttcacattca gttcttatgg aatgcattgg 540gtcagacagg ctcccgggaa gggccttgaa tgggtggcag tcattagcta cgacggaagc 600gataagtact atgtggactc agttaaaggg agatttacta tcagccgcga caattccaaa 660aacagattgt atttgcagat gaactccctc agggcggagg acactgctgt atattactgc 720gcacgagaga gatactccgg ccgagactat tggggccaag gaacattggt aactgtgagc 780tccgccgcag ctattgaggt catgtacccc ccaccttatc tcgataatga gaagagtaat 840gggactataa ttcacgtaaa gggcaaacac ctgtgccctt ccccgctgtt tccaggtcca 900agtaagccgt tctgggtcct ggttgtggtg ggaggggtgc tggcctgcta ttctctgttg 960gttaccgtgg cctttatcat tttctgggtg agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320

188

CN 109641008 A

序　列　表

103/123页

gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440ccacctaggt aa 1452<210> 120<211> 483<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 120Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu 20 25 30Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln 35 40 45Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro65 70 75 80Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys 115 120 125Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg145 150 155 160Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 165 170 175Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 180 185 190Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 195 200 205Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr 210 215 220

189

CN 109641008 A

序　列　表

104/123页

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys225 230 235 240Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 245 250 255Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro 260 265 270Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly 275 280 285Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe 290 295 300Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu305 310 315 320Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg 325 330 335Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 340 345 350Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala 355 360 365Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr 370 375 380Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg385 390 395 400Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met 405 410 415Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu 420 425 430Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys 435 440 445Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu 450 455 460Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu465 470 475 480Pro Pro Arg<210> 121<211> 1386<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成

190

CN 109641008 A

序　列　表

105/123页

多核苷酸<400> 121gagatcgtca tgacacagag tccagctacc ctgagcgtgt cccctggaga gagagccacc 60ctgtcctgta gggctagtca gagtgtgtcc agcctcctca cctggtatca acagaagcct 120ggtcaagctc cccggctgct tatcttcggg gccagcacgc gagccacagg catcccggcc 180agattctctg gctctggcag tggcaccggg ttcactctca cgatctcatc cctgcagtca 240gaggatttcg ctgtgtatta ctgtcagcag tacgatacat ggcccttcac cttcggcccg 300ggcacaaaag tagatttcaa gcgcggcggc gggggtagtg ggggcggggg atcaggagga 360gggggctccc aagtacagct ggttgagagc ggcggcgggg tggttcagcc cgggcgcagc 420ctcaggctga gttgcgcagc atcaggattc acattcagtt cttatggaat gcattgggtc 480agacaggctc ccgggaaggg ccttgaatgg gtggcagtca ttagctacga cggaagcgat 540aagtactatg tggactcagt taaagggaga tttactatca gccgcgacaa ttccaaaaac 600agattgtatt tgcagatgaa ctccctcagg gcggaggaca ctgctgtata ttactgcgca 660cgagagagat actccggccg agactattgg ggccaaggaa cattggtaac tgtgagctcc 720gccgcagcta ttgaggtcat gtacccccca ccttatctcg ataatgagaa gagtaatggg 780actataattc acgtaaaggg caaacacctg tgcccttccc cgctgtttcc aggtccaagt 840aagccgttct gggtcctggt tgtggtggga ggggtgctgg cctgctattc tctgttggtt 900accgtggcct ttatcatttt ctgggtgaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 960tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1020ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1080ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1140gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1200cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1260tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1320cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1380cctagg 1386<210> 122<211> 462<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 122Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly1 5 10 15Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu 20 25 30Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

191

CN 109641008 A

序　列　表

106/123页

35 40 45Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser65 70 75 80Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val 115 120 125Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser 130 135 140Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val145 150 155 160Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr 165 170 175Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr 180 185 190Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser 195 200 205Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr 210 215 220Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser225 230 235 240Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu 245 250 255Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro 260 265 270Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val 275 280 285Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe 290 295 300Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp305 310 315 320Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 325 330 335Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val 340 345 350

192

CN 109641008 A

序　列　表

107/123页

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 355 360 365Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 370 375 380Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg385 390 395 400Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 405 410 415Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg 420 425 430Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys 435 440 445Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455 460<210> 123<211> 1533<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 123atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccggaaatag tgatgactca gtccccggcc accctcagcg tgtcccccgg ggagcgagcg 120accctgtcat gcagggcttc ccagagtgtc agctccctgc tcacttggta tcagcaaaag 180ccggggcagg ctccccgcct cctcatcttc ggggcatcaa ctagggccac cggcattcct 240gcaagatttt ccgggtctgg cagcggcacc ggcttcaccc ttaccattag ctctctgcag 300tctgaggact tcgccgttta ctattgtcag cagtatgata cttggccctt taccttcggt 360cccggaacta aggtggactt caagcgcggg gggggtggat ctggaggtgg tggctccggg 420ggcggtggaa gccaggtcca gttggttgag agcggcggcg gagtggtgca gcccgggagg 480tccttgcggc tgagctgtgc agcctccggt tttacttttt ctagctatgg aatgcattgg 540gtaagacagg ctcccggaaa aggcctcgag tgggtggcgg tcattagcta tgatggatct 600gataaatact atgtggactc agttaagggg cgcttcacaa tctcaagaga caatagcaaa 660aatagactgt acctgcagat gaatagtctg cgcgccgagg acactgccgt gtactactgc 720gcccgcgaga gatacagcgg acgggattac tggggccagg gtaccctcgt aacggtgtcc 780tccgctgccg cccttagcaa cagcattatg tacttttctc atttcgtgcc agtctttctc 840ccagcaaagc ccaccactac cccggccccc aggccgccta ctcctgcccc cactatcgcg 900tctcagcctc tctccttgcg gcccgaggcc tgccggccag ccgcaggggg cgccgtacat 960actcggggtt tggatttcgc ttgcgacata tatatttggg cccccctcgc cggcacatgt 1020

193

CN 109641008 A

序　列　表

108/123页

ggagtgctgc tcctgagtct cgttataacc ctctattgca accatagaaa cagatccaaa 1080agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1140aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1200aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1260gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1320cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1380cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1440ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1500gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1533<210> 124<211> 510<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 124Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu 20 25 30Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln 35 40 45Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro65 70 75 80Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys 115 120 125Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg145 150 155 160Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 165 170 175

194

CN 109641008 A

序　列　表

109/123页

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 180 185 190Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val 195 200 205Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr 210 215 220Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys225 230 235 240Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 245 250 255Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe 260 265 270Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro 275 280 285Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu 290 295 300Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His305 310 315 320Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu 325 330 335Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr 340 345 350Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp 355 360 365Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr 370 375 380Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val385 390 395 400Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn 405 410 415Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val 420 425 430Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg 435 440 445Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys 450 455 460Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg465 470 475 480Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

195

CN 109641008 A

序　列　表

110/123页

485 490 495Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 500 505 510<210> 125<211> 1467<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多核苷酸<400> 125gaaatagtga tgactcagtc cccggccacc ctcagcgtgt cccccgggga gcgagcgacc 60ctgtcatgca gggcttccca gagtgtcagc tccctgctca cttggtatca gcaaaagccg 120gggcaggctc cccgcctcct catcttcggg gcatcaacta gggccaccgg cattcctgca 180agattttccg ggtctggcag cggcaccggc ttcaccctta ccattagctc tctgcagtct 240gaggacttcg ccgtttacta ttgtcagcag tatgatactt ggccctttac cttcggtccc 300ggaactaagg tggacttcaa gcgcgggggg ggtggatctg gaggtggtgg ctccgggggc 360ggtggaagcc aggtccagtt ggttgagagc ggcggcggag tggtgcagcc cgggaggtcc 420ttgcggctga gctgtgcagc ctccggtttt actttttcta gctatggaat gcattgggta 480agacaggctc ccggaaaagg cctcgagtgg gtggcggtca ttagctatga tggatctgat 540aaatactatg tggactcagt taaggggcgc ttcacaatct caagagacaa tagcaaaaat 600agactgtacc tgcagatgaa tagtctgcgc gccgaggaca ctgccgtgta ctactgcgcc 660cgcgagagat acagcggacg ggattactgg ggccagggta ccctcgtaac ggtgtcctcc 720gctgccgccc ttagcaacag cattatgtac ttttctcatt tcgtgccagt ctttctccca 780gcaaagccca ccactacccc ggcccccagg ccgcctactc ctgcccccac tatcgcgtct 840cagcctctct ccttgcggcc cgaggcctgc cggccagccg cagggggcgc cgtacatact 900cggggtttgg atttcgcttg cgacatatat atttgggccc ccctcgccgg cacatgtgga 960gtgctgctcc tgagtctcgt tataaccctc tattgcaacc atagaaacag atccaaaaga 1020agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1080aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1140ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1200ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1260gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1320aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1380aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1440ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1467<210> 126<211> 489<212> PRT

196

CN 109641008 A

序　列　表

111/123页

<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成多肽<400> 126Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly1 5 10 15Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu 20 25 30Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser65 70 75 80Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe 85 90 95Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly 100 105 110Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val 115 120 125Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser 130 135 140Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val145 150 155 160Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr 165 170 175Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr 180 185 190Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser 195 200 205Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr 210 215 220Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser225 230 235 240Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro 245 250 255Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro 260 265 270

197

CN 109641008 A

序　列　表

112/123页

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu 275 280 285Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp 290 295 300Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly305 310 315 320Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn 325 330 335Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr 340 345 350Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro 355 360 365Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser 370 375 380Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu385 390 395 400Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg 405 410 415Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln 420 425 430Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 435 440 445Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 450 455 460Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala465 470 475 480Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485<210> 127<211> 63<212> DNA<213> 智人<400> 127atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60ccg 63<210> 128<211> 21<212> PRT<213> 智人

198

CN 109641008 A

序　列　表

113/123页

<400> 128Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro 20<210> 129<211> 45<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成oligonucleotide<400> 129ggcggtggag gctccggagg ggggggctct ggcggagggg gctcc 45<210> 130<211> 15<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 130Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser1 5 10 15<210> 131<211> 54<212> DNA<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成oligonucleotide<400> 131gggtctacat ccggctccgg gaagcccgga agtggcgaag gtagtacaaa gggg 54<210> 132<211> 18<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成

199

CN 109641008 A

序　列　表

114/123页

肽<400> 132Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr1 5 10 15Lys Gly<210> 133<211> 152<212> PRT<213> 智人<400> 133Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln Val1 5 10 15Thr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr 20 25 30Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe Ser 35 40 45Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val Glu 50 55 60Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr Ser65 70 75 80Lys Thr Gly Phe Asn Cys Asp Gly Lys Leu Gly Asn Glu Ser Val Thr 85 90 95Phe Tyr Leu Gln Asn Leu Tyr Val Asn Gln Thr Asp Ile Tyr Phe Cys 100 105 110Lys Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser 115 120 125Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro 130 135 140Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro145 150<210> 134<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES

200

CN 109641008 A

序　列　表

115/123页

<222> (2)..(2)<223> Gly, Phe或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (3)..(3)<223> Ser或Thr<220><221> MOD_RES<222> (4)..(4)<223> Ile, Phe或Leu<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)<223> Ser或Thr<220><221> MOD_RES<222> (6)..(7)<223> 可以存在或可以不存在<220><221> MOD_RES<222> (8)..(8)<223> Glu, Gly或不存在<220><221> MOD_RES<222> (9)..(9)<223> Phe, Leu或Tyr<400> 134Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Gly Xaa Xaa1 5<210> 135<211> 6<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES<222> (1)..(1)

201

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<223> Asp, His, Ser或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (2)..(2)<223> His, Pro或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (3)..(3)<223> Asp, Glu或Ser<220><221> MOD_RES<222> (4)..(4)<223> Asp或Gly<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)<223> Gly或Ser<220><221> MOD_RES<222> (6)..(6)<223> Asp, Glu或不存在<400> 135Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa1 5<210> 136<211> 14<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES<222> (1)..(1)<223> Glu或Leu<220><221> MOD_RES<222> (2)..(2)<223> Arg, Ser或Val

序　列　表

116/123页

202

CN 109641008 A

序　列　表

117/123页

<220><221> MOD_RES<222> (3)..(3)<223> Arg或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (4)..(4)<223> Cys, Gly或Ser<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)<223> Gly, Ile或不存在<220><221> MOD_RES<222> (6)..(8)<223> 可以存在或可以不存在<220><221> MOD_RES<222> (9)..(9)<223> Trp, Tyr或不存在<220><221> MOD_RES<222> (10)..(10)<223> Pro, Ser或不存在<220><221> MOD_RES<222> (11)..(11)<223> Gly, Tyr或不存在<220><221> MOD_RES<222> (12)..(12)<223> Phe或Arg<400> 136Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Asp Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Asp Tyr1 5 10<210> 137<211> 11<212> PRT<213> 人工序列

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序　列　表

118/123页

<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES<222> (1)..(1)<223> Gln或Arg<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)<223> Asp或Ser<220><221> MOD_RES<222> (6)..(6)<223> Ile或Val<220><221> MOD_RES<222> (7)..(8)<223> Asn或Ser<220><221> MOD_RES<222> (9)..(9)<223> Phe, Leu或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (11)..(11)<223> Asn或Thr<400> 137Xaa Ala Ser Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Xaa1 5 10<210> 138<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES

204

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序　列　表

119/123页

<222> (1)..(1)<223> Asp或Gly<220><221> MOD_RES<222> (4)..(4)<223> Asn, Ser或Thr<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)<223> Leu或Arg<220><221> MOD_RES<222> (6)..(6)<223> Ala, Glu或Lys<220><221> MOD_RES<222> (7)..(7)<223> Ser或Thr<400> 138Xaa Ala Ser Xaa Xaa Xaa Xaa1 5<210> 139<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<220><221> MOD_RES<222> (3)..(3)<223> Ser或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (4)..(4)<223> Asp, Gly或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (5)..(5)

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序　列　表

120/123页

<223> Asn, Ser或Thr<220><221> MOD_RES<222> (6)..(6)<223> Leu, Thr或Tyr<220><221> MOD_RES<222> (8)..(8)<223> Phe或Ile<400> 139Gln Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr1 5<210> 140<211> 265<212> PRT<213> 智人<400> 140Met Ser Glu Glu Val Thr Tyr Ala Asp Leu Gln Phe Gln Asn Ser Ser1 5 10 15Glu Met Glu Lys Ile Pro Glu Ile Gly Lys Phe Gly Glu Lys Ala Pro 20 25 30Pro Ala Pro Ser His Val Trp Arg Pro Ala Ala Leu Phe Leu Thr Leu 35 40 45Leu Cys Leu Leu Leu Leu Ile Gly Leu Gly Val Leu Ala Ser Met Phe 50 55 60His Val Thr Leu Lys Ile Glu Met Lys Lys Met Asn Lys Leu Gln Asn65 70 75 80Ile Ser Glu Glu Leu Gln Arg Asn Ile Ser Leu Gln Leu Met Ser Asn 85 90 95Met Asn Ile Ser Asn Lys Ile Arg Asn Leu Ser Thr Thr Leu Gln Thr 100 105 110Ile Ala Thr Lys Leu Cys Arg Glu Leu Tyr Ser Lys Glu Gln Glu His 115 120 125Lys Cys Lys Pro Cys Pro Arg Arg Trp Ile Trp His Lys Asp Ser Cys 130 135 140Tyr Phe Leu Ser Asp Asp Val Gln Thr Trp Gln Glu Ser Lys Met Ala145 150 155 160Cys Ala Ala Gln Asn Ala Ser Leu Leu Lys Ile Asn Asn Lys Asn Ala 165 170 175

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序　列　表

121/123页

Leu Glu Phe Ile Lys Ser Gln Ser Arg Ser Tyr Asp Tyr Trp Leu Gly 180 185 190Leu Ser Pro Glu Glu Asp Ser Thr Arg Gly Met Arg Val Asp Asn Ile 195 200 205Ile Asn Ser Ser Ala Trp Val Ile Arg Asn Ala Pro Asp Leu Asn Asn 210 215 220Met Tyr Cys Gly Tyr Ile Asn Arg Leu Tyr Val Gln Tyr Tyr His Cys225 230 235 240Thr Tyr Lys Lys Arg Met Ile Cys Glu Lys Met Ala Asn Pro Val Gln 245 250 255Leu Gly Ser Thr Tyr Phe Arg Glu Ala 260 265<210> 141<211> 126<212> DNA<213> 智人<400> 141aagcgcggca ggaagaagct cctctacatt tttaagcagc cttttatgag gcccgtacag 60acaacacagg aggaagatgg ctgtagctgc agatttcccg aggaggagga aggtgggtgc 120gagctg 126<210> 142<211> 42<212> PRT<213> 智人<400> 142Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met1 5 10 15Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe 20 25 30Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 35 40<210> 143<211> 37<212> PRT<213> 智人<400> 143Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly1 5 10 15Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser

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序　列　表

122/123页

20 25 30Thr Leu Ala Lys Ile 35<210> 144<211> 21<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 144Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu1 5 10 15His Ala Ala Arg Pro 20<210> 145<211> 20<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 人工序列的描述：合成肽<400> 145Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Ser 20<210> 146<211> 112<212> PRT<213> 智人<400> 146Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly1 5 10 15Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

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序　列　表

123/123页

50 55 60Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg65 70 75 80Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 100 105 110

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说　明　书　附　图

1/12页

图1

图2

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说　明　书　附　图

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图3

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说　明　书　附　图

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图4

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图5

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图6

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图7

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说　明　书　附　图

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图8

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说　明　书　附　图

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图9A

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图9B

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图9C

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说　明　书　附　图

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图9D

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说　明　书　附　图

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图10

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