・临床研究・ 中国医药导报２０１４年４月第１１卷第１２期 人脑胶质瘤组织中微小ＲＮＡ－２ １与磷酸酶 和张力蛋白同源基因的表达及其临床意义 薛 飞 沈照立 沈睿 陈先震 同济大学附属第十人民医院神经外科，上海２０００７２ ［摘要】目的初步探索ｍｉｃｒｏＲＮＡＲ一２１（ｍｉＲ一２１）与磷酸酶和张力蛋白同源蛋白（ＰＴＥＮ）基因在人脑胶质瘤中的表 达及其临床意义。方法采用ＲＴ—ＰＣＲ检测２１５例胶质瘤（胶质瘤组）和５０例正常人脑组织（对照组）中ｍｉＲ— ＮＡ一２１的表达水平，采用ＳＰ免疫组化法检测ＰＴＥＮ蛋白的表达情况，并探讨二者在胶质瘤组织中表达的相关 性。结果ｍｉＲ一２１在胶质瘤组中的相对表达量（２－Ａ３ＬＴ）（４．２２２￣１．７５５）明显高于对照组织（１．０６４￣０．１２６），差异有统 计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＰＴＥＮ在对照组中的表达率（１００．００％）高于胶质瘤组（４９．３０％），差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。胶质瘤组中ｍｉＲ一２１的表达量与ＰＴＥＮ在胶质瘤组中的阳性表达率呈负相关（ｒ＝一０．４４８，Ｐ＜０．０５）。结论 ｍｉＲ一２１在胶质瘤组织中的表达升高，可能通过负性调节ＰＴＥＮ的表达，在胶质瘤的发生发展中发挥作用，二者的 表达可以显示胶质瘤的恶性程度，通过检测二者在胶质瘤中的表达有助于评价胶质瘤的恶性程度和生物学行为。 【关键词］ｍｉｃｒｏＲＮＡＲ－２１；磷酸酶和张力蛋白同源蛋白；脑胶质瘤；相关性 ［中图分类号］Ｒ７３９．４１ ［文献标识码］Ａ 【文章编号】１６７３—７２１０（２０１４）０４（ｃ）一００３６—０４ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏ ＲＮＡ－２１ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｇｅｎｅ ｉｎ ｇｌｉｏｍａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｓ ＸＵＥＦｅｉ ＳＨＥＮＺｈａｏｌｉ ＳＨＥＮＲｕｉ ＣＨＥＮＸｉａｎｚｈｅｎ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ １０ｔｈ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｌｆｉｌａｔｅｄ ｔｏ Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００７２，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏＲＮＡＲ一２１（ｍｉＲ－２１）ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎ ｈｏｍｏｌｏｇ ｄｅｌｅｔｅｄ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｔｅｎ（ＰＴＥＮ）ｉｎ ｇｌｉｏｍａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｅａｎｅｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ一２１ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＴ—ＰＣＲ ｉｎ ２１５ ｇｌｉｏｍａ（ｇｌｉｏｍａ ｇｒｏｕｐ）ａｎｄ ５０ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）．Ｓ－Ｐ ｉｍｍｕｎｏ－ ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＰＴＥＮ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ一２１ ｆ２ ｉｎ ｔｈｅ ｇｌｉｏｍａ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ（４．２２２￣１．７５５），ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（１．０６４￣０．１２６），ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＰＴＥＮ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｇｌｉｏｍａ ｇｒｏｕｐ（４９．３０％）ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（１００．００％），ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅ— ｔｗｅｅｎ ｍｉＲ－２１ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＰＴＥＮ ＝一０．４４８．Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ｍｉＲ一２１ ｍｉｇｈｔ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＰＴＥＮ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｓｈｏｗ ｔｈｅ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ， ｉｔ ｉｓ ｈｅｌｐｆａｌ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｄｅｇｒｅｅ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ ｂｙ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｂｏｔｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ［ｍｉＲ一２１；ＰＴＥＮ；Ｇｌｉｏｍａ；Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ 微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ）是真核生物中一种长度约 为２Ｏ～２２个核苷酸的非编码小分子ＲＮＡ，通过特异 癌和膀胱癌等肿瘤细胞中的表达都表现出显著异 常［３－５］，在胶质瘤表达的ｍｉｃｒｏＲＮＡ中，ｍｉＲ２１表达水 的ｍｉＲ２１的靶基因包括：张力蛋白同源（ＰｒＥＮ）、ＰＤ— ＣＤ４、ＲＥＣＫ、ＴＩＭＰ３、Ｆａｓｌ、ＴＲＩＰ、Ｔａｐ６、ＨＮＲＰＫ及Ｓｐｒｙ２， 性识别并结合靶ｍＲＮＡ的３ 非编码区（３＂ＵＴＲ）使靶 平升高最为明显［６１。通过计算机预测软件并经实验证实 ｍＲＮＡ降解，发挥其对基因的转录后，在细胞的 生长、分化、凋亡及代谢等活动中发挥着重要作用ｌ１ｌ。 最近几年的研究发现，ＭｉｃｒｏＲＮＡ在肿瘤的发生、发展 证据表明，微小ＲＮＡＲ一２１（ｍｉＲ一２１）在结肠癌、乳腺 ［基金项目】上海市科学技术委员会科研计划项目（编号１２ ＺＲ１４２３４００）。 这些基因都发挥着抑制肿瘤生长的作用［７１。其中，磷酸 因突变或缺失与多种恶性肿瘤密切相关嘲。ｍｉＲ２１对 和转移中同样起到非常重要的作用嘲，并有大量实验 酶和ＰＴＥＮ基因是具有磷酸酶活性的抑癌基因，其基 ＰＴＥＮ的直接作用已经在胶质瘤、膀胱癌和胰腺 癌中得到证实。目前尚没有对ｍｉＲ２１和ＰＴＥＮ二者在 胶质瘤中的表达相关性报道，考虑到ｍｉＲ２１和ＰＴＥＮ 【通讯作者】陈先震（１９７６一），男，副主任医师，副教授，硕士 生导师：研究方向：显微神经外科微创治疗各种颅内肿瘤、 脑血管病、脊髓肿瘤。 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１ １ Ｎｏ．１ ２ Ａｐｒｉｌ ２０１ ４ 在肿瘤发生发展中的重要作用，研究二者在胶质瘤组 织中的表达及二者的相关性，为探讨ｍｉＲ２１和ＰＴＥＮ 中国医药导报２０１４年４月第１１卷第１２期 ・临床研究・ 作为肿瘤标志物的可能性提供重要依据，并为胶质瘤 的诊断、治疗提供新的途径和方法。 １资料与方法 １．１一般资料 １．３．３ Ｓ Ｐ法检测胶质瘤组织中ＰＴＥＮ的表达采用ＳＰ 法进行ＰＴＥＮ检测，操作流程按照试剂盒说明书进 行，用ＰＢＳ作为阴性对照，已知ＰＴＥＮ阳性表达的胶 质瘤标本作为阳性对照。ＰＴＥＮ阳性表达细胞均为细 收集２００８～２０１２年同济大学附属第十人民医院 胞核或胞浆着色．呈棕黄色或黄褐色均匀颗粒状 在 高倍显微镜下，每张切片均选择５个视野胶质瘤细胞 密集区域进行观察，每个视野内计数１００个胶质瘤细 （以下简称“我院”）神经外科胶质瘤患者手术切除的 胶质瘤石蜡包埋组织标本２１５例为胶质瘤组，其中男 １１８例，女９７例，男女比例１．２１：ｌ；年龄６～７０岁，平均 胞，阳性细胞数≥５０％为强阳性（＋＋＋），２５％ ＜５０％ （４７．５０＋２．２１）岁。选择同期行脑外伤减压术的脑组织 为阳性（＋＋），５％～＜２５％为弱阳性（＋），＜５％为阴性（一）。 ５０例为对照组，其中男女比例为１．１９：１；年龄８～６９ 岁，平均（４６．３０＋２．０３）岁。病例组与对照组年龄和性别 差异无统计学意义（Ｐ＜０．０５），具有可比性。所有患者 均为原发，有详细的临床资料和手术记录，无其他严 重并发症。且所有患者均为第一次手术治疗．术前均 未行放、化疗及免疫治疗。所有患者或家属知情同意 并签署知情同意书，本研究经过我院伦理委员会通 过。 １．２实验试剂 Ｔｒｉｚｏｌ购自美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司：ｍｉＲｃｕｔｅ ｍｉＲＮＡ ｃＤＮＡ第一链合成试剂盒及ｍｉＲｃｕｔｅ ｍｉＲＮＡ荧光定 量检测试剂盒购于北京天根生物技术有限公司：引物 由上海生工生物技术有限公司合成：ＳＰ试剂盒、ＤＡＢ 试剂盒、苏木精染液及鼠抗人ＰＴＥＮ单克隆抗体均购 自上海生工生物技术有限公司。 １．３实验方法 １．３．１组织总ＲＮＡ提取用眼科剪将存于一８Ｏ℃的组 织剪碎，加入１ ｍＬ Ｔｒｉｚｏｌ（将样品完全覆盖为宜），按 照Ｔｒｉｚｏｌ说明书提取组织中总ＲＮＡ。应用ＮＡＮＯ— ＤＲＯＰ ２０００超微量分光光度计进行检测，选择ＤＤ ）瑚 为１．８～２．０的ＲＮＡ于一８０ｑｃ保存备用。 １．３．２ ＲＴ—ＰＣＲ检测胶质瘤组织中ｍ１ Ｒ一２１的表达量 取总ＲＮＡ ０．５ Ｉｘｇ，应用ｍｉＲｃｕｔｅ ｍｉＲＮＡ ｃＤＮＡ第一 链合成试剂盒进行反转录，３７℃反应６０ ｍｉｎ，一８０℃备 用。ＰＣＲ扩增采用天根生物技术有限公司提供的 ｍｉＲｃｕｔｅ ｍｉＲＮＡ荧光定量检测试剂盒进行．上游引物 根据试剂盒提供的设计方法进行设计．ｍｉＲ２１的上游 引物为：５＂－ＧＣＧＧＴＡＧＣＴＴＡＴＣＡＧＡＣＴＧＡ一３ 。内参Ｕ６ 的上游引物序列为：５ 一ＧＣＴＴＣＧＧＣＡＧＣＡＣＡＴＡＴＡＣ— ＴＡＡＡＡＴ一３ ，下游引物由试剂盒提供。ＰＣＲ扩增条件 为：９４℃２ ｍｉｎ，４０个循环：９４℃，２０ Ｓ，６０℃，３５ Ｓ。每个 反应设三个复孑Ｌ，记录每个反应的ＣＴ值，实验结果 采用２－ＡＡＣＴ表示胶质瘤组织中ｍｉＲ一２１相对于正常人 脑组织的表达倍数（相对表达量），其中△△ＣＴ＝胶质 瘤组织（ＣＴ Ｒ＿２１一ＣＴＩＪ６）一正常脑组织（ＣＴ 一ＣＴＵ６）。 阳性率＝（各组总例数一阴性细胞数）／各组总例数。 １．４统计学方法 采用ＳＰＳＳ ｌ ８．０统计学软件进行数据分析．计量 资料数据用均数±标准差（ｘ＋－ｓ）表示，两组间比较采用 ｔ检验；计数资料用率表示，组问比较采用ｘ 检验，采 用Ｓｐｅｏｌ＂ｍ￣等级相关分析ｍｉＲ２１与ＰＴＥＮ表达量的 相关性，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２结果 ２．１ ｍｉＲ－２１在胶质瘤组织和正常组织中的表达 胶质瘤组中ｍｉＲ一２１的相对表达量（２‘△△ ） （４．２２２＿＋１．７５５）明显高于正常脑组织的对照组（１．０６４＋ ０．１２６），差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表１。 表１两组ｍｉＲ一２１的表达情况（ ） ２．２ ＰＴＥＮ在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达 胶质瘤组中ＰＴＥＮ的表达率为４９．３０％，正常脑 组织的对照组中ＰＴＥＮ的表达率为１００．００％，ＰＴＥＮ 在胶质瘤组中的表达率明显低于对照组，差异有统计 学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。见表２。 表２两组磷酸酶和张力蛋白同源基因的表达率情况 ２．３胶质瘤组织中ｍｉＲ－２１与ＰＴＥＮ表达的相关性 对２１５例胶质瘤组中ｍｉＲ一２１和ＰＴＥＮ的相对表 达情况进行相关性分析，结果显示，胶质瘤组织中 ｍｉＲ一２１与ＰＴＥＮ的阳性表达呈负相关（ｒ＝一０．４４８，Ｐ＜ ０．０５）。见表３。 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１ １ Ｎｏ．１ ２ Ａｐｒｉｌ ２０１ ４ ・临床研究・ 表３ ｍｉＲ一２１与ＰＴＥＮ在人脑胶质瘤组织中的表达相关性 中国医药导报２０１４年４月第１１卷第１２期 本研究通过ＲＴ—ＰＣＲ技术检测２１５例胶质瘤患 者中ｍｉＲ一２１的表达量．发现ｍｉＲ一２１在胶质瘤组织 中的表达显著高于正常脑组织。胶质瘤组织中ｍｉＲ一 ２１的相对表达量为（４．２２２￣１．７５５），正常脑组织中 注：ＰＴＥＮ：张力蛋白同源蛋白 ｍｉＲ一２１的相对表达量为（１．０６４￣０．１２６），差异有统计 学意义（Ｐ＜０．０５）。对２１５例胶质瘤组织中ｍｉＲ～２１ 和ＰＴＥＮ的表达情况进行相关性分析，结果显示胶质 瘤组织中ｍｉＲ一２１与ＦｒＥＮ的表达呈负相关（ｒ＝一 ０．４４８，Ｐ＜０．０５）。ｍｉＲ一２１在胶质瘤组织中的表达升 高．可能通过负性调节ＰＴＥＮ的表达，在胶质瘤的发 ３讨论 胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤，约占颅内肿 瘤的４６％，恶性胶质瘤的发生率为（５～８）／１０万［９１。胶 质瘤呈浸润性生长，没有明显界限，手术无法完全切 除。放疗、化疗不能特异性杀死胶质瘤细胞，并且对神 经系统有严重的毒副作用。胶质瘤是神经外科领域的 难题之一，至今没有突破性进展，且对其发生发展了 解不够透彻。因此，阐述其致病机制、寻找新的治疗手 段．对于攻克胶质瘤非常重要。 ｍｉＲ一２１在多种恶性肿瘤中表达均升高，这些肿 瘤包括卵巢癌、乳腺癌、胃癌、肝癌及宫颈癌，并通过 调节抑癌基因或细胞分化、凋亡相关的基因而促进肿 瘤的发生发展。已经在胶质瘤鉴定出表达量恒定改变 的ｍｉＲＮＡ，其中最显著的是ｍｉＲ一２１。ｍｉＲ一２１肿 瘤生长机制的研究取得了一些进展。其中，ｍｉＲ一２１在 人乳腺癌细胞系ＭＣＦ一７中通过程序性细胞死亡 基因一４（ＰＤＣＤ４）抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤细胞的 增殖 。通过筛选人结肠癌ｍｉＲＮＡ表达谱中过表达 的ｍｉＲＮＡ，发现ｍｉＲ一２１的过表达和淋巴结转移程度 高度相关…］。ＰＴＥＮ是磷酸酶家族中发现的第一个有 抑癌作用的基因，具有双磷酸酶活性，在细胞的迁移、 黏附及胚胎正常发育中发挥重要的生物学功能，并在 抑制肿瘤生长中也发挥重要作用。 Ｈｕａｎｇ等 运用实时定量ＰＣＲ和免疫组织化学 染色，分析并对比了ｍｉＲ一２１和ＰＴＥＮ蛋白在乳腺癌 组织和正常乳腺组织中的表达情况，研究结果表明 ｍｉＲ一２１在乳腺癌组织中表达水平高于对照组，而 ＰｒｒＥＮ在正常乳腺组织中的表达水平高于乳腺组织 中。并且ｍｉＲ一２１与ＰＴＥＮ蛋白的表达在乳腺癌组织 中呈负相关。有研究发现，ｍｉＲ一２１在肝细胞癌组织及 细胞株中均呈高表达；体外培养肝细胞癌细胞，敲低 ｍｉＲ一２１的表达后检测发现ＦＦＥＮ蛋白，发现其表达 量增加，而肝癌细胞的增生、转移及侵袭能力却降低， 可见ＰＴＥＮ作为ｍｉＲ一２１的靶基因，其表达与ｍｉＲ一２１ 呈负相关。在肿瘤细胞的增殖、侵袭中发挥重要最 用『１Ｏｌ。以上研究表明，在肝癌和乳腺癌中ＰＴＥＮ是ｍｉＲ一 ２ｌ的靶基因，然而Ｈａｔｌｅｙ等ｌｌ３］却认为在非小细胞肺癌 中ＰＴＥＮ并不是ｍｉＲ一２１的靶标，可见人们对于肿瘤 中ｍｉＲ一２１与ＰＴＥＮ的关系仍未达成共识。 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１ １ ＮＯ．１２ Ａｐｒｉｌ ２０１４ 生发展中发挥作用。二者的表达可以显示胶质瘤的恶 性程度，通过检测二者在胶质瘤中的表达有助于评价 胶质瘤的恶性程度和生物学行为。 综上所述，本研究为ＰＴＥＮ作为ｍｉＲ一２１的靶基 因提供了新的依据，ｍｉＲ一２１和ＦＩ＇ＥＮ的表达水平可 以胶质瘤的恶性程度，通过检测二者在胶质瘤中的表 达有助于评价胶质瘤的恶性程度和生物学行为。 ［参考文献】 【１］Ｃｈｅｎ ＣＺ，Ｌｉ Ｌ，Ｌｏｄｉｓｈ ＨＦ，ｅｔ ａ１．ＭｉｅｒｏＲＮＡｓ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｈｅｍａ ｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｌｉｎｅａｇｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ［ＪＪ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４，３０３ （５６５４）：８３—８６． ［２］Ｃａｌｉｎ ＧＡ，Ｓｅｖｉｇｎａｎｉ Ｃ，Ｄｕｍｉｔｒｕ ＣＤ，ｅｔ ａ１．Ｈｕｍａｎ ｍｉｃｒｏＲ— ＮＡ ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ ｌｏｃａｔｅｄ ａｔ ｆｒａｇｉｌｅ ｓｉｔｅｓ ａｎｄ ｇｅ— ｎｏｎｌｉｃ ｒｅｇｉｏｎｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｃａｎｃｅｒｓ ｌＪ１．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００４，１０１（９）：２９９９—３００４． ［３】Ｙａｏ Ｑ，Ｘｕ Ｈ，Ｚｈａｎｇ ＱＱ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２１ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｃｅｌｌ ｐｒｏ— ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄ ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ４（ＰＤＣＤ４）ｉｎ ＨｅＩ ａｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ『Ｊ］． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ， ２００９，３８８（３）：５３９－５４２． ［４ Ｗｉ４］ｃｋｒａｍａｓｉｎｇｈｅ ＮＳ，Ｍａｎａｖａｌａｎ Ｔｒ，Ｄｏｕｇｈｅｎｙ ＳＭ，ｅｔ ａ１． Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｍｉＲ一２ １ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｍｉＲ一２１ ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎＭＣＦ一７ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ［Ｊ】．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９，３７（８）：２５８４ ２５９５． 【５］Ｐａｐａｇｉａｎｎａｋｏｐｏｕｌｏｓ Ｔ，Ｓｈａｐｉｒｏ Ａ，Ｋｏｓｉｋ ＫＳ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ一 ２１ ｔａｒｇｅｔｓ ａ ｎｅｔｗｏｒｋ ｏｆ ｋｅｙ ｔｕｍｏｒ—ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐａｔｈｗａｙｓ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２００８，６８（１９）：８１６４— ８６７２． ［６】Ｃｉａｆｒｅ ＳＡ，Ｇａｌａｒｄｉ Ｓ，Ｍａｎｇｉｏｌａ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ｍｏｄｕｌａ— ｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｅｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏ ＲＮＡｓ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ［Ｊ】＿ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２００５，３３４（４）：１３５１． ［７］Ｃｈｅｎｇ ＡＭ，Ｂｙｒｏｍ ＭＷ，Ｓｈｅｌｔｏｎ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｉｎｈｉｂｉ— ｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｉＲＮＡｓ ａｎｄｉｎｄｉｃａｔｉ０ｎｓ ｆｏｒ ａｎ ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍｉＲＮＡ ｉｎ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ１．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，２００５，３３（４）：１２９０—１２９７． ［８】Ｃｈｕ ＥＣ，Ｔａｒｎａｗｓｋｉ ＡＳ．ＰＴＥＮ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｍｅｄ Ｓｃｉ Ｍｏｎｉｔ，２００４，１０ （１０）：２３５—２４１． （下转第４１页） 中国医药导报２０１４年４月第１１卷第１２期 ・临床研究・ 言，在摘除眼球后，可以立刻将植人物安装在患者眼 综上所述，现阶段的眼部整形手术中，羟基磷灰 眶中，这样对患者同侧面部与眼眶的正常发育比较有 石这种材料的治疗效果最好，值得临床应用与推广。 利，而且能够预防患者眼窝凹陷。 ［参考文献】 本研究中，患者都没有打孔植入钉。患者义眼均 ［１］郑大凤，韩艳玲，邓莹莹，等．羟基磷灰石义眼座植入术 能够自如的活动。而且手术后，患者没有压迫感与沉 ５６例ｆＪ１．国际眼科杂志，２００９，９（４）：１３０—１３１． 重感，其原因可能是作为植入物的羟基磷灰石比患者 ［２】廖萱，彭远光，李建华．自体巩膜遮盖羟基磷灰石义眼座 眼球自身重量轻，在一定程度上减轻了患者穹窿部、 植入术的临床观察ｌＪ】川北医学院学报，２００６，２１（３）：１６９— 眼睑、眼外肌收缩拉力负担所导致。在治疗过程中，将 １７０． 两个塑料片和义眼座一起放于患者眼窝中心，能够顺 ［３】徐柒华，廖洪斐，陈惠英．低功率半导体激光预防和治疗 利的将植入物置于患者眼窝。但是一定要避免羟基磷 羟基磷灰石义眼座暴露的实验研究『Ｊ１．临床眼科杂志， 灰石粗糙不平植入困难的缺点ｌ ８ｌ。在修复眶骨缺损前， ２００８，１６（５）：１５８—１５９． 可通过美容面膜粉制作成患者健侧模型，在根据模型 ［４】马长胜，郭永波．羟基磷灰石义眼座植入８３例临床分析【ＪＪ． 利用羟基磷灰石制成所需形状，治疗过程中，将拼接 中国煤炭工业医学杂志，２００１，４（７）：１６４—１６６． 而成的羟基磷灰石植入到与患者骨膜相靠近的部位． ［５］于珍，李效岩，于大仆．羟基磷灰石义眼座两种不同术式植 并在患者四周骨膜中进行固定唧。这种植入方法简便 入的临床效果观察ｌＪ１．临床眼科杂志，２０１１，１９（２）：１３２— 易行，而且植入后能够保证外观和健侧相同，保证患 １３３． 者满意，所以此方法在临床中较为实用。对于一期植 ［６］江武东，方晓珊，江瑜，等．改良羟基磷灰石义眼座植人 入患者，在将其眼内容物摘除后，将巩膜保留在义眼 术临床效果分析［Ｊ１．华夏医学，２００９，２２（２）：３１８—３１９． 座前，能够有效降低植入物脱离概率 。而且也不会 ［７】穆雄铮．可塑性医用树脂和羟基磷灰石复合材料在眼眶 改变患者眼外肌解剖位置，术后患者能够自由转动眼 复杂畸形中的应用ｆＪ１．中华眼科杂志，２００５，３１（６）：４４７— 肌。这就为转动义眼片打下良好的基础。对于二期植 ４４９． 入物的患者，最为关键的是将４条直肌找出来。在没 【８】黄玉庚，钱定国，胡文禹．简易Ｉ期羟基磷灰石义眼座植 有确定直肌位置前，不可进行深部筋膜与球后麻醉…１。 入［Ｊ］．临床眼科杂志，２００７，１５（６）：１２５—１２６． ［９］唐志强，倪建同，苏百龄．羟基磷灰石义眼座植入的临床 在摘除眼球后，患者出现挛缩的４条直肌附着点会根 研究［Ｊ］．上海医药，２０１０，３１（６）：１３０—１３１． 据转动的健眼发生眼部凹陷情况，这也就是直肌附着 【１０］张瑞君，赵宁，孙一洲，等．羟基磷灰石义眼台植入在眼 点。通过有齿镊将附着点夹紧，并以此留为预置缝线。 球严重萎缩应用中的术式探讨『Ｊ１．中国美容整形外科 在植入羟基磷灰石义眼座后固定打结与之缝线，由此 杂志，２０１１，２２（７）：４３１—４３２． 就可保证义眼片位于患者生理位置，并确保患者眼球 ［１１］杜刚，张虹，李贵刚，等．增强核磁共振成像观察人眼羟 运转能够和健侧同步。一般情况下，都会在义眼座前 基磷灰石义眼座的纤维血管化过程［Ｊ】．国际眼科杂志， 植入异体巩膜，而临床观察发现，这种植人方法的排 ２００８，８（２）：３３０—３３２． 斥反应比较重［１２－１３］。本研究中二期植人手术患者中，有 ［１２］于梦溪，邵英，金洪娟，等．老年眼周基底细胞癌切除术 ９７例患者都没有置异体巩膜，而且术后反应比较轻， 后皮肤缺损的手术修复ｌＪ】．中国老年学杂志，２０１３，３３ 无患者出现排斥反应。在植入羟基磷灰石的前２ ｄ，患 （６）：１４４２—１４４３． 者都会出现不同程度的厌食、呕吐情况，这可能和对 ［１３］李霞，张巧玲．自体巩膜羟基磷灰石义眼座植入的临床 患者眼部副交感神经造成刺激相关。通常进行相应的 观察［Ｊ】．实用医技杂志，２００８，１５（７）：９０１—９０２． 常规护理就可以消除临床并发症。 （收稿日期：２０１３—１１－２５本文编辑：李继翔） （上接第３８页） ［９】Ｆｉｓｈｅｒ ＪＬ，Ｓｃｈｗａａｚｂａｕｒｎ ＪＡ，Ｗｒｅｎｓｅｈ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｅｐｉｄｅｍｉ— ２００７，７２（５—６）：３９７—４０２． ｏｌｏｇｙ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］＿Ｎｅｕｒｏｌ Ｃｌｉｎ，２００７，２５（４）：８６７－ ［１２］Ｈｕａｎｇ ＧＬ，Ｚｈａｎｇ ＸＨ，Ｇｕｏ ＧＬ，ｅｔ ａ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ８９０． ｏｆ ｍｉＲ一２ １ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ＳＹＢＲ－Ｇｒｅｅｎ Ｉ－ ［１０】Ｌｕ Ｚ，Ｌｉｕ Ｍ，Ｓｔｒｉｂｉｎｓｋｉｓ Ｖ，ｅｔ ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡ一２１ Ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｂａｓｅｄ ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＲＴ－ＰＣＲ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｄｕｃｔａｌｃａｒｃｉ— ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｐｒｏｇｒａｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｎｏｍａ Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｐ，２００９，２１（３）：６７３－６７９． ４ ｇｅｎｅ［Ｊ１．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００８，２７（３１）：４３７３－４３７９． ［１３］Ｈａｔｌｅｙ ＭＥ，Ｐａｔｒｉｃｋ ＤＭ，Ｇａｒｃｉａ ＭＲ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ［１ １】Ｓｌａｂｙ Ｏ，Ｓｖｏｂｏｄａ Ｍ，Ｆａｂｉａｎ Ｐ．Ａｌｔｅｒｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ－ Ｋ－Ｒａｓ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ ＭｉｃｒｏＲＮＡ－２ １［Ｊ］． ２１，ｍｉＲ－３ １，ｍｉＲ－１４３ ａｎｄ ｍｉＲ一１４５ ｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃｏ－ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１０，１８（３）：２８２—２９３． ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｆＪ］．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ， （收稿日期：２０１３—１１－３０本文编辑：任念） ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ ＶｏＩ．１ １ Ｎｏ．１２ Ａｐｒｉｌ ２０１４ ｉ４ｌ
