院感监测项目
一 空气监测(布点法):
①室内面积≤30cm2,设内外中三个点;室内面积>30 cm2设5个点
②用直径9 cm的琼脂平板分别于上述布点位置,采样时将平板打开,扣于平板旁,暴露时间为5分钟,盖好立即送检.
③平板置35-37度48小时培养
④计算公式:细菌总数(cfu/m3=50000N/A.T)A为平板面积,T为平板暴露时间,N为平均菌落数 即:菌落数/平板数*换算系数
换算系数(直径9 cm平板) 5分钟*157; 10分钟*78; 15分钟*52; 30分钟*26 手术室报告方式: 个/30min ø90 二 医务人员手监测
①手的采样:被检人五指并拢,用生理盐水浸湿棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂面积约为30 cm2),剪去操作者手触部位,将拭子放入10ml洗脱液中
②细菌总数监测:将采样管用力振打80次,用无菌管吸取1ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数.
计算:细菌总数(cfu/ cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/60 cm2 结果判定: 环境类别 Ⅰ类(层流洁净室) 空气cfu/ cm3 物表cfu/ cm2 医务人员手cfu/ cm2 ≤10 ≤5 ≤5 ≤5 ≤5 Ⅱ类区域(普通手术室\\产房\\婴儿≤200 室\\人工肾\\烧伤科\\重症监护) Ⅲ类(儿科\\注射室换药室等) Ⅳ类(传染科及病房) ≤500 - ≤10 ≤15 ≤10 ≤15 注意: ①不得检出乙型链球菌\\金黄色葡萄球菌\\及其它致病菌
②母婴同室,婴儿室,新生儿室及儿科病房的工作人员手上不得检出沙门氏菌\\铜绿\\金葡.
三 物表监测
采样:用5*5 cm2的方框取样4个不同位置,其余方法同手表检测 细菌总数及其他方法无同手表检测
计算: 细菌总数(cfu/cm2)=平板上菌落数*稀释倍数/采样面积(cm2) 结果判定:同手表
四A一次性物品(无菌):取5-10套样品用洗脱液洗脱后,各吸取1.0ml接种于平板,35-37度培养3-5
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天,不得检出细菌.
B无菌物品:取供试品2个包装,拆开后于不同部位剪取约1cm*3cm的样品放入增菌液,如果有菌生长,转平板.不得检出细菌
五 消毒剂:吸取1ml正在使用中的消毒剂加入9ml肉汤中(含有相应中和剂)振80次后吸入1.0ml于灭菌平皿内,加入5ml营养琼脂,摇均,待琼脂凝固后,于37度48小时培养,计数菌落数. 报告:cfu/ml
结果判定:<100 cfu/ml
六 透析水:1.取透析水1ml于无菌平皿,加入56度琼脂,冷却后于37度48小时作细菌总数计数. 结果判定:出口水<200 cfu/ml 入口水<200 cfu/ml 报告:cfu/ml
注:氧气湿化瓶液监测同上, 结果判定:<1000 cfu/ml,不得检出致病菌 克氏双糖培基
配制方法: 取克氏双糖商品化干粉培基 55g,加入装有1000ml蒸溜水的三角烧瓶中,加热溶解, 调PH7.8, 分装小试管(约2.5ml), 12磅 15分钟灭菌。 V-P培养基:
成份:酵母浸肉膏0.2g, 胰蛋白胨1.4g, 大豆蛋白胨1.0g, 葡萄糖2.0g, NaCl1.0g, 蒸溜水200ml 制法: 将上述成份加热溶解, 调PH7.0, 分装小试管, 10P 15’高压灭菌。 VP试剂:
成份:甲液:α-奈酚6 g 乙醇100ml 乙液:40%氢氧化钾 靛基质培基:
成份:牛肉膏0.6g, 胰蛋白胨6g, 盐酸胱氨酸(L-半胱氨酸)0.04g, 琼脂0.6g,硫代硫酸钠:0.01g 蒸溜水200ml
制法: 将上述成份加热溶解, 调PH7.4, 分装小试管, 15磅15分钟高压灭菌。 硝酸盐培基
成份:硝酸钾(KON3) 0.2g, 优质蛋白胨2.0g, 蒸溜水200ml
制法:将上述成份加热溶解, 调PH7.4, 分装小试管, 10P 20’高压灭菌。 碱性蛋白胨水
成份:蛋白胨10 g,氯化钠2.5 g,H2O500ml 混合溶解,调节PH8.4,高压15分钟灭菌 血液保养液
成份:枸橼酸0.47 g; 枸橼酸钠1.33 g;葡萄糖:1.5克 蒸馏水100ml
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每25ml可使100ml血保养 复方中和剂
成份:吐温80(0.5-3%)+卵磷脂(1-2%)+硫代硫酸钠(0.1-1.0%)
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