弟１２９１３３年 ２月 ．２期 Ｃｈｉ …－ｎａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｌｒａｄｅ — ：～ 实验分析 ＨＰＬＣ法测定盐酸氨溴索有关物质 陆雪丽付建赵海桥赵永娟 ２７４５００） （山东方明药业集团股份有限公司，山东菏泽摘要：目的建立高效液相色谱法测定盐酸氨溴索有关物质的方法。方法采用Ｗｅｌｃｈｒｏｍ—Ｃ１８（５ ｉｎ，４ ６＂２５０ｍｍ）色谱柱，流动相为 ０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二铵溶液（用磷酸调ｐＨ值至７．０）～乙腈（５０：５０），检测波长２４８ｎｍ，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，进样量为２ｏ １。结果在该色谱条件下，盐酸 氨溴索与各杂质分离良好。结论该方法专属性强、灵敏度高、重复性好，可用于有关物质的检测。 关键词：盐酸氨溴索 有关物质 高效液相色谱法 盐酸氨溴索（Ａｍｂｒｏｘｏｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）为溴己新的活性代谢产 物，能促进肺表面活性物质的分泌及肺道液体分泌，促进痰液溶解， 显著降低痰粘度，增加支气管粘膜纤毛运动，促进粘液排出。主要用 于急、慢性呼吸道疾病引起的痰液粘稠、咳痰困难等。中国药典…中 相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。分别精密量取贮备液ｌ、 ２．５、４、５、６、７．５ｍｌ置５０ｍｌ容量瓶中，分别加流动相稀释至刻度， 摇匀。照“１”项下色谱条件测定，结果盐酸氨溴索在２ ０２４ ＬＬ ｇ／ｍｌ～ １５．１８ ｇ／ｍｌ范围内，回归方程为Ｙ＝３２８１１Ｘ＋４５９， （ｒ＝０．９９９７， 未对本品的已知杂质进行控制，为有效控制产品质量，本文采用高效 液相色谱（ＨＰＬＣ）法，参考有关文献＿２＿。 对盐酸氨溴索中有关物质进 行了检测，结果该方法专属性强、灵敏度高、重复性好，可用于有关 物质的检测。 、 一、仪器与试药 １．仪器 高效液相色谱仪（岛津ＬＣ一２０ＡＴｖｐ泵，ＳＰＤ一２０Ａｖｐ紫外检测 器），ＵＶ２４５０紫外一可见分光光度计。 ２样品及试药 盐酸氨溴索对照品（中国食品药品检定研究院，批号： １００５９９—２０１２０３，含量：１００．０％）；盐酸氨溴索（山东方明药业集团 股份有限公司，批号：１２０９０１、１２０９０２、１２０９０３）；盐酸氨溴索杂质 Ｂ（反式一４一（６，８一二溴一１，４二氢喹唑啉一３（２Ｈ）一基）环已醇）、 杂质Ｃ（反式一４－ｉｆ（Ｅ）一２一氨基一３，５一二溴苄基Ｊ氨基】环己醇）、杂质 Ｄ（顺式一４－［（２一氨基一３，５二溴苄）氨基］环己醇）、杂质Ｅ（２一氨基 一３，５一二溴苯甲醛）均为山东方明药业集团股份有限公司自制；乙腈、 磷酸为色谱纯；磷酸氢二铵为分析纯；水为纯化水。 二、方法与结果 １．色谱条件 色谱柱为Ｗｅｌｃｈｒｏｍ—ｃ】８柱（５ＩＸｍ，４．６＂２５０ｍｍ），流动相为 Ｏ．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二铵溶液（用磷酸调ｐＨ值至７．０）一乙腈（５０：５０）， 检测波长为２４８ｎｍ，进样量为２０ＩＸ１。 ２．溶液的配制 ２．１供试品溶液 取本品约２５ｍｇ，精密称定，置２５ｍｌ量瓶中，加流动相溶解并稀 释至刻度，摇匀，即得。 ２．２对照溶液 精密量取供试品溶液ｌｍｌ，置１００ｍｌ量瓶中，加流动相稀释至刻 度，摇匀，即得。 ２．３杂质对照品溶液 精密称取盐酸氨溴索杂质Ｂ、杂质Ｃ、杂质Ｄ、杂质Ｅ对照品适 量，加流动相溶解并稀释制成每ｌｍｌ各约含ｌ ｇ的溶液，即得。 三、方法学研究 １．专属性试验 破坏性试验：取样品适量，经酸、碱、氧化、加热、光照破坏后， 按…１’项下色谱条件进行测定，记录色谱图。结果表明，本品经酸、 碱、氧化、热、光照破坏试验，降解产物均能检出，且与主成分峰能 达到良好分离。峰纯度检查符合规定，说明本色谱条件专属性良好。 ２．线性范围 精密称取盐酸氨溴索对照品１０．１２ｒａｇ，置１００ｍｌ量瓶中，加流动 ｎ＝６），盐酸氨溴索浓度与峰面积线性良好。 ３精密度试验 取线性项下贮备液５ｍｌ，置于５０ｍｌ量瓶中，加流动相稀释至刻 度。精密量取２Ｏ ｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图。溶液重复测定６ 次，结果峰面积ＲＳＤ为１．１％。结果表明本方法的精密度良好。 ４．定量限 信噪比约为１０：１，得盐酸氨溴索的定量限为０．２ｎｇ，杂质Ｂ的定 量限为Ｏ．６ｎｇ，杂质Ｃ的定量限为Ｏ．８ｎｇ，杂质Ｄ的定量限为Ｏ．６ｎｇ， 杂质Ｅ的定量限为Ｏ．４ｎｇ。 ５．检测限 信噪比约为３：１，得盐酸氨溴索的检测限为０．０６１ｎｇ，杂质Ｂ的 检测限为Ｏ．２ｎｇ，杂质Ｃ的检测限为０．２５ｎｇ，杂质Ｄ的检测限为 Ｏ．２ｎｇ，杂质Ｅ的检测限为０．１２ｎｇ。 ６．稳定性 取盐酸氨溴索杂质Ｂ、杂质Ｃ、杂质Ｄ、杂质Ｅ对照品，精密称 定，加流动相溶解并稀释制成每ｌｍ！约含ｌ ｇ的混合溶液，摇匀，在 室温（２５℃）条件下，分别于０、２、４、６、８小时，照“１”项下色谱 条件测定，结果杂质Ｃ溶液变化比较大，故杂质Ｃ对照品溶液需临用 新配。 ７．样品测定 按“２”项下方法配制供试品溶液、对照溶液及杂质对照品溶液， 照“ｌ”项下色谱条件，进行测定，杂质Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ按外标法计算， 其他杂质按主成分自身对照法计算，结果三批样品中杂质Ｂ分别为 （）．０１５％、０．０１４％、Ｏ．０１５％，杂质Ｃ、Ｄ、Ｅ均未检出，总杂质分别为 ０．０１６％、０．０ｌ７％、０．０１８％。 四、讨论 本实验对ＨＰＬＣ法测定盐酸氨溴索有关物质的方法学进行了研究， 结果盐酸氨溴索分别在酸、碱、氧化、光照及加热条件中进行强制破 坏，各降解产物均能检出，且与主成分峰能达到良好分离。试验结果 表明杂质Ｃ溶液稳定性较差，杂质Ｃ对照品溶液及样品溶液应临用新 配。本方法用于测定盐酸氨溴索的有关物质，专属性强、灵敏度高、 重复性好，结果准确可靠。 参考文献 【１ｔ国家药典委员会中华人民共和国药典２０１０年版（二部）【Ｓ＿北京：中国医药科技出版社． ２０１０：７６５—７６６ 【２】付建，苏贵勇，赵海桥ＨＰＬＣ法测定盐酸氨溴索注射液的含量和有关物质 齐鲁药事， ２０１２，３１（２）：８４—８７ ［３１ ＥＵＲＯＰＥＡＮ ＰＨＡＲＭＡＣＯＰＯＥＩＡ ７ ＯＩＳＩ Ｅｕ ｒｏｐｅａｎ Ｄｉｒ ｅｃｔｏｒａｔｅ ｆｏｒ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ａｍｂｒｏｘｏｌ ＨｖｄＴ０ｃｈｌｏｒ１ｄｅ：１３６５—１３６６ ● 趣＿叠巷 。 ： ８ ｌ中国化Ｔ贸易ｌ ３０３
