黑龙江医药Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏ１．２３ Ｎｏ．３ ２０１０ 。３ １９· ＨＰＬＣ法测定龙胆中龙胆苦苷的含量 李馨，王金宏，金迪，江蔚新 哈尔滨商业大学 摘 要目的：采用ＨＰＬＣ法测定（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ｘＤＢ—ｃｍ柱，１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ｐｍ）龙胆中龙胆苦苷的 含量。方法采用高效液相色谱法；Ｃ． 色谱柱（流动相：甲醇一水（２５：７５）流速：ｌｍｌ／ｍｉｎ；检测波长： ２７０ｎｍ；柱温：２５ｑＣ；进样量：ｌＯＩ．ｄ。结果：龙胆苦苷在Ｏ．１ｍｇ／ｍＬ～１．Ｏｍｇ／ｍＬ之间线性良好。得回归方程， Ｙ＝３０９．７２Ｘ一１６．７８８，ｒ＝０．９９９８。，测得龙胆苦苷平均加样回收率为９９．３８％。ＫＳＤ为０．６２％。结论：本法快速简便， 准确，重现性好。 关键词：龙胆；龙胆苦苷；含量测定 中图分类号：１＜２８４．１ 文献标识：Ａ 文章编号：１００６—２８８２（２０１０）０３—３１９—０２ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＧｅｎｔｉｏｐｉｃｒｉｎ ｉｎ Ｇｅｎｔｉａｎ ｂｙ ＨＰＬＣ ＬｉＸｉｎ，ｅｔａｌ Ｈａｒｂｉｎ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｈａｒｂｉｎ １５００７６） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｔｉｏｐｉｅｆｉｎ ｉｎ ｇｅｎｔｉａｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｉｅａｌ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ＣｌＲ（１５ｏ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５１￣ｍ）．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆｍｅｔｈａｎｏｌ～ｗａｔｅｒ（２５：７５）．Ｔｈｅ ｌｆｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １．０ ｍｌ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ａｔ ２５℃．Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２７０ ｎｍ．Ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ １０１ｚ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｗａｓ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ０．１～１．ｏｏ￣ｇ／ｍｌ ｏｆｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｉｎ ｗｉｔｈ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｍｃｉｅｎｔ ｏｆ ０．９９９８．ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ａｓ Ｙ＝３０９．７２Ｘ一１６．７８８．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９－３８％，ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ ０．６２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｑｕｉｃｋ．ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ ｓｉｍｐｌｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｔｉａｎ；Ｇｅｎｔｉｏｐｉｅｒｉｎ；Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 龙胆是我国传统常用中药，《中华人民共和国药典》 ２实验方法与结果 ２００５版收载龙胆为龙胆科植物条叶龙胆、龙胆、三花龙胆 ２．１色谱条件：ｃ。８色谱柱（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ—Ｃ。８柱， 或坚龙胆的干燥根及根茎，具有清热燥湿、泻肝胆火之功 １５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ ｍ），流动相：甲醇一水（２５：７５），流 效，其药用历史悠久，历代本草均有记载，为常用苦寒健 速：ｌｍｌ／ｍｉｎ，检测波长：２７０ｎｍ，柱温：２５℃，以上色谱 胃保肝药。主要含有龙胆苦苷、当药苦苷、当药苷等环烯 条件下各峰的分离度均大于１．５，拖尾因子介于０．９５～１．０５ 醚萜类成分，研究表明龙胆苦苷为其主要活性成分，具有 之间，理论塔板数以龙胆苦苷计算不低于７０００。 保肝、利胆、健胃、抗炎、抗茵等活性，是评价龙胆质量 ２．２对照品溶液的制备：精密称取龙胆苦苷标准品，加甲 标准首要指标，被《中华人民共和国药典》定为质量标准 醇制成０．４ｍｇ／ｍＬ的溶液，作为对照品溶液，备用。 控制目标成分。 ２．３供试品溶液的制备：精密称取东北各地龙胆药材粉末 １ 仪器与试药 各１ｇ（共ｌＯ批），分别加入甲醇５０ｍＬ，超声处理３０ｍｉｎ，放 １．１仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ１１ｏｏ高效液相色谱仪，ｕＶ检测器： 冷，过滤，精密移取续滤液ｌｍＬ置１０ｍＬ容量瓶中，甲醇 ＡｇｉｌｅｎｔＩ １００色谱工作站：ｃｌ８色谱柱（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ— 定容至刻度，作为供试品溶液。 Ｃ． 柱，１５０ｒａｍ×４．６ｒａｍ，５ ｍ）。 ２．４线形关系考察精密吸取对照品溶液２ｍＬ、４ｍＬ、６ｍＬ、 １．２试药：龙胆苦苷对照品（１１０７７０—２００６１１，购自中国 ８ｍＬ、１０ｍＬ，定容至１０ｍＬ，吸取１０ｍＬ注入高效液相色谱 药品生物制品检定所），１Ｏ批龙胆药材（分别粉碎过５号筛， 仪，以龙胆苦苷质量浓度为横坐标，峰面积Ａ为纵坐标，绘 于４５℃干燥箱中干燥至恒重），甲醇（天津科密欧试剂有 制标准曲线。得回归方程，Ｙ＝３０９．７２Ｘ一１６．７８８（ｒ＝－０．９９９８）， 限公司；分析纯），甲醇（天津科密欧试剂有限公司；色谱 龙胆苦苷在０．Ｉｍｇ／ｍＬ～１．０ｍｇ／ｍＬ之间线性良好。 纯），水（娃哈哈纯净水）。 ２．５精密度试验：精密吸取对照品溶液１Ｏ Ｌ，连续６次注 此课题为哈尔滨商业大学研究生基金课题 ３２０· 黑龙江医药Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏ１．２３ Ｎｏ．３ ２０１０ 高效液相色谱一串联质谱法测定苯巴比妥钠注射液中的有关物质 孙煌，付璀莹，娄志红，多 凯．姜连阁，白政忠 黑龙江省药品检验所（哈尔滨 １５０００１） 摘 要目的：报道了苯巴比妥钠注射液中有关物质的高效液相色谱一串联质谱的鉴定方法。方法： 采用 高效液相色谱一串联质谱法测定苯巴比妥钠注射液中的有关物质。色谱柱为Ｃ。 柱，流动相为０．５％乙酸溶液一甲 醇（４０：６０），流速为０．２５ｍｌ／ｍｉｎ；配有电喷雾离子源的三级四极杆型质谱仪。结果：根据色谱图、相对分子质量 及二级质谱图确定１个降解产物。结论：本法能够排除辅料的干扰，确定其降解产物，为考察苯巴比妥钠注射液 的稳定性和控制产品质量确定物质基础。 关键词：高效液相色谱一串联质谱（ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ）苯巴比妥钠注射液；有关物质 中图分类号：Ｒ．９２７．２ 文献标识：Ａ 文章编号：１００６—２８８２（２０１０）０３—３２０—０３ Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈｅｎｏｂａｒｂｉｔａｌ Ｓｏｄｉｕｍ Ｉｎｉｅｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｅｓｉ—ＭＳ／ＭＳ Ｓｕｎ Ｈｕａｎｇ，ｅｔ ａｌ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ｔｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｈａｒｂｉｎ １５０００１） Ａｂｓｔｒａｃｔ ０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈｅｎ０ｂａｒｂｉｔａｌ Ｓｏｄｉｕｍ Ｉｎｊｅｅｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＬＣ－ＭＳ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨＰＬＣ—ＭＳ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈｅ－ ｎｏｂａｒｂｉｔａｌ Ｓｏｄｉｕｍ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ一０．５％ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（６０：４０），ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．２５ ｍＬ／ｍｉｎ； 表１ 加样回收结果（ｎ＝６】 ２．７加样回收试验：取同一种已知含量的龙胆药材粗粉６ 取样量样品中龙胆苦加入龙胆苦苷 测得龙胆回收率 平均 ＲＳＤ 份，分别以含量１００％的比例加入龙胆苦苷对照品，注入 （ｇ）苷的含量Ⅱｌｇ对照品的含量Ⅱｌｇ苦苷含Ｉｌｌｇ（％） （％） （％） 液相色谱仪。测得龙胆苦苷平均加样回收率为９９．３８％， ＲＳＤ为Ｏ．６２％。 ２．８稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别在０、４、８、 １６、２４ｈ后注入液相色谱仪，测得龙胆苦苷峰面积的ＲＳＤ＝０． ８４％。结果表明龙胆样品至少在２４ｈ内是稳定的。 ２．９样品测定：取１Ｏ批龙胆药材粉末各１ｇ，精密称定，按 上述样品溶液制备方法制备和色谱条件，测定龙胆苦苷的 含量，测定结果见表２。 样品 取样量 峰面值 龙胆苦苷量 龙胆苦苷 ３结论 编号 （ｇ） （ｍＡＵ） （ｍｇ） 含量（％） 采用高效液相色谱法测定中药龙胆中龙胆苦苷的含量， 经对供试品及对照品制备方法、测定条件、线性关系考察、 精密度试验、重复性试验、回收率测定、稳定性试验等方 法学考察，确定了含量测定方法。该方法精密度、重现性 好，分离度符合规定，方法稳定，经对样品检测数据的考 察，确定该含量测定方法具有可应用性。 参考文献 【１】刘明韬．龙胆的化学成分研究ｆＤ】．沈阳药科大学，２００４． 【２】陈文华，张淑杰，管春梅，等．高效液相色谱法测定龙胆草中龙胆 苦苷的含量【Ｊ］．中国医学检验杂志，２００４，５（３）：２４６—２４７ 人液相色谱仪，测定龙胆苦苷的平均峰面积为２５２１．７０３８，峰 【３】张颖君．藏药黑边假龙胆的化学成分研究【Ｊ】．云南植物研究， 面积的ＲＳＤ＝０．９５％，表明进样精密度良好。 １９９４．１６（４）：４０１—４０６． ２．６重复性试验：取１号龙胆样品，平行制备６份供试品 【４】国家药典委员会编．中国药典２００５年版一部【ｓ】．北京：化学 溶液，注入液相色谱仪，测得龙胆苦苷含量的ＲＳＤ＝Ｉ．９１％。 工业出版社，２００５ 收稿日期：２０１０—０３—０３
