・肿瘤医学・ 中国当代医药２０１５年８月第２２卷第２３期 免疫组化技术和常规技术在肿瘤 病理诊断中的效果对比 姬国强 河南省平顶山市第二人民医院病理科。河南平顶山４６７０００ 【摘要】目的探讨免疫组化技术和常规技术在病理诊断中的临床诊断效果。方法对我院收治的５６例肿瘤患者 的资料进行分析，根据不同病理诊断方法将患者分为对照组（ｎ＝２８）和实验组（ｎ＝２８），对照组采用活检穿刺法诊 断，实验组采用免疫组化技术诊断，比较两种方法诊断的阳性率。结果实验组免疫组化染色后。患者的细胞结 构为变异型，甲胎蛋白、磷脂酰肌醇蛋白聚糖一３表达异常者为２４例，阳性率为８５．７％，显著高于对照组（１４例， ５０．Ｏ％）；实验组满意率为８２．１％，显著高于对照组（５７．１％）；实验组诊断后心理顾虑评分为（８７．４３￣４．２９）分，生理问 题评分为（８８．３０￣９．１０）分，信任感评分为（９１．３４￣１０．７７）分，显著高于对照组［（６９．９８￣３．４５）、（７０．１１￣４．３６）、（７２．３７￣ ５．８９）分］，差异均有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论肿瘤患者进行病理诊断时实施免疫组化技术诊断效果理想，值 得推广使用。 【关键词】免疫组化技术；常规技术；病理诊断；诊断效果 【中图分类号】Ｒ３９２．３ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７４—４７２１（２０１５）０６（ｂ）一００４６—０３ Ｅｆｆｅｃｔ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ａｎｄ ｒｏｕｔｉｎｅ ｔｅｃｈ— ｎｉｑｕｅ ｏｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｔｕｍｏｒｓ Ｊ／Ｇｕｏ——ｑｉａｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｅｏｐｌｅ Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｉｎ Ｐｉｎｇｄｉｎｇｓｈａｎ Ｃｉｔｙ，Ｈｅ ｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｐｉｎｇｄｉｎｇｓｈａｎ ４６７０００， Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ａｎｄ ｒｏｕｔｉｎｅ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｏｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ５６ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｄｍｉｔｔｅｄ ｉｎｔｏ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆ－ ｆｅｒｅｎｔ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄｓ，ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２８）ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２８）．Ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｏｌｒ ｇｒｏｕｐ，ｂｉｏｐｓｙ ｐｕｎｃｔｕｒｅ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ，ｗｈｉｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ，ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ，ａｆｔｅｒ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｅａｌ ｓｔａｉｎｉｎｇ，ｃｅｌｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗａｓ ｉｎ ｖａｒｉａｎｃｅ，２４ ｃａｓｅｓ ｗｅｒｅ ａｂｎｏｒｍａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｒ ＡＦＰ ａｎｄ Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３，ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ８５．７％，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（１４ ＣａＳｅＳ， ５０．０％）．Ｔｈｅ ｓａｔｉｓｆａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ８２．１％，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ ｆｏｒ ５７．１％．Ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ，ａｆｔｅｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｈｅｔ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｃｅｒｎｓ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓ— ｐｅｃｔｓ，ａｎｄ ｓｅｎｓｅ ｏｆ ｔｒｕｓｔ ｗｅｒｅ（８７．４３￣４．２９），（８８．３０￣９．１０），（９１．３４￣１０．７７）ｐｏｉｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ａｌｌ ｇｒｅａｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ［（６９．９８￣３．４５），（７０．１ １￣４．３６），（７２．３７￣５．８９）ｐｏｉｎｔｓ］，ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ａｌｌ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｎｉｇｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＜ ０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｍｐｌｅｍｅｎｔｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｐａ— ｔｉｅｎｔｓ ｉｓ ｏｐｔｉｍａｌ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｗｏｒｔｈｙ ｏｆ ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；Ｒｏｕｔｉｎｅ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ 肿瘤是临床上常见的疾病，这种疾病发病率较 病理诊断在肿瘤诊断中应用广泛．且效果理想。但 高，且随着人们生活节奏的加快，其发病率出现上升 是临床上对于病理诊断中不同技术尚存在较大的争 趋势，患者发病后临床症状不显著，患者一旦确诊已 议［２１。常规技术主要以活检穿刺诊断为主。这种方法 经是中、晚期，从而错过了最佳治疗时机【ｔ１。目前，临 虽然可以确定病灶类型、分期等，但是患者痛苦较大。 床上对于肿瘤尚缺乏理想的诊断方法。常规方法更 当前，免疫组化技术在病例诊断中开始使用，且该技 多的是以ＣＴ、磁共振成像等诊断方法为主，这种方 术已经融合了抗原修复技术、自动免疫染色系统以 法虽然能够确诊，但是误诊率或漏诊率较高。近年来， 及敏感检测系统等［３１。为了探讨免疫组化技术和常规 ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．‘２２ Ｎｏ．２３ Ａｕｇｕｓｔ ２０１ ５ 中国当代医药２０１５年８月第２２卷第２３期 ・肿瘤医学・ 技术在病理诊断中的临床诊断效果，对２０１３年４月～ ２结果 ２０１４年４月我院收治的５６例肿瘤患者的资料进行 ２．１两组诊断阳性率及满意度的比较 分析。 １资料与方法 １．１一般资料 实验组免疫组化染色后，患者细胞结构为变异型， ＡＦＰ及ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达异常者为２４例，阳性率为 ８５．７％，显著高于对照组（１４例，５０．０％）；实验组满意 对我院收治的５６例肿瘤患者的资料进行分析， 率为８２．１％，显著高于对照组（５７．１％），差异均有统计 ０５）（表１）。 其中１５例为肝癌，３５例为转移性肿瘤，４例为内胆管 学意义（氏０．癌，２例为血管瘤。 根据不同病理诊断方法将患者分 为对照组和实验组，实验组２８例，男１１例，女１７例， 年龄２４．５～７１．３岁，平均（４５．６＋２．４）岁，患者从发病到 入院诊断时间为１．１—７．９个月，平均（４．２￣１．１）个月；对 表１ 两组诊断阳性率及满意度的比较 （％）】 照组２８例，其中男２５例，女３例，年龄２５。３～７４．７岁， 平均（４７．４￣０－９）岁，患者从发病到人院诊断时间为１．２～ ７．８个月，平均（４．４￣１．６）个月。两组患者年龄、病程等 ２两组诊断后相关评分的比较 比较差异无统计学意义（ ０．０５），具有可比性。患者 ２．实验组诊断后心理顾虑、生理问题、信任感评分 对诊断方案、护理措施等均知情同意。 １．２方法 均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）（表２）。 表２两组诊断后相关评分的 较（分． 幻） １．２．１对照组对照组采用活检穿刺法诊断，根据病灶 类型、病灶位置等进行针对性的穿刺活检，活检过程 在超声下进行。取出组织与标准组织进行比较［４１。 １．２．２实验组实验组采用免疫组化技术诊断，所用试 剂主要包括：甲醛固定液、透明液、脱水液、蒸馏水、浸 蜡液、树胶及Ｕｌｔｒａｓｅｎ ＳｉｔｉｖｅＴＭ ＳＰ试剂嘲。具体诊断操 作为：取一块患者组织，组织大小为１ ｃｍ￣２ ｃｌｎＸＯ．２ ｃｍ。 将其充分浸泡在甲醛溶液中，浸泡时间控制在２ ｈ，然 ３讨论 近年来，免疫组化技术被广泛应用于肿瘤患者病 后采用透明液透明１ ｈ．脱水液脱水１ ｈ，浸蜡液浸泡 且效果理想 ０】。本研究显示，实验组免疫 １ ｈ。将组织埋在石蜡内，常规切片，厚度控制在 理诊断中，ｙｐｉ． ２ ｌａ，ｍ：将切片好的组织进行免疫组化染色，采用３％ 组化染色后。患者细胞结构为变异型，ＡＦＰ及ｇｌ过氧化氢溶液在３７％孵育１０ ｍｉｎ，采用蒸馏水冲洗 ｃａｎ一３表达异常者为２４例，阳性率为８５．７％，显著高 Ｏ％）（Ｐ＜０．０５）；实验组满意率为 ３ ａｒｉｎ。采用高压锅修复２ ｍｉｎ（温度控制在１１０％），采 于对照组（１４例，５０．１％。显著高于对照组（５７．１％）。免疫组化技术和常 用ＰＢＳ洗涤５ ｍｉｎ，常温下孵育２ ｈ，使用ＰＢＳ洗涤， ８２．该方法在诊断过程通过观察组 加入Ｕｌｔｒａｓｅｎ ＳｉｔｉｖｅＭＴ ＳＰ试剂，孵育后ＤＢＡ显色，最后 规技术相比优势较多，使用树胶进行封固 。 １．３观察指标 织切片中抗原的数量级在组织中的分布情况，对抗原 进行定位、定性以及定量的研究，由于抗原和抗体特 临床上通过免疫组化来标记抗体使 对检测结果进行判断，包括甲胎蛋白（ＡＦＰ）、磷 异性结合。因此，脂酰肌醇蛋白聚糖一３（ｇｌｙｐｉｃａｎ一３）等，组织免疫组化 其显色来确定组织细胞内的抗原【１１］。ＩＨＣ所用标本主 组织标本和细胞标本，其中制作组织标 技术染色呈棕黄色为阳性，反之则为阴性嘲。采用我院 要为两大类：自拟问卷调查表对患者诊断后相关指标进行评分，包 本中最常用、最基本的方法就是石蜡切片。石蜡切片 括心理顾虑、生理问题、信任感等，评分越高，表示检 对于组织形态保存好，更加有利于各种染色的对照观 查方法对患者产生的影响越小，检查依从性越高。 １．４统计学方法 察，有利于切片组织长时间保存；同时，石蜡切片过程 中使用的甲醛固定剂对组织内的抗原暴露能够产生 一定的影响．可以对切片组织进行修复［１２】。并且，免 计量资料以均数±标准差（ ）表示，采用ｔ检验。计 疫组化诊断技术的使用并不会对患者产生伤害，能够 采用统计软件ＳＰＳＳ １６．０对实验数据进行分析， 数资料以率表示，采用ｘ。检验。以Ｐ＜０．０５为差异有 消除患者内心诊断前的负面心理，提高患者诊断配 统计学意义。 合率。 ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２３ Ａｕｇｕｓｔ ２０１５ ・肿瘤医学・ 中国当代医药２０１５年８月第２２卷第２３期 ２】苏冬梅．探讨消除免疫组织化学非特异性染色的方法［Ｊ］． 为了有效提高诊断正确率，降低假阳性率的发生， ［免疫组化技术使用过程中必须严格遵循以下步骤操 性缓冲甲醛固定液，这种固定液和其他固定液相比具 有固定好、固定时间长久等优点，并且组织３个月内 诊断病理学杂志．２０１３，２０（２）：１２７． ３】吴丹桔．免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用［Ｊ］．现 作。①组织固定：对采集组织固定时主要使用１０％中 【代诊断与治疗，２０１３，１４（１５）：３４２８—３４２９． ［４］陈海玲，杨杰，牛多山．免疫组化在基层医院中的应用【Ｊ］． 中国民族民间医药，２０１０，１９（１６）：１９６—１９７． 阳性率比较稳定。②烤片：对组织进行烤片时应该放 加热．加热时要避免温度过高［１３］。③抗原修复：对组织 开。让切片自然冷却，然后开始染色。④染色：免疫组 ５】王红，王庆梅，蒋毅，等．扁桃体Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤１例伴文 置在适宜的温度。通常放在６０～６８￣Ｃ的恒温箱中进行 ［献复习［Ｊ］．安徽医药，２０１２，１６（６）：８０１—８０４． 京：北京科学技术出版社。２００９：４７６—４８３． ６吴秉铨，刘彦仿．６］免疫组化在病理诊断中的应用［Ｍ】．北 进行抗原修复时应该控制修复时间在８ ｍｉｎ，然后断 ［７】李红英．免疫组化三阴乳腺癌患者的临床病理特征及预 化技术进行染色时应该对苏木精进行反复染色，避免 ［染色颜色过深，影响诊断结果。同时，免疫组化技术显 色属于是一种化学反应——酶促反应，该反应能够和 抗原一抗体复合物中的碱性磷酸酶以及过氧化物酶等 后分析［Ｊ］．基层医学论坛，２０１１，１５（２９）：９６９． ［８】乳腺癌ＨＥＲ２检测指南编写组．乳腺癌ＨＥＲ２检测指南叨． 中华病理学杂志，２００９，３８（１２）：８３６—８４０． ［９】徐晓艳．１５例具有血管周上皮样细胞分化的肿瘤临床 病理分析【Ｊ］．Ｉ艋床与实验病理学杂志，２０１ｌ，２７（１１）：１２０６— １２０９． 发生反应．从而形成有颜色的复合物，并在组织和细 胞抗原时间进行沉淀。但是，由于肿瘤类型相对较多， 不同组织标本来源不同，其抗原的含量也不同，显色 反应时间上会存在差异【 。 因此。免疫组化技术在进行染色时应该注意以下 ［１０】王建平，张梅英，勾文峰，等．晶状体自发肿瘤转基因鼠 脑横截面标本制备及鉴定［Ｊ】．中国医科大学学报，２０１２， ４１（８）：６７３－６７５． 几个方面：①染色过程中必须保持切片处于湿润状 态；②孵育时应该严格控制孵育盒中蒸馏水量；③孵育 时应该保证孵育盒整体的平整，保证抗体液体均匀， ［１１】叶海燕，陈建国，罗东兰，等．妇科具有血管周上皮样细 胞分化的肿瘤３例临床病理分析 实用医学杂志，２０１ １， ２７（１０）：１８３４—１８３７． 避免抗体液体流人组织内，降低假阴性的发生率旧。 同时．临床上采用免疫组化技术诊断时能够消除患者 ［１２］蔡兆根，王萍，谢群，等．乳头状胶质神经元肿瘤临床病 理分析［Ｊ］．临床与实验病理学杂志，２０１１，２７（７）：７６８— ７７０． 内心的恐惧、害怕心理，降低患者病理诊断时的风险， 提高患者诊断依从性【垌。本次研究中，实验组诊断后 心理顾虑、生理问题、信任感评分均显著高于对照组 （Ｐ＜Ｏ．０５）。 ［１３】张世杰，郎振为，王欣欣，等．联合应用磷脂酰肌醇蛋白 多糖一３（ＣＰＣ一３）和细胞角蛋白一１９（ＣＫ一１９）免疫组化 检测在肝细胞肝癌诊断和鉴别诊断中的价值［Ｊ】．首都 医科大学学报，２０１ｌ，３２（５）：６５３－６５７． 笔者认为，免疫染色组化技术的正确诊断和鉴定 必须依靠免疫组化染色切片作为前提和基础，诊断时 【１４］陈云新，吴群英，张彤，等．子官颈及阔韧带原发Ｅｗｉｎｇ 要加强医生和技术员之间的相互协调、相互配合、共 肉瘤／夕 周原始神经外胚层肿瘤临床病理及免疫组化 同努力才能够保证免疫组化染色切片的顺利完成。但 是，临床上采用免疫染色组化技术诊断时尚存在不 特征分析 临床与实验病理学杂志，２０１２，２８（１２）：１３９９— １４００． 足，如假阳性、假阴性等。临床上对于进行病理诊断的 ［１５】徐红，杨昌伟，杨巧，等．硬化性上皮样纤维肉瘤复发１ 患者在常规穿刺的基础上联合免疫组化技术诊断，可 例的临床病理、免疫组化和电镜观察［Ｊ＿１．临床与实验病 发挥不同诊断方法的优势，提高临床确诊率，为患者 理学杂志，２０１１，２７（１１）：１２４６—１２４８． ［１６】Ｂａｕｅｒ ＫＲ，Ｂｒｏｗｎ Ｍ，Ｃｒｅｓｓ ＲＤ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｖｅ ａｎａｌｙ． ｓｉｓ ｏｆ ｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＥＲ）ｎｅｇａｔｉｖｅ，ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｒｅ— 后续的诊断、治疗等提供科学依据。 综上所述，肿瘤患者进行病理诊断时实施免疫组 化技术诊断效果理想，能够有效提高诊断阳性率，且 ｃｅｐｔｏｒ（ＰＲ）ｎｅｇａｔｉｖｅ，ａｎｄ ＨＥＲ２ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，ｔｈｅ ＳＯ—ｃａｌｌｅｄ ｔｒｉｐｌｎｅｇａｔｉｖｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ：ａ ｐｏｐｕｌａ－ 诊断时患者痛苦相对较小，值得推广。 【参考文献】 【ｌ】鲁波，任丽芳，李美平，等．双拼对照法在免疫组织化学染 色中应用叨．临床与实验病理学杂志，２０１４，３０（３）：３３７－３３８． ｔｉｏｎ ｂａｓｅｄ ｓｔｕｄｙ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ［Ｊ］． Ｃａｎｃｅｒ，２００７，１０９（９）：１７２． （收稿日期：２０１５—０６—０９本文编辑：卫轲） 潮嘲ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．２８ Ａｕｇｕｓｔ ２０１ ５
