烯效唑(S-3307)对小麦幼苗生长发育的影响
摘要： 此次实验是采用烯效唑的不同浓度浸种小麦种子，以此来研究小麦的幼苗形态和生理指标。
在这次实验中共设0、10、30和50mg／L的烯效唑浸种4个处理，对小麦种子的呼吸强度、幼苗根系活力、幼苗叶绿素含量、丙二醛含量等指标进行了测定。实验结果说明：不同浓度烯效唑浸种对小麦幼芽呼吸强度有一定的抑制作用；烯效唑能增大根/冠比；提高根系活力；促进叶绿素含量的增加；但是丙二醛含量降低。烯效唑浸种能使小麦矮化壮苗、增强植物抗性。
关鍵词： 小麦 烯效唑 生长 形态指标 生理指标
前言：烯效唑是一种高效、低毒的生长延缓剂, 具有活性高、低毒、低残留等特点，
[11-12]
广泛适用于农作物、蔬菜、果树、草坪等 。烯效唑能减缓细胞的分裂和伸长，抑制节间生长，幼苗高度明显降低，茎粗和分蘖数增加，增强根系活力，提高叶绿素含量，延缓作物衰老，促进花芽形成，根冠比增加和提高光合速率等生理效应。种子经过浸种法处理可以充分吸收水分，利于催芽播种；可以使种子吸收一定量的农药，既可以杀灭种子携带的有害生物，又可以防止幼苗遭受病虫的危害，浸种可提高秧苗根系活力和根冠比，增加叶绿素的含量，从而保证健壮苗的形成。近些年对S3307大量实验研究说明，S3307浸种可使小麦幼苗健壮、叶片增加、叶色浓绿、根系发达和分蘖数增多，促进成穗，并有明显的增产效果[4] 1、材料与方法
1.1 材料与试剂：经不同烯效唑浓度处理的小麦种子，90%S-3307，0.1%消毒液HgCl2 1.2 方法：
1.2.1 种子的前处理
精选小麦种子，用0.1%HgCl2消毒10min,用清水冲洗干净消毒液，分别用0、10、30、50mg/ml的多效唑溶液浸种20小时，倒掉浸泡液，将种子放在培养盘中，在250C-280C的恒温箱中催芽三天，待长出幼芽后，测定幼芽的呼吸强度。 幼苗栽植与培养(水培法)
选取在不同浓度S-3307浸泡的发芽种子，栽植于塑料杯的纱网上，种植2杯，每杯种植30株，并标上记号，二周后用于测定幼苗的形态指标和生理指标。 2、测定项目
2.1 发芽小麦呼吸速率的测定(小筐子瓶法) [5]
2.1.1 空白值的测定：用移液管移取20mlBa〔OH〕2溶液在广口瓶中并振荡，使瓶中的CO2充分吸收，滴两滴酚酞。用浓度为1/44的草酸滴定，边滴便摇动广口瓶，使其充分显色。
2.1.2 样品值的测定：用移液管移取20mlBa〔OH〕2溶液在广口瓶中并振荡，使瓶中的CO2充分吸收。取不同浓度发芽小麦各30株，放进小网里里并用挂于小钩上放进广
1
口瓶作用30分钟，其间不断晃动。同前滴定。 2.2 幼苗形态指标的测定
2.2.1 小麦株高、根长与发根数的测定：每小组分别取0、10、30、50 mg／ml多效唑处理的小麦幼苗10株，用直尺测量小麦幼苗的株高及所有根的最长根长，计算各组的平均株高、根长及发根数。
2.2.2小麦幼苗根/冠比的测定：用上面测定后的植株，除去其种子部分，把根、冠分开分别放在铝盒内，标上记号。然后在105oC杀青20min，在80℃下烘干5小时至恒重，待冷却后分别测定地上部分和根的干物质重量，计算根/冠比值。 2.3 幼苗根系活力的测定(TTC法) [6] 2.3.1 取长约0.5cm的根尖50根。
2.3.2 将小瓶用磷缓冲液润洗后，用移液管移取混合液〔2ml磷酸+2ml0.4%TTC〕在小瓶内，并将根尖放入其内，摇匀。
2.3.3 在37℃水浴中暗反应1小时，取出根尖，用吸水纸将根尖吸干。
2.3.4根尖的色素提取：将研钵用乙酸乙酯润洗后，加入3ml乙酸乙酯，研碎。将上清液倒入试管中，用乙酸乙酯少量多次润研钵后倒入试管中。最后用乙酸乙酯定容至10ml。
2.3.5 比色测定：乙酸乙酯作参比液。在485nm下测定样品吸光光度值。 2.3.6 制定标准曲线。〔全班一组〕
2.3.6.1 用1mg/mlTTC溶液配成20ug/ml的TPF〔红色〕溶液50ml，将20ug/mlTPF配成0、2、4、6、8、10、12、14ug/ml溶液各10ml，然后进行比色测定，在485nm下测定OD值，绘制标准曲线。
2.4 幼苗叶片中叶绿素含量测定(分光光度计法) [7] 2.4.1 取长4cm、宽0.3cm的叶片5片。
2.4.2 色素提取：将叶片放入用80%乙醇润洗后的研钵中，加入石英砂、CaCO3少量，加入80%乙醇少量多次研钵，用漏斗过滤到25ml容量瓶中，用乙醇定容。
2.4.3 比色测定：80%乙醇润作参比液。分别在663nm、645nm下测定吸光光度值。 2.4.4 计算chl a、b含量及总量。 2.5 丙二醛〔MDA〕含量测定〔TBA法〕[8]
2.5.1 叶片处理：将剩下的叶片剪成0.5cm长的小段混匀，称取1g加入研钵中。加入
2
2ml 10%TCA研磨成匀浆状。再加入3ml 10%TCA混匀，放入离心管，在3000转/分下离心10min，上清液位提取液。 2.5.2 显色测定：取三支试管：
2.5.2.1 参比液〔一大组一支〕3ml10%TCA+3ml0.5%TBA 2.5.2.2 叶样液 3ml样液+3ml0.5%TBA 2.5.2.3 根样液 3ml样液+3ml0.5%TBA
将叶样液与根样液在沸腾水浴中加热10分钟，待试管冒小泡时开始计时。冷却后，在分光光度计上波长为450、532、600nm下测定OD值。 3、结果分析 3.1 呼吸强度测定
表1 不同浓度S-3307对发芽小麦呼吸强度的影响
项目
测定值〔ml〕 CO2(mg)
0mg/L
10mg/L
30mg/L
50mg/L
呼吸强度〔CO2mg/株·h〕 项目
空白值〔ml〕
呼吸强度〔CO〕=〔V1－V2〕×Ｃ×44/
0mg/L
10mg/L
30mg/L
50mg/L
实验数据说明，S-3307在0—30mg/L浓度范围内会随浓度增加而抑制小麦种子的呼吸强度。但是在50mg/L时，呼吸强度明显上升，说明S-3307这种生长调节剂，经过其浸泡的种子在萌发期间呼吸强度受抑制，只是处理的浓度必须在50mg/L才能抑制器呼吸强度。
3.2 幼苗叶片中叶绿素含量的测定
表2 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗叶绿素含量的影响
3
处理浓度mg/L 0 10 30 50
A(Chla) A(Chlb) Chla的含量(mg·dm-2)
Chlb含量 (mg·dm-2)
Chl总含量 (mg·dm-2)
按Arnon公式计算有：
Chla含量〔mg/dm2〕=(12.7OD663—2.69OD645)×V／〔S×10-2×1000〕 Chlb含量〔mg/dm2〕=(22.9OD645—4.68OD663)×V／〔S×10-2×1000〕 Chl总含量〔mg/dm2〕=Chlb+Chla
实验结果说明，经过不同浓度S-3307处理的小麦，能够使叶片中叶绿体色素有不同程度的增加，且浓度为30 mg/L的S-3307对小麦叶片叶绿体色素含量增加最明显，超过30mg/L后有下降趋势，因此烯效唑浓度在30mg/L浸种小麦效果最正确。所以S-3307可以增加小麦叶片的叶绿素含量，从而提高光合作用的效率，促进有机物合成，增强储能，有利于增产增收。 3.3 幼苗根系活力的测定
表3 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗根系活力的影响
处理浓度mg/L 0 10 30 50
吸光度值 0.123
根系活力〔μgTPF/株·h〕 0.369
标准曲线方程：Y=0.0314x R2=0.9784 根系活力(ug TPF／)=C×V／株×t 结果说明，S-3307在一定浓度范围内促进根系活力，其中浓度为30 mg/L的S-3307处理过的小麦，根系活力最强，在50 mg/L的浓度处理的小麦根系活力开始降低，所以适宜浓度的S-3307处理小麦种子后，能够增强小麦幼苗根系活力，增强根系吸收水分、矿质元素的能力，获得充足的营养，有利于小麦茁壮成长，提高成活率，在农业生产上能够提高产量。 3.4 幼苗形态指标的测定 4
表4 不同浓度多效唑浸种后幼苗的平均根长、平均苗高、发根数和根/冠比
处理浓度mg/L 平均茎高/cm 平均根长/cm 发根数 根/冠值
实验数据说明, S-3307在一定浓度范围内，对小麦幼苗的根生长具有促进作用，促进了分蘖；而对苗的生长具有抑制作用，减缓植株伸长。与对照相比，在S-3307浓度为30 mg/L时，根的平均长度最长，而大于30 mg/L 时，根长又有所减小。S-3307对根的生长有促进作用，当处理为30mg/L时，对根的生长有非常明显的促进作用，根长到达20.95，根冠比值最大，超过其浓度根冠比值降低。 所以经过适宜浓度的S-3307浸种处理的小麦种子能够防止小麦徒长，能促进小麦根系的生长，使小麦植株发育矮壮，增加其抗倒伏能力。
表5 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗MDA含量的影响
根： 处理浓度 0 10 30 50 叶： 处理浓度 0 10 30 50 根
5
OD450
OD532
OD600
OD450
OD532
OD600
处理浓度mg/L 0 10 30 50 叶 处理浓度mg/L 0 10 30 50
MDA的浓度(μmol·L)
-1
MDA的含量〔mol·gFW〕 ×10-2 ×10-2 ×10-2 ×10-2
-2
MDA的浓度(μmol·L-1)
MDA的含量〔mol·g-2FW〕 ×10-2 ×10-2 ×10-2 ×10-2
C( u mol/L ) = 6.45× 〔OD
MDA的含量〔u mol/g FW)=C×V×10-3/W
实验说明，在一定浓度范围内，经过烯效唑处理的小麦叶片中MDA的含量先增加后减少，其中30mg/L 的S-3307处理幼苗叶片和根中MDA的含量最多，超过30mg/L的S-3307处理幼苗叶片中MDA的含量有所减少。可能烯效唑浸种会提高小麦的抗逆性，进而提高成活率所以能够提高产量。 4、结论
该试验结果说明，不同浓度的烯效唑浸种处理均可不同程度地提高小麦种子的发芽率和发芽势、叶绿素含量及根冠比，种子的发芽势、发芽率是衡量植物是否具备产生壮苗能力的主要指标[9]， 根冠比是衡量根系吸收营养物质能力和根系发育情况的指标。叶绿素是植物合成有机物的必需物质，它含量的高低直接反映着植物合成有机物能力的高低[10] ，不同的烯效唑浓度处理会使MDA含量先增加后减少。多效唑处理可能会提高种子的发芽率、根冠比、叶绿素含量，使得植物增产，能增强植物抵抗不良环境的能力。
参考文献
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6
[2] 叶钟音,浸种,现代农药应用技术全书,2002 [3] 袁会珠,烯效唑,农药使用技术指南,2004
[4] 高希武,郭艳春,王恒亮,艾国民,张保民,烯效唑,新编实用农药手册,2006 [5] 熊庆娥,植物呼吸速率的测定,广口瓶法,植物生理学实验教程,2003.8 68 [6] 熊庆娥,植物根系活力的测定,TTC法,植物生理学实验教程,2003.8 30 [7] 熊庆娥,叶绿素含量的测定,分光光度法,植物生理学实验教程,2003.8 55 [8] 熊庆娥, 膜脂过氧化产物丙二酮含量的测定,植物生理学实验教程,2003.8 126 [9] 吕印谱,马奇祥,烯效唑,新编常用农药使用简明手册,2004 [10] 袁会珠,烯效唑,农药使用技术指南,2004
[11] FLETCHER R A.Comperative fungitox and plant regulation of triazole derivatives[J].Plant Cell Physiol, 1986, 27( 2) : 367- 371.
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