微柱凝胶法
1 标本: EDTA-K2 抗凝血 2.0ml 2 原理:
2.1 人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应(其本质为血凝反应);
2.2 检测系统是在微柱中(载体)装有的介质凝胶;
2.3 凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞(结合的)被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红细胞(即未结合、游离的)通过离心后沉入微柱的底部;
2.4 微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗
A、抗 B 试剂检测红
细胞上相应的血型抗原,从而鉴定红细胞的血型。 3 操作:
3.1 在 A1 孔悬空加入 50ul 标准 A1 红细胞,在 B 孔悬空加入
50ul 标准 B 红细胞,再在两孔中各加入 50ul 样品血浆。
3.2 在 A、 B、 D、C、 E、 Ctrl 六个孔内分别悬空加入 5%病人 红细胞悬液 10ul
3.3 将卡放到戴安娜专用离心机中离心 3.4 离心结束后在白色背景前观察结果 4 结果判断:
A 孔阳性 B 孔阴性为 A型;A 孔阴性 B孔阳性为 B型; A 孔阴性 B 孔阴性为 O型 ;A 孔阳性 B 孔阳性为 AB型。
9 分钟
凝集强度
阴性
描 述
100%(全部)的红细胞沉在微管的底部
+/-
100%
80%(大部分) 的红细胞沉在微管的下端
1/3
1+
2/3 之内
2+ 3+
80%(大部分) 的红细胞沉在微管的上端 80%(大部分) 的红细胞沉在微管的上端 凝集的细胞处于微管的顶部
2/3 之内 1/3 之内
4+
DP(双群) 红细胞同时位于微管上部和微管底部
H(溶血) 微管中液体出现透明红色
5. 注意事项
5.1 严格按操作规程操作,认真核对标本并作好标记。 5.2 应先加红细胞悬液,然后再加血浆。
5.3 为了防止冷凝集现象的干扰, 一般应在室温下进行试验。
5.4 严格控制离心速度和时间,防止假阳性或假阴性结果。
5.5 未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存, 用完后放 4℃ 冰箱保存 1 周。
5.6 判断结果后应仔细核对,记录,避免笔误。
6. 方法评价
卡式法定型使用安全,操作简单,结果稳定可靠,灵敏 度高,重复性好,但费用昂贵,需要特殊的仪器设备。
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