新医学２０１２年７月第４３卷第７期 ５１１ 综 述 亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与不孕不育症的研究进展 鲁衍强芮欣忆 ［摘要］ 亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）是叶酸代谢与甲硫氨酸代谢中的一个关键酶， 其基因位点多态性会导致体内同型半胱氨酸水平升高和甲基化水平降低，参与男性不育和女性习 惯性流产的发生过程。该文就ＭＴＨＦＲ的基因多态性与不孕不育症的相关性研究作一概述。 ［关键词］ 亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；不孕不育症；男性不育；习惯性流产 １ 引 言 病、神经管缺陷、唇腭裂、先天性心脏病、妊娠期 不孕不育症正成为一个备受关注和亟待解决的 高血压疾病等多种疾病有关 。已发现ＭＴＨＦＲ 世界性问题，根据ＷＨＯ调查，目前全球约有１５％ 基因存在２０余种多态位点，其中最常见的是 的育龄夫妇不能生育，其中男性因素和女性因素各 Ｃ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ。第６７７位核苷酸由胸腺嘧啶 占一半。 （Ｔ）取代胞嘧啶（Ｃ）后，氨基酸发生错译，位 男性不育的病因具有多样性和复杂性的特点。 于催化区域的丙氨酸被缬氨酸代替，导致ＭＴＨＦＲ 目前还有约４０％一５０％的不育处于原因不明状 的耐热性和活性下降。Ｇｏｙｅｔｔｅ等 研究发现， 态＿１］，其中遗传因素一直是研究的一个热点。一 ＭＴＨＦＲ加热至４６℃持续５ ｍｉｎ后，１Ｔｒ型剩余酶活 般认为男性不育很大程度上是参与精子发生过程的 性为２２％，ＣＴ型剩余酶活性为５６％，而ＣＣ型剩 相关基因功能障碍，导致生精异常所致。女性不孕 余酶活性为６７％。第１２９８位核苷酸位于第７外显 的致病因素主要有遗传、内分泌、免疫、感染和解 子羧基端调节区域，腺嘌呤（Ａ）被胞嘧啶（Ｃ） 剖异常等，习惯性流产被认为是一个重要原因。 替代后，导致谷氨酸被丙氨酸取代。Ｗｅｉｓｂｅｒｇ等 Ｊ 近年来随着分子遗传学的发展，国内外研究表 研究发现，Ａ１２９８Ｃ多态性降低ＭＴＨＦＲ酶活性效 明，亚甲基四氢叶酸还原酶（Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏ－ 应稍次于Ｃ６７７Ｔ。亦有研究报道，ＭＴＨＦＲ １２９８ＡＣ ｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＭＴＨＦＲ）的基因多态性与男性不 和ｃｃ个体均未见明显的血浆Ｈｃｙ升高和叶酸降 育以及女性习惯性流产密切相关。现就相关研究进 低，而具有１２９８ＡＣ／６７７ＣＴ的个体表现出与６７７１Ｔｒ 展概述如下。 个体同样的血浆高Ｈｃｙ和低叶酸水平，ＭＴＨＦＲ活 ２ ＭＴＨＦＲ的生物学功能及基因多态性 性较野生型降低４０％Ｅ９］。 ＭＴＨＦＲ是人体内叶酸与甲硫氨酸代谢中的一 ３ ＭＴＨＦＲ基因多态性与男性不育 个关键酶，催化５，１０一亚甲基四氢叶酸还原为５－ ３．１ ＭＴＨＦＲ基因多态性与男性不育的相关性 甲基四氢叶酸。５．甲基四氢叶酸是体内叶酸生物活 Ｃｈｅｎ等 叫研究发现，成年小鼠睾丸中ＭＴＨ． 性的主要形式，有两方面的生物学功能：①作为 ＦＲ的表达明显高于肝脏、大脑等其他组织，提示 细胞内一碳单位的载体参与嘌呤和嘧啶的合成，并 它可能在精子发生过程中起到重要作用。另有研究 为ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质的甲基化提供甲基，影响 表明，ＭＴＨＦＲ基因敲除后，小鼠出现了精子生成 正常的ＤＮＡ代谢；②作为甲基供体，在甲硫氨酸 障碍，并失去了生育功能，进一步证实了ＭＴＨＦＲ 合酶的催化下，以维生素Ｂ 为辅酶，使血液中的 基因参与了雄性生殖过程 。 同型半胱氨酸（Ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，Ｈｃｙ）再甲基化生 目前许多国家已有针对ＭＴＨＦＲ基因多态性与 成甲硫氨酸，从而维持血浆Ｈｃｙ的正常水平，避 男性不育的相关性研究，其中Ｃ６７７Ｔ位点研究较 免高Ｈｃｙ血症的发生。 多。Ｓｉｎｇｈ等 对印度人群研究发现，ＭＴＨＦＲ 研究表明，ＭＴＨＦＲ基因多态性与心脑血管疾 Ｃ６７７Ｔ突变是男性不育的一个危险因素。韩国人群 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｇ．ｉｓｓｒｔ．０２５３－９８０２．２０１２．０７．０２７ 中也发现ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ多态性与男性不育相 作者单位：上海靶向分子医学研究所（２００４３３） 关 。邱晓峰等 对宁夏汉族男性人群进行了研 ５１２ 新医学２０１２年７月第４３卷第７期 究，发现不育患者与正常男性ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ基因 型频率分别为：ＣＣ ２７．７％比３５．０％，ＣＴ ４１．３％ 比４７．２％，ＴＴ ３１．０％比１７．８％，两组间基因型及 化，细胞内产生大量氧自由基，导致精子线粒体和 核ＤＮＡ损伤，最终引起精子功能受损 。同时有 研究认为Ｈｃｙ可抑制谷胱甘肽合成，破坏精液中 活性氧产生与清除的动态平衡，影响精子功能。另 等位基因频率分布比较差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０１），提示ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ多态性是宁夏汉族男 性不育的易感性风险因素。在四川、东北和皖南地 区的人群研究中也得到相同结论 １５－１７］。而对荷兰、 意大利和法国人群的研究发现，Ｃ６７７Ｔ多态性在不 有研究表明，高Ｈｃｙ血症可引起睾丸中的血管过 早发生动脉硬化，影响睾丸的血液供应，导致生精 功能障碍 。叶酸是一种抗氧化剂，当体内呈高 Ｈｃｙ水平时，如果摄人叶酸减少，体内无足够的叶 酸来抵制高Ｈｃｙ产生的氧化应激，可致精子ＤＮＡ 育组和对照组的频率分布差异并无统计学意 义¨ 。以上均为病例对照研究。意大利的Ｐａｒａｃ． ｃｈｉｎｉ等 自２００４年起，对１０５例特发性男性不育 患者的生育结局进行了为期１年的随访，结果显 示：ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ的三种基因型ＣＣ、ＣＴ、１ＴＩ’， 在４６例配偶受孕者中的频率分布为３９．１％、 ４５．７％、１５．２％，在５９例配偶未孕者中的频率分 布为１８．７％、５４．２％、２７．１％。Ｔ／＇基因型患者一 年内不育的风险明显升高（ＯＲ＝３．７，９５％ＣＩ １．４ ～１０．４），因此认为ＭＴＨＦＲ ６７７１ＴＩ’基因型是男性 不育显著的危险因素。这是目前国外为数不多的关 于ＭＴＨＦＲ多态性与男性不育的前瞻性研究，国内 尚未见有关前瞻性研究报道。 国内外对于ＭＴＨＦＲ Ａ１２９８Ｃ多态性在男性不 育人群中的研究较少。Ｐａｒｋ等 、Ｌｅｅ等 、 Ｄｈｉｌｌｏｎ等 研究发现，男性不育组与正常人的 Ａ１２９８Ｃ突变率比较差异无统计学意义。研究发现， １２９８Ｃ等位基因在病例组和对照组中的频率分布比 较差异有统计学意义；ＣＣ基因型在正常人中的频 率为１．５２％，而在特发性男性不育中高达９．０９％， 提示１２９８ＣＣ可能是男性不育患者的风险因子。 目前有关ＭＴＨＦＲ基因多态性与男性不育的相 关ｌ生研究，结果尚不一致。可能与种族之间基因型 频率差异及各人群所在的环境及营养状况不同有 关，或是由于样本数目及实验对象选择的标准不同 影响造成。 ３．２ ＭＴＨＦＲ基因多态性导致男性不育的发生机 制 ＭＴＨＦＲ基因多态性可能通过高Ｈｃｙ血症引起 男性不育 Ｊ。Ｈｃｙ在体内有两条代谢途径：①再 甲基化生成甲硫氨酸；②转硫基生成胱硫醚。Ｈｅｙ 再甲基化时由５．甲基四氢叶酸提供甲基，而ＭＴＨ． ＦＲ正是催化５，１０一亚甲基四氢叶酸转变成５．甲基 四氢叶酸的关键酶。研究表明，ＭＴＨＦＲ活性降低 可体内Ｈｃｙ向甲硫氨酸的转化，导致血浆Ｈｃｙ 水平升高 。Ｈｃｙ具有细胞毒性，可以使巯基氧 受损，影响生育功能。 ＭＴＨＦＲ基因多态性还可能通过影响ＤＮＡ甲基 化引起男性不育。精子发生是一个复杂的过程， ＤＮＡ甲基化是其重要的机制之一。ＭＴＨＦＲ通 过参与甲硫氨酸循环，为ＤＮＡ甲基化提供甲基， 使基因正确表达，保证体内精子的正常发生。 Ｏａｋｅｓ等 应用５．氮杂．２一脱氧胞苷抑制小鼠的 ＤＮＡ甲基化，发现小鼠睾丸中精子活力及受精能 力均明显降低。Ｃｈａｎ等 建立ＭＴＨＦＲ．／．模型发 现，ＭＴＨＦＲ敲除的ＢＡＬＢ／ｃ种类的雄性小鼠生长 发育迟滞、生精功能障碍以及不育，检测发现其精 子中印迹基因甲基化紊乱，进一步证明ＭＴＨＦＲ基 因多态性可能通过影响甲基化过程导致精子发生障 碍。 ４ ＭＴＨＦＲ基因多态性与复发性自然流产 ４．１ ＭＴＨＦＲ基因多态性与复发性自然流产的相 关性 ＭＴＨＦＲ基因多态性与复发性自然流产的相关 性早已备受关注。１９９９年Ｌｉｓｓａｋ等 ” 研究表明， ＭＴＨＦＲ ６７７ＣＴ和 ｒｒ型孕妇发生复发性自然流产的 危险性分别是ＣＣ型孕妇的８．７５倍和９．３３倍。王 亚文等 研究了ＭＴＨＦＲ基因多态性在夫妻间的 不同存在形式与复发性自然流产之间的关系。结果 显示，夫妻双方都是ＣＴ或ＴＴ基因型，其基因型 分布与流产发生的危险性增高高度相关（ＯＲ＝ ２．９４１，９５％ＣＩ １．０６２～８．１３３）；夫妻双方有一人 是６７７ＣＴ或１ｖｒ，另一人为ＣＣ，其基因型分布与流 产发生的危险性无关联（ＯＲ＝０．８１９，９５％ ０．３２—２．０９４）；夫妻双方都是６７７ＣＣ，其基因型分 布与发生流产的危险性降低高度相关（ＯＲ＝ ０．１８８，９５％Ｃ１ ０．０４５～０．７６］。提示子代携带 ＭＴＨＦＲ ６７７ＣＴ或１Ｔｒ可能是胚胎早期发育异常的原 因之一，导致流产的发生。Ｚｅｔｔｅｒｂｅｒｇ＿３ 的研究结 果同样表明胎儿ＭＴＨＦＲ基因突变会导致自然流产 危险系数的增高，说明复发性自然流产可能与母亲 新医学２０１２年７月第４３卷第７期 ５１３ 和胎儿基因之间的相互作用有关。这种基因之间的 协同作用对复发性自然流产病因学的影响逐渐成为 研究焦点。 ４．２ ＭＴＨＦＲ基因多态性导致复发性自然流产的 发生机制 酶及叶酸与先天性心脏病的关系［Ｊ］．中国全科医 学，２００５，８（１８）：１５５１—１５５３． ［６］ 左金玲，易建平，陈宝丽．妊娠高血压综合征基因 遗传学研究进展［Ｊ］．中国妇幼保健，２０１１，２６ （２４）：３８２２—３８２４． 导致复发性自然流产发生的机制可能有以下两 ［７］ ＧＯＹＥ ｒｒＥ Ｐ，ＦＲＯＳＳＴ Ｐ，ＲＯＳＥＮＢＬＡＴＦ Ｄ Ｓ．ｅｔ ａ１． Ｓｅｖｅｎ ｎｏｖｅｌ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｇｅｎｏｔｙｐｅ／ｐｈｅｎｏｌ ｔｙｐｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｅｖｅｒｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ 个方面：①妊娠期孕妇血液处于高凝状态，胎盘 部位血管网络内血栓的形成可导致流产、妊娠期高 血压疾病等病理妊娠，因而凝血机制在复发性自然 ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ，１９９５，５６（５）：１０５２—１０５９． 流产中的作用备受关注。ＭＴＨＦＲ是常见的凝血相 关基因，６７７位点的突变使酶活性降低，体内Ｈｃｙ 水平升高，从而引发高Ｈｅｙ血症，引起胎盘栓塞， 导致发生复发性自然流产。②ＭＴＨＦＲ在叶酸代 谢、甲基供体生成和核苷酸重新合成过程中起重要 作用。叶酸代谢异常可诱导ＤＮＡ甲基化的正常模 式发生畸变，进而将可能导致低效的ＤＮＡ复制和 修复。由于突变使得体内叶酸缺乏，胎盘组织中的 ＭＴＨＦＲ活性下降，引起胎儿生长发育必需的生物 成分ＤＮＡ出现甲基化不足，并且ＤＮＡ合成和修复 过程发生障碍，导致复发性自然流产 。 ５小 结 ＭＴＨＦＲ基因多态性存在地区和人种的差异， 其与不孕不育症的关系及作用机制仍有待进行多中 心、大样本的人群调查，以及长期的前瞻性研究。 自２００８年起，中国疾病预防控制中心妇幼保健中 心在全国妇幼保健系统推广实施妇幼分子遗传医学 检验项目，其中的叶酸代谢障碍遗传检验通过检测 ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ的基因多态性，为开展 不孕不育的遗传病病因学研究以及辅助性病因诊断 提供了技术手段，为不孕不育症的临床干预和治疗 提供了指导。 ［参考文献］ ［１］李博，兰风华．精子特异性表达基因的遗传多态性 与男性不育［Ｊ］．中华男科学杂志，２００８，１４（４）： ３６０—３６３． ［２］ 陈芳，郑红，许予明．亚甲基四氢叶酸还原酶基因 多态性与缺血性卒中［Ｊ］．国际脑血管病杂志， ２００８，１６（１１）：８７０—８７５． ［３］ 保睿，吴建新．人类神经管缺陷分子遗传学研究进 展［Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２００９，１７（５）：１－４． ［４］ 王苏梅，王建华，贾颐舫，等．山东地区非综合征性 唇腭裂患者ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ的多态性研究［Ｊ］． 中国优生与遗传杂志，２０１１，１９（５）：６－８． ［５］ 石建，李芬．同型半胱氨酸、亚甲基四氢叶酸还原 ［８］ ＷＥＩＳＢＥＲＧ Ｉ，ＴＲＡＮ Ｐ，ＣＨＲＩＳＴＥＮＳＥＮ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ａ ｓｅｃｏｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏ－ ｌａｔｅ ｒｅｄｕｅｔａｓｅ（ＭＴＨＦＲ）ａｓｓｏｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｅｎ— ｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ Ｍｅｔａｂ，１９９８，６４（３）： １６９—１７２． ［９］ ＲＯＢＩＥＮ Ｋ，ＵＬＲＩＣＨ Ｃ Ｍ．５，１０－Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏ－ ｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ａｎｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｒｉｓｋ：ａ ＨｕＧＥ ｍｉｎｉｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ，２００３，１５７ （７）：５７１－５８２． ［１０］ ＣＨＥＮ Ｚ，ＫＡＲＡＰＬＩＳ Ａ Ｃ，ＡＣＫＥＲＭＡＮ Ｓ Ｌ，ｅｔ ａ１． Ｍｉｃｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｅｘ— ｈｉｂｉｔ ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｃａ－ ｐａｃｉｔｙ，ｗｉｔｈ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ａｏｒｔｉｃ ｌｉｐｉｄ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ，２００１，１０（５）：４３３ ３． ［１１］ ＫＥＬＬＹ Ｔ Ｌ，ＮＥＡＧＡ Ｏ Ｒ，ＳＣＨＷＡＨＮ Ｂ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｉｎ— ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｉｎ ５，１０一ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ （ＭＴＨＦＲ）－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍａｌｅ ｍｉｃｅ ｉｓ ｐａｒｔｉＭｌｙ ａｌｌｅｖｉａｔｅｄ ｂｙ ｌｉ￣ｔｉｍｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｂｅｔａｉｎｅ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ Ｒｅｐｒｏｄ，２００５，７２（３）：６６７－６７７． ［１２］ ＳＩＮＧＨ Ｋ，ＳＩＮＧＨ Ｓ Ｋ，ＳＡＨ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｃ６７７Ｔ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｉｓ ａ８８ｏ— ｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍａｌｅ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｉｎ ａｎ Ｉｎｄｉａｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔ Ｊ Ａｎｄｒｏｌ，２００５，２８（２）：１１５－１１９． ［１３］ ＬＥＥ Ｈ Ｃ，ＪＥＯＮＧ Ｙ Ｍ，ＬＥＥ Ｓ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｆｏｕｒ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｆｏｌａｔｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｅｎ・ ｚｙｍｅ ｇｅｎｅｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ—ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｍａｌｅ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］． Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００６，２１（１２）：３１６２－３１７０． ［１４］ 邱晓峰，胡小平，李元杰，等．宁夏地区汉族ＭＴＨ・ ＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ多态性与男性无精和严重少弱精的 相关性分析［Ｊ］．宁夏医科大学学报，２０１１，３３ （７）：６２５—６２８． ［１５］ Ａ Ｚ Ｃ，ＹＡＮＧ Ｙ，ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ Ｃ６７７Ｔ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｅｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｉｎｆｅｒｔｉｌ— ｉｔｙ ｆｏｒ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｎ ｗｉｔｈ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ｏｒ ｓｅｖｅｒｅ ｏｌｉｇｏｚｏ— ｏｓｐｅｒｍｉａ［Ｊ］．Ａｓｉａｎ Ｊ Ａｎｄｒｏｌ，２００７，９（１）：５７－６２． ［１６］ 孙赫彤，张家颖，陆艳娟．亚甲基四氢叶酸还原酶 基因Ｃ６７７Ｔ多态性与男性不育的相关性［Ｊ］．生殖 ５１４ 与避孕，２００７，２７（７）：４４３ ６． 新医学２０１２年７月第４３卷第７期 ａｎｄ １２９８Ａ＞Ｃ）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ａｎｄ ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ ｗｉｔｈ ｓｉ— ｌｅｎｔ ｂｒａｉｎ ｉｆａｒｃｔｉｎｏｎ ａｎｄ ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ａ Ｋｏｒｅａｎ ［１７］ 杨本海，彭弋峰，皮静萍．亚甲基四氢叶酸还原酶 基因６７７ｃ—Ｔ多态性与皖南地区汉人弱精症的关联 ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｙｏｎｓｅｉ Ｍｅｄ Ｊ，２０１０，５１（２）：２５３— ２６０． 性［Ｊ］．皖南医学院学报，２０１０，２９（１）：５—７． ［１８］ＥＢＩＳＣＨ Ｉ Ｍ，ＶＡＮ ＨＥＥＲＤＥ Ｗ Ｌ，ＴＨＯＭＡＳ Ｃ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｃ６７７Ｔ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｐｏｌｙｍｏｒ－ ｐｈｉｓｍ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆｏｌｉｅ ａｃｉｄ ａｎｄ ｚｉｎｃ ［２６］ ＡＧＡＲＷＡＬ Ａ，ＭＡＫＫＥＲ Ｋ，ＳＨＡＲＭＡ Ｒ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｅｌ— ｅｖａｎｃｅ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ ｍａｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｉｆｅｒｔｉｎｌｉｔｙ：ａｎ ｕｐｄａｔｅ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｒｅｐｒｏｄ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００８，５９（１）：２— １１． ｓｕｌｆａｔｅ ｏｎ ｓｐｅｒｍ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉｌ Ｓｔｅｒｉｌ，２００３， ８０（５）：１１９０－１１９４． ［２７］ ＲＯＳＳＡＴＯ Ｍ．Ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｍａｌｅ ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉｌ Ｓｔｅｒｉｌ，２００４，８１（５）：１４２９—１４３０． ［１９］ＳＴＵＰＰＩＡ Ｌ，ＧＡＴＹＡ Ｖ，ＳＣＡＲＣＩＯＬＬＡ Ｏ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｈｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＭＴＨＦＲ）Ｃ６７７Ｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｍａｌｅ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｉｔａｌｙ［Ｊ］．Ｊ Ｅｎｄｏ— ｅｒｉｎｏｌ Ｉｎｖｅｓｔ，２００３，２６（７）：６２０－６２２． ［２０］ ＲＡＶＥＬ Ｃ，ＣＨＡＮＴＯＴ—ＢＡＳＴＡＲＡＵＤ Ｓ，ＣＨＡＬＭＥＹ Ｃ， ｅｔ ａ１．Ｌａｃｋ ｏｆ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒ— ｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｆｏｌａｔｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｕｎｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｐｅｒｍ ｃｏｕｎｔｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ， ２００９，４（８）：ｅ６５４０． ｌ２１ ＰＡＲＡＣＣＨＩＮＩ Ｖ，ＧＡＲＴＥ Ｓ，ＴＡＴＯＬＩ Ｅ．ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＧＳＴＭ１ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｍａｌｅ ｉｎｆｅｒ— ｔｉｌｉｔｙ：Ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｓｕｇｇｅｓｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｇｅｎｅ—ｇｅｎｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．９ ［Ｊ］．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ，２００６，１１（１）：５３－６０． ［２２］ＰＡＲＫ Ｊ Ｈ，ＬＥＥ Ｈ Ｃ，ＪＥＯＮＧ Ｙ Ｍ，ｅｔ ａ１．ＭＴＨＦＲ Ｃ６７７Ｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｕｎｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｉｎｆｅｒ－ ｔｉｌｅ ｍａｌｅ ｆａｃｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｓｓｉｓｔ Ｒｅｐｒｏｄ Ｇｅｎｅｔ，２００５，２２ （９—１０）：３６１—３６８． ［２３］ＤＨＩＬＬＯＮ Ｖ Ｓ，ＳＨＡＨＩＤ Ｍ，ＨＵＳＡＩＮ Ｓ Ａ．Ａｓｓｏｃｉａ— ｔｉｏｎｓ ｏｆ ＭＴＨＦＲ ＤＮＭＴ３ｂ ４９７７ ｂｐ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｉｎ ｍｔＤＮＡ ａｎｄ ＧＳＴＭ１ ｄｅｌｅｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｂｅｒｒａｎｔ ＣｐＧ ｉｓｌａｎｄ ｈｙｐｅｒｍ・ ｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＧＳＴＭ１ ｉｎ ｎｏｎ・－ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｉｎ・・ ｄｉａｎ ｍｅｎ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００７，１３（４）：２１３— ２２２． ［２４］ 刘玲．亚甲基四氢叶酸还原酶及甲硫氨酸合成酶基 因多态性与男性不育［Ｊ］．国际生殖健康计划生育杂 志，２０１１，３０（３），２２２－２２５． ［２５］ＨＡＮ Ｉ Ｂ，ＫＩＭ ０ Ｊ，ＡＨＮ Ｊ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＭＴＨＦＲ ６７７Ｃ＞Ｔ ［２８］ＯＡＫＥＳ Ｃ Ｃ，ＫＥＬＬＹ Ｔ Ｌ，ＲＯＢＡＩＲＥ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ａｄ— ｖｅｒｓｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ５－ａｚａ－２’一ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｏｎ ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅ— ｓｉｓ ｉｎｃｌｕｄｅ ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｐｅｒｍ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉ— ｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅ ｎｏｖｏ ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ，２００７，３２２（３）：１１７１—１１８０． ［２９］ ＣＨＡＮ Ｄ，ＣＵＳＨＮＩＥ Ｄ Ｗ，ＮＥＡＧＡ ０ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｒａｉｎ— ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｓｐｅｒｍ ｅｐｉ— ｇｅｎｅｔｉｃ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎ ５．１０一ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅ— ｄｕｃｔａｓｅ—ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｅｒｉｎｏｌｇｙ，２０１０，１５１ （７）：３３６３—３３７３． ［３０］ＬＩＳＳＡＫ Ａ，ＳＨＡＲＯＮ Ａ，ＦＲＵＣＨＴＥＲ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙ— ｍｏｒｐｈｉｓｍ ｆｏｒ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｃｉｎｅ ｔｏ ｔｈｙｍｉｎｅ ａｔ ｌｏｃａｔｉｏｎ ６７７ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｏｒｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｗｉｔｈ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｅａｒｌｙ ｆｅｔａｌ ｌｏｓｓ『Ｊ］．Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙ— ｎｅｅｏｌ，１９９９，１８１（２）：１２６－１２９． ［３１］ 王亚文，李芬，李义平，等．夫妻配对ＭＴＨＦＲ基因 型分布与不明原因反复流产的关系［Ｊ］．西安交通大 学学报（医学版），２００２，２３（４）：３５７—３５９． ［３２］ ＺＥＴＴＥＲＢＥＲＧ Ｈ．Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｒｅｄｕｅｔａｓｅ ａｎｄ ｔｒａｎｓｃｏｂａｌａｍｉｎ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｈｕｍａｎｓ ｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ａｂｏｒｔｉｏｎ：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ［Ｊ］．Ｒｅｐｏｒｄ Ｂｉｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２００４，２（１）：７—１４． ［３３］宋绿茵，戚潜辉，佘达贤，等．同型半胱氨酸代谢相 关酶基因多态性与习惯性流产关系的研究［Ｊ］．中华 围产医学杂志，２００５，８（３）：１６０—１６４． （收稿日期：２０１２－０３－０２；编辑：文轩）
