实验4 植物呼吸速率的测定(小笼框法)

一、目的

学会用小笼框法测定植物的呼吸速率。 二、材料用具及仪器药品

(1) 0.05mol/L Ba(OH)2溶液——称取15.76g纯Ba(OH)2·8H2O溶于冷开水稀释至1000ml即成。

(2) 0.05mol/L (COOH)2滴定液——称取(COOH)2·2H20 6.3025 克溶于蒸馏水中，稀释至1000ml即成。

2.2*为1ml 0.05mol/L 草酸相当于CO2的毫克数，该数字可以从下列反应式推算出来

Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2O

44从上面反应式可知：作用于1摩尔的Ba(OH)2要用去的 g的CO2。

2若1000ml 0.5mol/L Ba(OH)2相当于22gCO2，那么1000ml 0.05mol/L Ba(OH)2就相当于2.2g CO2。因此，1ml 0.05mol/L Ba(OH)2则相当于2.2mgCO2，因此1ml 0.05mol/L (COOH)2相当于2.2mg CO2。

（3）广口瓶、橡皮塞子、恒温箱、镊子、小笼框、酸滴定管、碱定管、漏斗。

（4）1%酚酞。 三、原理

在一密封的容器里，其空气中原来CO2之含量。用Ba(OH)2溶液将其吸收，然后用草酸进行滴定，即可计算出来。

Ba(OH)2+CO2→BaCO3+H2O

若将待测定种子装入在该密封的容器里，由于进行呼吸作用放出的CO2为Ba(OH)2溶液所吸收（从溶液中产生白色BaCO3沉淀可以看出）。然后用草酸进行滴定。

根据两次（实验和空白）滴定用去草酸量之差数，即可计算出在测定时间内呼吸作用所吸收CO2的量。从而计算出所测种子的呼吸速率。 四、方法

取干净的300ml广口瓶两个，并准备四个橡皮塞子如下：橡皮塞子（1）二个（公用，两孔，一孔倒插一端拉成毛细管状的玻璃管。另一孔插入玻璃棒）。橡皮塞子（2）二个（无孔，塞底钉入大头针，弯曲）。此时，还准备两个铁钞小笼框。

实验开始前，打开广口瓶瓶塞，顺瓶口方向摇瓶子多次，使瓶内空气与室内空气一致。

分别在一个小笼框内装入待测的材料（萌发的或没有萌发的水稻种子等），装入量以不高于小笼框高度易于流通气体为宜（萌发的水稻或小麦种子可装入100粒）。装好后把小笼框挂在橡皮塞子（2）的大头针上。

实验开始时，以橡皮塞子（1）紧塞广口瓶口，拨去塞子上的玻璃棒，立即用大姆指堵住孔口，迅速插入滴定管，滴入20ml 0.05mol/L Ba(OH)2溶液，然后拨出橡皮塞子（1），把挂有待测材料的橡皮塞子（2）迅速塞紧。同样，在另一广口瓶加入同量的0.05mol/L Ba(OH)2溶液，只是小笼框中不放实验材料，作空白实验用。

一切装置好后，立即把两瓶移放入30℃的恒温箱内（如作不同温度条件对呼吸速率影响比较试验：可将待测材料放于20℃以下，25℃以上等不同温度条件中），准确记录时间，不时摇动广口瓶（不能用力太锰， 以免小笼框掉下或碱液沾到小笼框上）。

经30分钟后，将广口瓶子取出，拔去塞子和小笼框，迅速换上橡皮塞子（1），塞紧瓶口。

如供测定的材料为萌发种子，可不必烘干，只计算其鲜重，否则应将材料烘干，称其干重。

在进行滴定之前，拔去塞子上的玻璃，迅速加入1%酚酞4滴，并插入滴定管，用0.05mol/L草酸进行滴定，记下滴定时两瓶用去草酸的量，然后计算供测定材料的呼吸速率。公式如下：

呼吸速率（mgCO2·g-1FW·h-1=

*

[空白滴定用草酸量（毫升）—呼吸滴定用草酸量（毫升）]×2.2

供测材料克鲜重（或克干重）× 呼吸时间（h）

五、实验结果

计算所测材料的呼吸速率。 六、思考题

1、实验期间，为什么要不时地摇动广口瓶？ 2、本实验为什么要塞紧广口瓶的盖子？